192123. lajstromszámú szabadalom • Eljárás interferon indukálására
1 2 Juk. Már a 12. órában jelentős szérum-interferon szint (128-256 NE/ml) figyelhető meg. A maximális titer (4096-8192 NE/ml) a 24.-48. órában figyelhető meg. A 72. órától az interferon-szint csökkenése figyelhető meg, azonban a 120. óráig jelentős a vér interferon-szintje. A dipiiidamol az interferont intraperitoneális és intravénás adagolással indukálja. Ezekben az esetekben a hatásos dózis 0,1 — 16,7 mg/kg vagy több, illetve 0,01—50 mg/kg, az elért maximális titer azonban alacsonyabb: 256 és 128 NE/ml - az optimális 16,7 és 0,1 mg/kg dózisok esetén. A dipiridamol interferon indukáló képessége kifejezett szelektivitást mutat. Orális adagolás esetén az akut LD50 érték 2150 mg/kg, ami azt jelenti, hogy a szelektivitási index ebben az esetben is viszonylag magas értéket ér el ( 1500-ig), önként jelentkező személyeken végzett kísérletekben egyszer egy 100 mg-os dózisban (1—2 mg/kg) perorálisan adagolt dipiridamol jelentősen, 80%-kal fokozza az interferon termelést. A 24.-48. órában átlagosan 200-szoros növekedés figyelhető meg a vér interferon titerében a kezdeti szinthez képest: a kiindulási 5,2 ± 1,7 NE/ml szint 1069,0 ± 479,7 NE/ /ml-re növekedett. A sejttenyészetekben indukált és a vérszérumban a dipiridamol-kezelés után található interferont fiziko-kémiai és biológiai tesztekkel, egy immunológiai, az anti-interferon szérumok, pl. IFN-a és IFN-/5 semlegesítésén alapuló teszt segítségével azonosítottuk. A dipiridamol egyszeri, az interferon indukálásnak megfelelő dózisban alkalmazva kifejezett antivírusos aktivitást mutat in vivo vírusfertőzések esetén. Laboratóriumi kísérleti vírusfertőzések esetén (fehéregér, Grippe A vírus, Semliki vírus, Herpes Simplex I vírus) jelentős védőhatás figyelhető meg, ha a dipiridamolt perorálisan vagy intraperitoneálisan a vírusfertőzés előtt 24 órával, vagy utána 24 vagy 72 órával egyszer adagoljuk. A dipiridainolt por, granulátum, illetve tabletta vagy vizes oldat, emulzió vagy szuszpenzió formájában készíthetjük el adagoláshoz. A találmány szerinti eljárás előnyei a következők:- a szervezetben magas interferon-titer indukálódik,- kényelmes adagolási mód - a legmagasabb interferon-titer perorális adagolásnál érhető el, . - az induktor viszonylag alacsony toxicitása, és ennek megfelelően interferon indukáló hatásának nagy szelektivitása —jez olyan tulajdonság, amelyben a dipiridamol az isnjert kismolekulájú induktorokat jelentősen, valamint jnajd minden nagy molekulájú interferon induktort túlszárnyal, — viszonylag hosszantartó hatás, az adagolás után akár 96 órával is magas interferon-szint a szervezetben és a szérumban, — egyértelmű interferon-indukáló hatás in vitro mind limfoid sejtek (explantált, vonalak), mind nem-limfoid sejtek (fibroblasztok és mások) esetén, ebben a tulajdonságában a dipiridamol a legtöbb kismolekulájú interferon induktort túlszárnyalja. A találmány szerinti eljárást a következő példával szemléltetjük közelebbről. Az 1. táblázatban a dipiridamol különböző sejttenyészetekben kifejtett interferon indukáló hatását foglaltuk össze, ln vitro, explantált peritoneális egér leukociták esetén 100 /amól/1 hatására 256 NE/ml fölötti maximális interferon titer érhető el. Ez a titer magasabb, mint a kettősláncú E.coli f2 fág RNS 5 pg/tul-ével elérhető. Monomolekuláris L-sejt tenyészetben az egyszeri 30 jumól/1 koncentrációjú egyszeri dipíridamol-adagolás 128 NE/ml fölötti ínterferon-titert indukál, ami ténylegesen meghaladja a poliLC ( 10 /Jg/ml) interferon termelő hatását. 1, táblázat A dipiridamol interferon indukáló hatása sejttenyészetekben Sejttenyészet min. IFN— IC opt. IFN—IC maximális (fnnól/1) (fimól/1) interferon-titer (NE/ml) Peritoneális egér-leukociták 3 100-1000 >256 L-sejtek 10 30-300 >128 embrionális egér-fibroblasztok 100 300 16 humán diploid embrionális fibroblasztok 10 100-300 16-32 2. táblázat Szérum interferon-szint fehéregerekben dipiridamol egyszeri intravénás adagolása után Dipiridamol- Interferon-titer a dipiridamol adagolása dózis után különböző időpontokban (NE/ml) (mg/kg) 6. 12. 24. óra 48. 72. 50,0 8 8(4) 16,7 32 16 5,5 16 16 1,8 16 16 8 0,6 < 4 8 32 16 16 0.2 < 4 32 32 0,1 < 4 < 4 < 4 128 32 0,05 < 4> 64 32 0,01 16 0 <4 < 4 < 4 < 4 4 (placebo) 192.123 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 4
