192004. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-(benzo-tienil-acetil-amino)-cef-3-m-4-karbonsav-származékok előállítására
1 192.004 2 ra pároljuk. Az olajos maradékot etil-acetátban oldjuk és az oldatot előbb 1 n sósav oldattal, majd nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk. Szárítunk és szárazra párolva olaj alakjában 1,62 g nyers termé- g két nyerünk. A terméket előzetesen redukált 5%-os Pd/C katalizátorral észter-mentesítjük a következők szerint. Az észter 1,62 g-ját 75 ml tetrahidrofuránban oldjuk és 1,62 g 5%-os Pd/C 40 ml metanolban készített olyan szuszpenzióját adjuk az oldathoz, amelyet előzetesen 10 30 percen át 3,8 atm H2-nyomáson redukáltunk. A redukciót szobahőfokon 45 percen át végezzük 3,8 atm Hj-nyomáson. A redukciós el egyet szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A nyers temméket etilacetát-víz elegyben oldjuk és az elegy pH értékét 7,8-re állítjuk. A vizes réteget elválasztjuk, etil-acetát- 15 tál mossuk és 2,2 pH értékre savanyítjuk. Az észtermentesített terméket a vizes fázisból etil-acetáttal kivonatoljuk, a kivonatot szárítjuk és azt bepárolva 0,72 g amino-védett (terc-BOC) szabad savat nyerünk. A terméket 8 ml trifluor-ecetsavval 8 percen át kezelve védőcsoport-mentesítettük. A reakcióelegyet 20 100 ml vízzel hígítjuk és híg ammónium-hidroxiddal pHját 7,0-ra állítjuk. Az oldatot ezután szűrjük és fordított fázisú (Waters Associates gyártmányú) Cj 8 szilicium-dioxidon nagynyomású folyadékkromatográfiának vetjük alá grádiensként 0—20%-aceto-nitril-l% 25 ecetsav-víz elegyet használva. A számos frakciót egyesítjük és liofilizáljuk. A 33—37 frakciókat egyesítjük. Ezek tartalmazzák az Lizomert (az asszimetria központ az oldalláncban) és a 29—31 frakciók a D-izomert tartalmazzák. 30 3. példa 7ß-(2-amino-2-(benzo-tien-5-il)-aceti]-amino) -3- metil-3-cefem-4-karbonsav 100 mg p-nitro-benzil-z-amino-dezacetoxi-cefalos- 35 poranát 3 ml száraz aceto-nitrilben készített, nitrogén-atmoszférában 0°C-on tartott oldatába aterc-butilo)H-karboni)-amino-a(benzo-tien-5-il)-ecetsav 6 ml tetra-hidrofurános oldatát adjuk, amely 70 mg EEDQ-t is tartalmaz. A reakcióelegyet egy éjszakán át kevertétjük és szárazra pároljuk. A maradékot etil-acetát- 40 ban oldjuk, s előbb 1 n sósav-oldattal, majd telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, végül telített nátrium-hidrogén-karbonátoldattal mossuk, végül szárítjuk és szárazra pároljuk. 158 mg (95%) nyers terméket kapunk. E terméket 170 mg hasonló úton kapottal egyesítjük. Az egyesített nyerstermék (300 mg) szilikagélen kromatografálva, majd 15%-os etilacetát:toluol eleggyel eluálva a D-(terc-BOC)-védett termék p-nitro-benzil-észterének 100 mg-ját adja. Ugyancsak nyertünk az Lformából 107 mg-ot és 25 mg-ot a D,L-elegyből. 50 D-forma: NMR (delta, 90 MHz, CDCl3), 1,4 (s, 9H, terc- BOC), 2,1 (s, 3H, D3-H5), 3,24 (ABq, 2H, C2-II2), 4,90 (d, 1H, C6-H), 5,28 (s, 2H, pNBCH2), 5,38 (s, Ili Of-CH), 5,74 (m, 3H, C7—H és amid-NH), 6,82(d, 1H, amidNH), 7,12—8,24 (m, 9H, arom.H); * Lforma: NMR (delta, 90 MHz, CDC13), 1,4 (s, 91i terc- BOQ, 2,1 (s, 3H, C3-H3), 3,24 (ABq, 2H, Cj-^), 4,88 (d, 1H, Cé-H), 5,22 (s, 2H, pNHCH2), 5,34 (s, 1H, a-CH), 5,62 (m, 3H, C7—H és amidNH), 6,84 (d, 1H, amidNH), 7,08—8,20(m, 9H, aromás H). A fenti termékből a terc-butoxi-karbonil-csoport eltávolítása után a p-nitro-benzil-észter-csoportot távolítottuk el a következők szerint. 62 mg 5%-os Pd/C katalizátort 10 ml etanolban 30 percen át 4,2 atm hidrogénnyomáson elő-redukáltunk. E szuszpenzióhoz 61,3 mg p-nitro-benzil-7/3-(2-amino- 2-(benzo-tien-5-il)-acetil-amino)-3-metil-3-cefem-4- karbonsavat adtunk 40 ml metanolban és 2 ml 1 n sósavban oldva. A hidrogénezés 1 1/2 óráig folyt 4,2 atm H2-nyomáson. s ezután 2 ml sósavat adtunk hozzá. Az elegyet további 5 percig kevertettük, sezt követően a katalizátort szűréssel távolítottuk el. A katalizátort 4 ml 1:1 arányú metanol-víz eleggyel, majd tiszta metanollal mostuk. A szerves fázisokat egyesítettük és etil-acetátban oldottuk. A pH értékét 1 n nátriumhidroxid-oldattal 7-re állítottuk be, a szerves fázist elvetettük és a vizes fázist újból etil-acetáttal kivonatoltuk. A vizes fázist ezt követően 1 n sósav oldattal 4,25 pH értékig savanyítottuk, majd liofilizáltunk. A maradékot kb. 2 ml vízben szuszpendáltuk és a pHértékét 4,2Sre állítottuk. Ezt követően a szuszpenzicót szűrtük és 30 mg (65%) végterméket nyertünk. D-forma: NMR (delta, 270 MHz, D20/DCl), 197 (s, 3H, C3 -H), 3,16 (ABq, 2H, C2-H2), 5,05 (d, 1H, C6H), 5,4 (s, 1H, a-CH), 5,58 (m, 1H, C7-H), 7,35-8,05 (m, 5H, aromás H). SZABADALMI IGÉNYPONT Eljárás (I) általános képletű benzotienü-cefem antibiotikumok — amely általános képletben R4 (1) általános képletű csoport, amelyben R hidrogénatom vagy 1 —3 szénatomos alkilcsoport, R2 hidrogénatom vagy 2—8 szénatomos alkoxi-karbonil-csoport és R6 hidrogénatom vagy nitrobenzilcsoport —, vagy ezek gyógyszerészetileg elfogadható sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletű vegyületet a (III) általános képletű acilezőszerrel vaçr annak aktivált származékával reagáltatjuk, ahol R , R4 és R6 jelentése az előbbiekben megadott, és kívánt esetben lehasítjuk a jelenlevő amino-védőcsoportotés kívánt esetben egy (I) általános képletű vegyületet sójává alakítunk, vagy az (I) általános képletű vegyület valamely sóját szabad aminná vagy savvá alakítjuk. 10 db ábra Országos Találmányi Hivatal F.k.: Himer Zoltán "Kódex 6
