191991. lajstromszámú szabadalom • Eljárás merkapto-ecetsav-amid- és 3-merkapto-propionsav-amid-származékokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
9 191991 10 hidrolízist 0,2 n sósavoldat hozzáadásával leállítjuk, és az inkubált terméket 15 percen át tartó 95 °C hőmérsékleten végzett hevítéssel fehérjementesítjük. Ilyen körülmények között a reakció előrehaladása lineáris. A hidrolízis következtében keletkezett, Iriciált metabolitokat az enkefalintól porapak- Q oszlopon végzett kromatográfiával elkülönítjük; a metabolitokat TRIS-pu ff er-oldattal eluáljuk, ekkor az enkefalin az oszlopon marad, és ezt követően etanollal eluálva összegyűjtjük. A különböző találmány szerinti vegyületek hatását az alábbi táblázatban az 50%-os gátlást előidéző koncentrációval jellemeztük. EREDMÉNYEK: A vegyületek Az enkefalináz gátlása: IC50 érték 10~5 mólban kifejezve (N-Fenil)-2-merkapto-ecetsav-amid 0.3 N- ( 4- Klór- f e nil ) - 2- -merkapto-ecetsav-amid 0.5 S-[2-(4-Klór-fenil-amino) 1 —-2-oxo-etil]-etán-tioát 0.6 (N-Fenil)-3-merkapto-propionsav-amid 4 N- [ 2- ( 2-tiazolil ) ]- 2- -merkapto-ecetsav-amid 3 S-[ 2- (2-Tiazolil )-amino-2-oxo-etil]-etán-tioát 13 2. A fájdalomcsillapító hatás vizsgálata gyulladásos szöveteken E vizsgálat céljára a módosított Randall- Selitto eljárást alkalmaztuk [Randall, L.O. és Selitto, J.J.: .Eljárás a fájdalomcsillapító hatás mérésére gyulladásos szöveten"; Arch. Int. Pharmacodyn. 111, 409 (1957)]. E módszer abban áll, hogy a fájdalomcsillapító hatást olyan patkányon vizsgáljuk, amelynek fájdalommal szemben való érzékenységi küszöbét egy gyulladásos folyamat lecsökkenti. A gyulladást úgy idézzük elő, hogy a patkány egyik hátsó végtagjának plantáris bőnyéjébe (aponeurosis-ába) 0,25 mg/talp mennyiségben carrageemint fecskendezünk. A fájdalomérzést úgy idézzük elő, hogy a patkány e végtagjának hátsó részére mechanikus nyomást gyakorolunk, és ezt a nyomást analgeziméter segítségével fokozatosan növeljük. A fájdalomküszöböt azzal a nyomásértékkel mérjük, amely ahhoz szükséges, hogy hatására az állat végtagját elrántsa, vagy hangot adjon. A vizsgálandó anyagot orálisan a carrageenin befecskendezése után 4 órával adagoljuk, és a fájdalomküszöb kiértékelését először közvetlenül a carrageenin befecskendezése előtt, majd a kezelés után egy órával végezzük. EREDMÉNYEK A vegyületek DA (fájdalomcsillapító dózis) orálisan, mg/kg-ban (N-Fenil)-2-merkapto-ecetsav-amid 2:20 N-(4-Klór-fenil)-2--merkapto-ecetsav-amid 4 S-[2-(4-Klór— fenil-amino)-2-oxo-etil]-etán-tioát 4 (N-Fenil)-3-merkapto-propionsav-amid 4 S-[3-(Fenil-amino)-3-oxo-propil]etán-tioát 4 N-(2-Tiazolil)-2-merkapto-ecetsav-amid 4 S- [ 2- ( 2-Tiazolil)-amino-2-oxo-etil]-etán-tioát 4 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás enkefalináz-gátló, fájdalomcsillapító hatású, hatóanyagként olyan (I) általános képletű vegyületet, amelyet egy NH2- -R2 általános képletű amin és egy H00C-(CH2)n-SH vagy egy HOOC-(CH2)„-S-CO-CH3 általános képletű sav, vagy olyan (IA) általános képletű vegyületet, amelyet egy (II) általános képletű vegyület és acetil-halogenid reagáltatásával állítunk elő gyógyszerkészítmények előállítására - ahol a képletben Rí jelentése hidrogénatom vagy acetilcsoport, n értéke 1 vagy 2, azzal a megkötéssel, hogy lia n értéke 1, akkor R2 jelentése adott esetben a 4-es helyzetben klóratommal vagy a 3-as helyzetben trifluor-metil-csoporttal helyettesített fenilcsoport vagy 2-tiazolil-csoport, ha n értéke 2, akkor. R2 jelentése adott esetben a 4-es helyzetben klóratommal vagy a 3-as helyzetben trifluor-metil-csoporttal helyettesített fenilcsoport, Ra jelentése, ha n értéke 1, akkor 4-klór-fenil- vagy 2-tiazolil-csoport, és ha n értéke 2, akkor fenil- vagy 4-klór-fenil-csoport -, azzal jellemezve, hogy a fenti hatóanyagok közül legalább egynek a hatásos dózisát a gyógyszerkészítésben szokásos hígító-, vivőés/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverve gyógyszerkészítménnyé alakítjuk. 5 10 15 20 25 30 e 35 40 45 50 55 60 65 6
