191512. lajstromszámú szabadalom • Eljárás orron át beadható ergot-alkaloidot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 191 512 2 és in vivo vizsgálatokban határozható meg. Egy különösen megfelelő in vitro vizsgálatot már előbb leírtunk. Másik vizsgálat R. Guillerm irányelvei [II Farmaco, 1, 1-18 (1972)] szerint végezhető. Csillószőröket és nyálkahártyát tartalmazó birka vagy patkány légcsődarabot feszítünk ki 35 °C-on termosztált lemezen. Az orron át való beadásra szánt gyógyszerkészítményt egy ultrahangos aerosol porlasztóval rápermetezzük a légcsőre 5 percig 1 ml oldat/liter levegő/perc adagolással. A porlasztó fúvókaátmérője 2-4 mikron. A csillószőr csapásfrekvenciáját foto-oszcillográfiás technikával mérjük R. Guillerm és mtsai. [Physiol. 57, 725 (1965)] irányelvei szerint. Ebben a vizsgálatban a találmány szerinti A készítménynek nagyon kis hatása van a csillószőr-működésre. Az előbb említett Chevance-technikával kapott eredmények a következők : Beadástól eltelt idő összetétel 0 5 10 20 30 60 90 perc perc perc perc perc perc perc csillószőr csapásszám/perc 5% glükóz 420 480 nv nv nv 420 nv 1% koffein 340 380 nv 500 nv nv 520 1% koffein + + glükóz 320 240 300 420 420 nv nv „A” összetétel 360 nv 380 300 nv nv nv nv = nem vizsgáltuk. Egy további in vitro vizsgálatban egy juhból származó nyálkás légcsődarabon át való mozgás sebességét tanulmányoztuk S. P. Battista: Screening Methods in Pharmacology (R. A. Turner and P. Hebbom kiadás) Vol. 2. Academic Press, New York, 1971, 167-202. oldalain közölt alapelvei szerint. A légcsövet kifeszített állapotban tartjuk hőfokszabályzó tt kamrában. Egy részecskének a nyálkahártya membránon való mozgásának a sebességét vizsgáltuk a légcső azon területén, ahová körülbelül 0,1-0,2 ml orron át való beadásra szolgáló gyógyszerkészítményt permetezünk. Az „A” összetételű készítménnyel kapott eredmények a következők : Idő (percben) 1. menet 2. menet 0 130 mikroliter „A” összetételű permet egy 1 cm széles zónára, és áthaladás körülbelül 12 perccel a start után, ahonnan a részecske elindul. megtett távolság (mm) sebesség (mm/perc) megtett távolság (mm) sebesség (mm/perc) 5 38 7,6 50 10 7 52 7 70 10 9'> 70 9 90 10 121 2) 83 4,3 110 6,7 153) 110 9 140 10 1. eljutás a bepermetezett területre ; 2. áthaladás a bepermetezett területen; 3. eltávolodás a bepermetezett területtől. Amint látható, csak kis csökkenés van a részecske sebességében, amikor áthalad az „A” összetételű készítménnyel kezelt sávon. A találmány szerinti orron át való beadásra szánt gyógyszerkészítmény nyálkahártya-csillószőr befolyásoló tulajdonságait in vivo vizsgálatokban is megfigyeltük. Klinikai vizsgálatot végeztünk az orrban való vezetés mérésére J. Andersen és mtsai, [Am. Rev. Respir. Dis. 110, 301-305 (1974)] alapelvei szerint. Egy kísérletben 0,4-0,6 mm átmérőjű szacharin szemcsét helyeztünk önkéntes kísérleti alanyok orrnyálkahártya membránjára, a középső kagyló területére a felső nazolakrimális vezetékkel szemben, ahol az orr a legpermeabilisabb. Azt az időt, ami az édes íz észleléséig eltelt, tekintettük a nyálkahártya-csillószőr átvezetési időnek. Körülbelül 0,13 ml orron át való beadásra szánt gyógyszerkészítményt permeteztünk az orrba. A szacharin szemcsét 3 perccel később helyeztük az orrba. A kísérleti alanyokat 5 perccel később 30 másodpercenként megkérdeztük, hogy édes ízt éreznek-e. A 12 személlyel kapott átlageredmények a következők: Átvezetés ideje5’ _________________________________________(perc) Placebo4’ 15,2 ± 4,7 „A” összetételű készítmény 13,9 ±2,6 4. 9%» nátrium-klorid oldat, 5. A bepermetezéstől az édes íz érzéséig eltelt időszak. Az „A” készítmény kissé csökkenti az átvezetési időt, de nem jelentősen. A készítmény általában jól elviselhető volt. Enyhe szúrós érzete volt az orrnyálkahártyán egy személynek 12 közül placebo esetében, és 2 személynek 12 közül az „A” összetételű készítmény esetében. Egy másik előkészítő kísérletben a „referencia” oldatot használtuk. A kapott eredmények a következők : Átvezetés ideje5’ _________________________ (perc)_______ Placebo4’ 15,44 ±3,86 Referencia 22,50 ±10,12 4 és 5 magyarázatát lásd az előbbi táblázatnál. Az átvezetési időben 40-45% nemkívánt növekedést észleltünk. A 10 kísérleti alany közül 4 észlelt irritációt. A 10 kísérleti alany közül 3 észlelt vazomotorikus rendellenességeket (váladékfolyás és eldugulás). Továbbá, még ha az ormyálkahártya a gyógyhatás biztosításához elegendő mennyiségű találmány szerinti orron át való beadásra szolgáló gyógyszerkészítménnyel is van ellátva, az abszorbeált xantin mennyisége kicsi lehet. Például egy klinikai kettős vak kísérletben „A” összetételű orron át való beadásra szánt permetet adtunk tíz egészséges önként jelentkezőnek. A beadás 2,6 mg koffeinnel volt egyenértékű. Az előkísérletben a vérben meghatározott koffein mennyisége a következő volt : 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
