191858. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil plurilamelláris vesiculumok előállítására
191 858 2 Nyulak szemgödrének és a környező szöveteknek boncolási eredményei M. bovis-sal végzett kötőhártyaszöveti fertőzés és MLV-be kapszu- 5 lázott streptomycinnel, SPLV-be kapszulázott streptomicynnel, vagy SPLV-be kapszulázott streptomycin hígításokkal végzett kezelés után. XIX. táblázat Állat M. bovis izolálása A szemek vaszkularizációja Lacrimalis lerakódás0 Kontroll 1 4-1+ 14-2 4-1+ 14-MLV-be kapszulázott 1 + 1+ 14-Streptomycin 2 0 1+ 0 SPLV-be kapszulázott 1 0 0 0 Streptomycin 2 0 1+ 0 (hígítatlan) 3 0 0 0 SPLV-be kapszulázott 1 + 2+ 24-Streptomycin 2 0 0 0 (1:2 hígítás) 3 0 1 + 0 SPLV-be kapszulázott 1 0 0 0 Streptomycin 2 0 14-0 (1:4 hígítás) 3 4-14-0 SPLV-be kapszulázott 1 4-14-14-streptomycin 2 0 14-0 (1:6 hígítás) 3 + 14-0 Megjegyzések a XIX. táblázathoz aMagyarázat azonos a XIV táblázatban leírtak- 35 kai, poszt infekció a 14. napon. b A vaszkuiarizáció az alábbiak szerinti: 0 = normál erek; 1 = néhány dilatált ér kis erekkel infiltrálva; 2 = diffúzán piros nehezen észlelhető individuális erekkel; 3 = erőteljes piros diffúzió, 40 vascularis hasadás és vér effuzió a kötőhártyába. CA lerakódás az alábbiak szerinti: 0 = nincs lerakódás, 1 = szemhéj és szempilla szennyeződés lerakódás; 2 = szemhéj és szempilla szennyeződés lerakódás a szem körüli területeken. 45 Vírusfertőzések kezelése A limfocita choriomeningitis vírus (LCMV) az Arenavirus csoportba tartozik, emberen megbetegedéseket okoz és egereken az LCMV infekció íntracerebrális fertőzési úton végzetes. Az egerek elpusztulásának oka, hogy az immun sejtek a vírus-fertőzött sejtekkel reagálnak. A vírus azt a sejtet, amelyben szaporodik, nem pusztítja el, ezért az alkalmazott terápiás szemek az egerekben a vírus szaporodást kell gátolni, oly módon, hogy az immun sejtek ne aktiválódjanak és/vagy gátolják az immunsejtek aktiválását. Az alábbiak- 60 ban vírus infekciók SPLV-be kapszulázott antivirális vegyületekkel történt kezelésének hatékonyságát mutatjuk be. Letális limfocita choriomenmgitis vírusfertőzések kezelése egereken 2 hónapos Swiss-egereket intracerebrálisan LCM vírus lethalis dózisával fertőztünk (100 telepképző egység (PFU) 0,5 ml inoculum-ban egerenként). Az egereket négy csoportra osztottuk oly módon, hogy mindegyik csoportba két egér került és mindegyiket az infekció utáni 2., 3. és 4. napon intraperitoneális injekcióval kezeltük (0,1 ml/dózis/egér) az alábbiak szerint: 1. Az »• „SPLV-csoport ”-ot tojás foszfatidilkolin SPLV- be zárt 3 mg Ribavarin/ml szuszpenzióval kezeltük. Az SPLV-t 100 mg lipid és 0,3 ml térfogatú PBS pufferbe vitt 100 mg hatóanyag/ml felhasználásával állítottuk elő. A hatóanyag beépítése 10%-os volt. 2. Az „R-csoport”-ot 3 mg/ml koncentrációjú PBS-ben elkészített Ribavarin-nal kezeltük; 3. Az SPLV-csoportot puffer telített SPLV-vei kezeltük (az SPLV-t a fentiek szerint állítottuk elő, azzal az eltéréssel, hogy nem használtunk Ribavarin-t); 4. A „kontroll csoport ”-ot PBS-sel kezeltük. Az infekció utáni 5. napon mindegyik csoportból két egeret megöltünk, lépüket homogenizáltuk (2 lép/csoport mennyiséget homogenizáltuk PBS-ben 1/20 súly/térfogat puffert alkalmazva). A vérlemezke képző egységeket (PFU) ml-enként mindegyik szuszpenzióban meghatároztuk. A csoportokból visszamaradó öt egeret 30 napon keresztül naponta kétszer az egész csoport elpusztulásáig figyeltük. A kapott eredményeket a XX. táblázat szemlélteti. A XX. táblázat világosan szemlélteti a letalitás csökkenését és a fertőzött állatokból visszanyerhető vírusok számának csökkenését. Nem határoztuk meg azonban, hogy ezek az eredmények az SPLV-ből kioldódott Ribavarin antivirális aktivitásának, vagy a vírusgazda egér immunmodulációjának (az SPLV-ből nyújtottan kioldódó Ribavarin időtartama alatt) tudhatók-e be. XX. táblázat Letális LCM vírusfertőzés kezelése egerekena Csoport Letalitásb L épből visszanyert vírus (PFU x 103/ml)c Kontroll 5/5 7,0 SPLV-csoport 5/5 6,9 R-csoport 5/5 5,2 SPLV-R-csoport 5/5 3,4 aKéthónapos egerek mindegyikét intracerebrálisan letális dózissal fertőztünk (100 PFU LCM vírus 0,05 ml inokulumban). bA letalitást az elhalások száma/csoport létszám értékben fejezzük ki. cAz infekció utáni 5. napon mindegyik csoportból két egeret megöltünk, a lépet eltávolítottuk, homogenizáltuk és 1 g lép/20 ml koncentrációjú homogenizátumot állítottunk elő. 22
