191313. lajstromszámú szabadalom • Eljárás inotrop hatású vegyületek előállítására
1 191 30 két], és melegítőpárnával a testhőmérsékletet 37—38 °C-on tartjuk. Mindkét bolygóideget átvágjuk nyaki bemetszés útján. Az artériás vérnyomást Statham-típusú nyomás-transzduktorral összekötött, heparinoldattal (16 egység per ml) megtöltött polietilén kanül segít- 5 ségével mérjük, melyet a jobb femorális artérián át a hasi aortába vezetünk be. Három-állású elzárócsappal összekötött kenült erősítünk a jobb femorális vénába a szer beadása céljából. A szivet az ötödik jobb bordaközi résen át tárjuk fel és előkalibrált Walton-Brodie izofeszülésmérő hidat varrunk a jobb kamrához. A mérőeszköz tenzióját szisztolénál 50 g-ra állítjuk be és a Beckman dinográf regisztráló erősítését úgy szabályozzuk, hogy 50 g tenzió 10 mm írószer-kitérést okozzon; a szívösszehúzódás mértékét elektronikusan származtatjuk le a vérnyomás im- 15 pulzusból Beckman szív-tachométer segítségével. Izoproterenol-hidrokloridot megsavanyított vízben oldunk (pH 6,0) és befecskendezzük. Az izoproterenol dózisai: 0,025; 0,05; 0,1 és 0,2 meg per kg. Az I képletű vegyület hidrokloridját feloldjuk és steril vízben 20 fecskendezzük be. A dózisokat 5 perces időközönként alkalmazzuk. Izoproterenol standard görbét veszünk fel minden kutyánál és a vegyületre történő reagálásokat az izoproterenol-érzékenységnek megfelelően szabályoz- 2 b zuk. E vizsgálat eredményeit az 1. táblázatban összegezzük. 1. Táblázat Izoproterenol és az I képletű vegyület hatása fenobarbitállal altatott kutyánál* Vegyület Dózis [meg/kg, ív ] Artériás nyomás Szívverés Szívizomkontraktilitás Izopro0,025 90 ± 4 108 ± 2 147 ± 12 terenol 0,050 84 ± 3 116 ± 4 187 ± 14 0,100 78 ± 4 126 ± 5 235 ± 19 0,200 72 ± 2 134 ± 7 270 ± 18 1 képletű 0,125 99 ± 1 101 ± 1 116 ± 5 vegyület 0,375 100 ± 1 103 ± 1 141 ± 12 0,875 102 ± 1 108 ± 2 190 ± 20 1,875 102 ± 1 115 ± 3 239 ± 28 3,875 101 ± 1 123 ± 4 271 ± 30 7,875 100 =fc 3 129 ± 3 281 ± 32 15,875 99 ± 3 133 ± 2 278 ± 30 31,875 104 ± 6 131 ± 3 259 ± 48 63,875 98 ± 1 131 ± 2 262 ± 42 *Az eredményeket a kontroll %-ában adjuk meg (kontroll = 100%). Az értékek 4 kísérlet átlagát jelentik (átlag ± standard eltérés). Öntudaton levő kutyák műszeres vizsgálata 15,4—38,3 kg súlyú hím Mongrel kutyákat nátrium- bCi -pentobarbitállal (30 mg per kg, ív.) elaltatunk és peremes endotrachcális csövön át [18 löket/min, 20 ml/kg/löket] pozitív nyomású szivattyúval ventilálunk. A testhőmérsékletet 37—38 °C-on tartjuk melegítőpárna segítségével. A szivet a bal ötödik bordaközi résen át bb tárjuk fel és a szívcsúcson át ejtett seben keresztül a bal kamrába előkalibrált Königsberg-féle beültethető nyomás-transzduktort helyezünk. A transzduktor bekötő vezetékét a háti részen vezetjük be a bőr alá egy a lapockacsontok előtt 5 cm-re levő ponton. A mellkast zárjuk 60 és légtelenítjük. A kutyák antibiotikumokat kapnak és a próba elkezdése előtt legalább 2 hetes gyógyulási időt hagyunk számukra. A kutyákat a vizsgálat előtt szoktatjuk a vizsgáló laboratóriumhoz. Ketrecbe helyezzük őket és kötélen tartjuk 6b oly módon, hogy a vizsgálat folyamán állni vagy feküdni tudjanak. A Königsberg-nyomástranszduktort Beckman R—611 regisztrálóval kötjük össze. A bal kamra nyomását és a számított kardiális aktivitást a bal kamranyomásjel első deriváltjának mérése útján követjük, amikor a nyomás eléri a 60 mmHg-t (3000 Pa). A szívverést a bal kamrai nyomáshullám által vezérelt Beckman szív-tachométer csatlakozóval regisztráljuk. 20—30 perces ellenőrzési periódus után a kutyák kapszulát kapnak, amely vagy az I képletű vegyület hidrokloridját tartalmazza 0,5 mg/kg mennyiségben, vagy placebót (laktóz) tartalmaz. A méréseket az alkalmazás után 0—12 óra múlva végezzük el. Nem találtunk jellemző különbséget a placebo és az I képletű vegyület között a szívverés és az artériás nyomás tekintetében. A szív összehúzódóképességére gyakorolt hatás összehasonlító adatait a 2. táblázatban összegezzük. 2. Táolázat I képletű vegyület és placebo hatása öntudatnál lévő kutyák szív-kontraktilitásira, műszeres vizsgálatot végezve Kontraktilitásra kifejtett hatás* Adagolás___________________________________________________________ utáni idő j képletű vegyület (HC1) Placebo (0,5 mg per kg, p.o.) (laktóz) 2 0.25 98 :fc 2 97 ± 2 0.50 111 :fc 5* 94 ± 3 0.75 109 ± 6 94 ± 3 1.0 115 ± 9 93 ± I 1.5 118 ± 10* 91 ± 2 2.0 120 ± 11* 89 ± 2 2.5 123 ± 11* 96 ± 1 3.0 118 ± 7* 95 ± 2 4.0 120 ± 5* 95 ± 3 5,0 115 ± 3* 94 ± 4 6,0 122 £ 4* 98 ± 3 7.0 117 £ 6* 96 ± 2 8.0 113 £ 4* 95 ± 3 9,0 116 £ 2* 93 ± I 10,0 112 £ 3* 92 ± 1 11,0 111 £ 2* 98 ± 1 12,0 108 £ 1* 93 ± 2 “zéró-idős kontroll értékek %-a (kontrollok = 100%). Minden érték 4 kísérlet átlaga (átlag ± standard eltérés). *p < 0.05 placebóhoz hasonlítva, kettős, kétoldalú t-próbát alkalmazva. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás 4-[3(R)-([2-hidroxi-3-(3-hidroxi-fenoxi)-propil]-aminoJ-butil]-benz£imid vagy gyógyszerészetileg elfogadható sói előállítására, azzal jellemezve, hogy 4-[3(R)-amino-butil]-benzamidot l-(3-blokkoIt-hidroxi-fenoxi)-2,3-epoxi-propánnal reagáltatunk, majd a képződött blokkolt közbenső termék blokkoló csoportját eltávolítjuk és — kívánt esetiben — a közbenső terméket vagy a végterméket sóvá alakítjuk át. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve. hogy l-(3-blokkoIt-hidroxi-fenoxi)-2,3-epoxi-propánként l-(3-benzil-oxi-fenoxi)-2,3-epoxi-propánt használunk, és a benzil-blokkoló csoportot hidrogénezés útján távolítjuk el. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a közbenső terméket hidrogén-kloriddal kezeljük és így hidrokloridsót állítunk elő. 5
