192461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a BBM-2478 antibiotikum komplexnek és komponenseinek a BBM-2478A és BBM-2478B antibiotikumoknak, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítményeknek az előállítására
1 192461 2 A hat nemzetség közül az Actinomadura nemzetség a talajban található, és széles körben elterjedt az egész világon. A J. Gen. Microbiol., 109, 69—78. (1978) szakcikkben Gordon fiziológiailag jellemzett 14 nocardiae osztályt, amely Actinomadura madurae törzset hoz létre. Gordon fiziológiai vizsgálatai alapján összehasonlítottuk a J907—21 jelzésű törzset az Actinomadura madurae-val (4. táblázat). A J907—21 jelzésű törzs szorosabb kapcsolatban volt az Actinomadura madurae-val (a hasonlóság 85,7%-os). mint a többi, lile és IV sejtfaltípusú osztállyal (a hasonlóság mértéke 54,8—76,9%). A IIIB típusú sejtfallal rendelkező hat nemzetség közötti fiziológiai összefüggés azonban nem megállapított, mivel e nemzetségek világosan különböznek egymástól morfológiailag. Ennek következtében a J907—21 jelzésű törzs minősítése csak spórátlan nem-Streptomyces lehet. 4. táblázat A J907—21 jelzésű törzs és az Actinomadura madurae diagnosztikai fiziológiai tulajdonságainak összehasonlítása Actino-J907—21 madura* törzs madurae (47)** Az alábbi anyagok bontása adenin + — kazein + + hipoxantin + + tirozin + + karbamid — — xantin — — Ellenállás az alábbiakkal szemben: lizozim — — rifampin + v Az alábbi anyagok hidrolízise: eszkulin x\ + + hippurát + keményítő + + Savképzés az alábbi vegyül etekből: arabinóz + + cellobióz + + glükóz 4* + glicerin + + ínozit + v laktóz — v mannit + + mannóz 4~ + melecitóz — melibióz — — raffinóz — — ramnóz 4-+ szorbit — trehalóz 4-+ xilóz + 4-Az alábbi csoportok hasznosítása: benzoát — — citrát — V mukát — — szukcinát + V tartarát — — Nitrit képződése nitrátból — + Túlélés 50 °C-on 8 óra elteltével — + Jelölések: -f- = pozitív; — = negatív; v 15—84% pozitív. * Gordon és munkatársai adatai. ** A vizsgált törzsek száma. Ugyanúgy, mint más organizmusoknál, a J907—21 jelzésű törzs jellemzői megváltoztathatók. Például a J907—21 jelzésű törzs mesterséges variánsaihoz és mutánsaihoz juthatunk önmagában ismert módon történő kezeléssel, például ultraibolya fénnyel, röntgensugárzással, nagyfrekvenciás hullámokkal, radioaktív sugárzással és vegyszerekkel. A találmány körébe tartozik a J907—21 jelzésű törzs valamennyi olyan természetes vagy mesterséges variánsa és mutánsa (a következőkben ezeket együttesen mutánsoknak nevezzük), amelyek a BBM—2478 jelű antibiotikumokat termelik. Az antibiotikum termelése A találmány értelmében a BBM—2478 jelű antibiotikumokat úgy állítjuk elő, hogy a J907— 21 jelzésű törzset (ATCC 39417) vagy annak egy, a BBM—2478 antibiotikumot termelő mutánsát vizes táptalajba bemerítve, aerob körülmények között tenyésztjük. A termelő organizmus tenyésztését olyan táptalajon végezzük, amely valamely asszimilálható szénforrást, például egy asszimilálható szénhidrátot tartalmaz. Alkalmas szénforrás például a glicerin, arabinóz, xilóz, glükóz fruktóz, mannóz, oldható keményítő, mannit és cellobióz. A táptalaj asszimilálható nitrogénforrást is tartalmaz, amely például halliszt, szójaliszt, kukorica-csávalé, peptonok, húskivonat, földimogyoróliszt, élesztőkivonat vagy ammóniumsó lehet. Kívánt esetben a táptalajhoz szervetlen sókat, így nátriumkloridot, káliumkloridot, magnéziumszulfátot, kalciumkarbonátot, foszfátokat stb. adunk. Nyomelemeket, például rezet, mangánt, vasat, cinket stb. is adhatunk a táptalajhoz kívánt esetben. E nyomelemeket más táptalajkomponensek szennyezéseként is a táptalajba juttathatjuk. Az inkubálás hőmérséklete minden olyan hőmérsékletérték lehet, amelyen a termelő törzs növekedésre képes, például 15—43 °C. A fermentálást előnyösen 25—35 °C-on, célszerűen 27—32 °C-on végezzük. Előnyösen semleges vagy közel semleges pH-értéket alkalmazunk a táptalajban, és az antibiotikum termelését 6— 15 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
