191603. lajstromszámú szabadalom • Diagnosztikai reagens és eljárás hidrofil latexrészecskéket tartalmazó szuszpenziók előállítására
5 191 603 6 hiánya ellenére olyannyira stabil, hogy az epoxiesoportok módosítását kívánt esetben már az emulziós polimerizálás alatt végrehajthatjuk, úgy már a polimerizálás után olyan latexet kapunk, amelynek felülete például primer aminocsoportokkal van módosítva. A módosított vagy átalakított epoxiesoportok majd a biológiai és/vagy immunológiai aktivitású proteinek kapcsolódását szolgálják: a proteinek így kovalens kötéssel kapcsolódhatnak a hordozóként szolgáló latex részecskékhez. A találmány tárgyához a fent részletezett eljárással előállított hidrofil latexrészecskék hordozóként! alkalmazása is tartozik: a latexrészecskék szérológiailag közömbös hordozót alkothatnak biológiailag, különösen immunológiailag aktív anyagok, például peptidek, pioteinek, enzimek, hormonok, vitaminok, antigének, antitestek és mikroorganizmusok számára. A találmány tárgya tehát továbbá olyan diagnosztikai reagens, amely hordozóként a találmány szerint előállított hidrofil latexrészecskékeket és a hordozóhoz közvetlenül vagy lödként működő kapcsoló vegyületen keresztül kovalens kötéssel kapcsolódó biológiailag és/vagy immunológiailag aktiv anyagokat tartalmaz. A találmány szerinti diagnosztikai reagensek különösen a radioimmuno-teszt (RíA), enzimimmunoteszt (HlA) és az az úgynevezett ELlSA-tcszl (enzymelinked immunosorbent assay) elvégzéséhez alkalmasak. 1. példa 80 ml desztillált vízben 0,08 g kálíumperoxodiszulfátot (K2S208) feloldunk, és a levegő eltávolítása céljából 30 percen át nitrogéngázt buborékoltatunk az oldaton keresztül. 10 ml gücidil-metakrilátot ugyanígy oxigénmentesítünk. A két komponenst üvegreaktorba visszük át és további 10 percen át nitrogénnel kezeljük. Utána a reaktort elzárjuk, és a komponenseket állandó keverés közben 65 °C-ou 6 órán át reagáltatjuk. A megadott idő elteltével a konverzió 99 %. A kapott latex monodiszperz eloszlásban gömbalakú, 0,44 pm átmérőjű poliglicidilmetakrilát részecskéket tartalmaz. 2. példa 0,08 g kálium-peroxodiszulfát 160 ml desztillált vízzel készített oldatát, valamint 15 t% glicidil-metakrilátból és 85 t% sztirolból álló elegy 10 nü-jét külön-külön az 1. példában leírt módon oxigénmcnlesítjük, majd állandó keverés közben 6 órán keresztül 65 °C-on reagáltatjuk. A konverzió 71,6 %. A nem reagált monomer maradványait vízgőzdesztillálással kiűzzük. A kapott monodiszperz latexrészecskék 0,22 gm átmérőjűek. 3 3. példa 0,1 g kálium-peroxodiszulfát 100 ml desztillált vízzel készített odatát, valamint 15 t% glicidil-metakrilátból és 85 t% vinil-acetátból álló elegy 10 ml-jét az I. példában leírt módon oxigénmenlcsítjiik és reagáltatjuk. A konverzió 80 %. A monomer maradványait vízgó'zdesztillálással távolítjuk el. A kapott latex monodiszperz eloszlásban 0,16 juin átmérőjű, gömbalakú részecskéket tartalmaz. Az így kapott latex 100 ml-jét 100 ml 0,1 M nátrium-hidroxid-oldattal összekeverjük és az elegyet 25 °eC-on 24 órán át állni hagyjuk. Hidrolízis alatt és után a latex stabilitása nem romlik. Az emulziót centrifugáljuk, a felülúszó részt leöntjük, és az ülepített fázist vízben diszpergáljuk. Ezt még kétszer megismételjük. A kapott, semleges kémhatású emulzió pH-értékct 1 M kénsavval 3-ra állítjuk be, majd az epoxidesoportoknak ekvivalens mennyiségű perjödsavat adunk az emulzióhoz. Az elegyet 25 °C-on 24 órán át állni hagyjuk, utána a reakcióba nem lépett kismolekulájú anyagokat dialízissel eltávolítjuk. A stabil emulzióban levő módosított latexrészecskék 2,8 t%, azaz 0,97 mrnól/g aldehid-csoportokat tartalmaznak. 4. példa 0,1 g kálium-peroxodiszulfát 100 ml desztillált vízzel készített oldatát 15 t% glicidil-metakrilátból és 85 t% izoprenbő! álló elegy 10 ml-jével az 1. példában leírt módon 65 °C-on 24 órán át reagáltatjuk. A konverzió 76 %. A monomerek maradékát vízgőzdesztillálással eltávolítjuk. A kapott latex monodiszperz eloszlásban stabil, gömbalakú, 0,25 jum átmérőjű részecskéket tartalmaz. A kapott emulzió 100 ml-jéhez 25 t%-os vizes ammóniaoldatot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 24 órán át állni hagyjuk, amikoris az epoxidcsoportok ammonolízis révén aminocsoporttá alakulnak. A terméket peijódsawal kezeljük. A kapott latex 4,5 t%, azaz 1,55 mmól/g aldehidcsoportokat tartalmaz. 5. példa 1,5 g kálium-peroxodiszulfát 1,5 liter vízzel készített oldatát és 15 ml glicidil-mctakrilátot az I. példában leírt módon külön-külön oxigémnentesítünk, majd a komponenseket reagáltatjuk. A reakcióedénybe az oxigén kizárása mellett további 120 ml oxigénmentes glicidil-metakrilátot csepegtetünk 6 óra alatt. Az adagolás befejeztével az elegyet még 30 percen át polimerizáljuk. A konverzió 85 %. A latexrészecskék átmérője 1,1 jum. 6. példa 0,5 g kálium-peroxodiszulfát 500 ml vízzel készített oldatát, valamint 40 ml glicidil-akrilátot az. 1. példában leírtak szerint külön-külön oxigén mentesítünk, majd reagáltatunk. A polinrerizálást 65 °€-on 7 órán át folytatjuk. A konverzió 78 %. A képződött latexrészecskék átmérője mintegy 0,68 pm. 5 «0 5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
