192107. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enkefolináz-gátló hatású szubsztituált depeptidek előállítására
1 alanin. 14. N<L-1 -karboxi-2-fenil-etil)-L-fenil-alanil-gamma -amino-vajsav, op. 209—211°C. 15. N-(L-1 -karboxi-3-fenil-propil)-L-fenil-alanil-béta -alanin-hemidhirát, op. 176—190°C. 16. példa N-(D ,G1 -karboxi-etil)-L-fenil -alanil -gli dn 0,6 g (2,5 mmól) L-fenil-alanil-glidn 5 ml n nátriunvhidroxiddal és 20 ml vízzel készült oldatához 1 óra alatt 0,25 g (2,5 mmól) 2-klór-propionsavat adunk 5 ml n nátrium-hidroxidban oldva, az adagolás alatt a reakcióelegy hőmérsékletet 80—90aC között tartjuk, az oldat pH ját pedig 8-9 között. Az adagolás befejezése után az elegyet még 15 percig tartjuk 80—90°C között melegítéssel, majd csökkentett nyomáson bepároljuk és 5 s/tf.%-os vizes sósavval semlegesítjük. Ismét szárazra pároljuk az elegyet és szürke szilárd anyagot kapunk. A szürke szilárd anyagot éténél keverjük, majd az étert dekantáljuk, ezután a szilárd anyagot hideg etanollal keverjük. A fel nem oldódott anyagot kiszűrjük az etanolos oldatból, amelyet ezután bepárolunk szárazra és így a cím szerinti diasztereomer elegyet kapjuk. Olvadáspontja: 90-120°C. 17. példa a) Butiloxi-karbonil-hidrazin 0,1 ml hidrazin-hidrát IS ml izopropanollal készült kevert oldatához cseppenként di(terc-butil)-dikarbonát izopropanolos oldatát adjuk (az oldat 0,45 mi dikarbonátot tartalmaz 7 ml propanolban). Az adagolás sebessége 1 csepp/7 másodperc. A reakciót leállítjuk, miután a terc-butil-dikabonát megközelítőleg 6/7-ét beadagoltuk. Az anyalúgot bepároljuk és a kapott szilárd anyagot kovasavgélen kromatografáljuk klorofomumetanol 97:3 térfogatarányú olegyét használva mozgó fázisként. A 20-33. frakciókat hagyományos módon feldolgozva 0,105 g cím szerinti vegyületet kapunk szilárd anyag formájában, oladáspontja 34-35°C. Éter-petroléter elegyéből való átkrístályosítás után a szilárd anyag 36,5—37°C-on olvad. b) N-benzilidén-N* -terc-butoxi-karbonfl-hidrazin 3,47 g a) lépésben kapott terméket 30 ml etanollal oldunk keverés közben és 2,79 g benzaldehidet adunk hozzá. Az elegyet keverés közben 10 percig gőzfilrdőn melegítjük, majd jeges-vizes fürdőben lehűtjük. A kapott reakcióelegyet szűrve a dm szedntl terméket kapjuk (3,5 g). Az anyalúgot bepéroljuk és a kapott szilárd anyagot hexánnal mossuk, majd szűrjük, így 1,56 g szilárd terméket kapunk. A két frakdót kovasavgél vékonyrétegen kloroform :metanol 973 térfogatarányú elegyével kromatografáljuk. A vizsgálatok szerint a két frakdó lényegében azonos anyagból áll. Az összhoZam 5 06 g, olvadáspontja 190-194,5ÖC. c) _ N-benzil-N1 -terc-butoxi-karbonil-hidrazin 1 g b) lépésben kapott terméket 30 ml tetrahidro-2 furánban oldunk, 0,23 g 5%-os palládium szén katalizátort adunk hozzá és a hidrogénezést kb. 15. percig folytatjuk. A reakcióelegyet szüljük és az anyalúgot be pároljuk, így 0,96 g cím szerinti terméket kapunk. d) L-metil-2-izocianato4-metil-valerát 7,0 g L-leucin-metil-észtert 200 ml, előzőleg kalcium-hidriden szárított toluolban szuszpendálunk. A szuszpenziót keverjük és feleslegben vett mennyiségű foszgén gázt buborékoltatunk át rajta. Miután a szilárd anyag feloldódott a reakdóelegyet forrásig melegítjük és félóra hosszat visszafolyatás közben forraljuk. A melegítés megszüntetése után nitrogéngázt buborékoltatunk keresztül az oldaton a foszgén feleslegének és az oldott hidrogénklorid reakdótermék eltávolítására. Ezután a művelet után az oldatot bepároljuk és a kapott folyékony terméket desztilláljuk. (0í/Íf = —25,556 (c = 5,7%, toluol) (irodalmi érték -22,4°, Annalen 1952, 575, 217). Forráspontja 45 Torr nyomáson 71 —72°C. e) N-terc-butoxi-kaibonil-alfa-azafenil-alanil-L-leu-. cin-metil-észter A c) lépésben kapott N-benzil-N1 -terc-butoxi-karbonil-hidrazin-metil-észterének 2,47 gját 15 ml toluolban oldjuk keverés közben. Ezután 1,90 g d) lépésben kapott terméket, 1,12 g trietil-amint adunk a reakcióé légyhez és 16 óra hosszat keverjük. Ezután 200 ml etil-acetóttal hígítjuk, egyszer 5 s/tf.%-os vizes citromsav oldattal, majd telített nátrium-klorid oldattal és végül vízzel mossuk. Az oldatot vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és a nátrium-szulfát kiszűrése utón bepároljuk, majd a kapott maradékot 75 g kovasavgélen hexán és kloroform 7:3 térfogataxányú elegyével kromatografáljuk. A hagyományos feldolgozás után 3,72 g dm szerinti terméket kapunk. (otlff - 7,1° (c = 3,29% kloroform). f) alfa-azafenil-alanil-L-leucin-metil-észter-hidroklorid Hidrgoén-klorid és jégecet 1:80 térfogatarányú vízmentes elegyéből 8,0 ml-t 4°Gra hűtünk keverés közben és az e) lépésben kapott terméket hozzáadjuk. A keverést 4-on még 20 percig folytatjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk. A maradékot kovasavgél vékonyrétegen kloroform metanol 98:2 térfogat arányú elegyével kromatografáljuk. A megfelelő frakciókat, amelyek a megfelelő Rf-értékű vegyületet tartalmazzák, egyesítjük és így 0,163 mg cím szerinti terméket kapunk, (o= +1,9*. Tömegspektrum: 293 (-HQ) 262 (-m-OCH3) 234 (m—C02 CH3) g) N-(D,L-1 -etoxi-karbonil-3-fenil-propfl)-alfa-azafenil-alanil-L-leudn-metil-észter 0,151 g (0,45 mmól) f) lépésben kapott terméket 3 ml metanolban oldunk és 83,4 mg etfl-4-fenil-2-oxobutanoátot adunk hozzá 60°C-on keverés közben. A reakciót kovasavgél rétegen,kloroform-aceton 9:1 térfogatarányú elegyével kromatografálva követjük. Amikor a reakció lényegében végbement, 70 mg nátrlum-ciano-bórhidridet adunk hozzá és 4 csepp 10 s/tf.%-os vizes ecetsav oldatot. 192.107 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
