191310. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás tiolcsoportot tartalmazó peptidek cianobromidos hasítására
5 191310 6 22 °C-on 12 óra alatt tökéletesen lezajlott. A mintát vákuumban bepároljuk, vízzel eredeti koncentrációjának kétszeresére hígítjuk és liofilizáljuk. Hasított génfúziós termékek szulfitolizise Az ,1—3. példák szerint nyert hasított génfúziós 10 termékeket a következő eljárás szerinti szulfitolízisnek vetünk alá: 500 mg éianobromiddai hasított fermentációs anyagot pH 8,5 értéknél 10 ml 0,1 mól etilén-diamiii'7 mól ionmentesített karbamid oldatban oldjuk is 0,1 mól koncentrációig nátrium-szulfátot és 1 mitől koncentrációig ciszteint adunk hozzá. A feloldódást követően a reakció 22 °C-on 8 óra alatt tökéletesen lejátszódik. Az 1—3. példákban leírt termékek szulfHolízisét összehasonlítottuk olyan anyag szulfítolizisével, melyet cianobromiddal azonban nátrium-tioszulfát nélkül hasítottunk. Amint azt a következő táblázat bemutatja, a nátrium-tioszulfát jelenléte a cianobromidos hasításban lényegesen megnöveli a szulfitolízishez rendelkezésre álló termék mennyiségét és a szulfitolízis eredményezte termék arányát a szilárd maradék százalékában. Táblázat A szulfitolízis kiinduló anyaga Na2SS03 a cianobromid a szulfitolízis* Kitermelés, mg/g szilárd anyag a reakció lefutásának adott órájában hasításban ben 2 6 24 Inzulin A-lánc nem nem 1,8 5,0 _ Inzulin A-lánc igen nem 7.1 6,8 — Inzulin A-lánc nem igen 6,5-Inzulin B-lánc nem nem 8,4 9,6 — Inzulin B-lánc igen nem 11,5 12,4 — Inzulin B-lánc nem igen 9,4-Proinzulin nem nem 0.8 3,0 4,1 Proinzulin igen nem 7.8 9,4 9,1 Proinzulin nem igen 5,4 — — SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás tiol-csoporlo(ka)t tartalmazó peptidekben a metionin karboxilcsoportjánál levő peptidkötés cianobromiddal végzett hasítására, azzal jellemezve, hogy a hasítást a pepiidben levő tiolcsoport(ok)hoz képest feleslegben levő tioszulfát ion jelenlétében végezzük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hasítási reakcióelegyben a tioszulfát iont alkálifémsójaként alkalmazzuk. 35 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az alkálifémsóként nátrium-tioszulfátot alkalmazunk. 40 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hasítást 15 °C és 35 C közötti hőmérsékleten végezzük. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hasítást 20 °C és 25 °C közötti hőmérsékleten 45 végezzük. Rajz nélkül Kiadja az Országos Találmányi Hivatni A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Megjelent a Műszaki Könyvkiadó gondozásában COPYLUX Nyomdaipari és Sokszorosító Kisszövetkezet 4
