190910. lajstromszámú szabadalom • Eljárás túlnyomásos egy és sokrétegkromatográfiához szorbensréteg rögzítésére alkalmas ragasztó előállítására
5 190.910 6 A találmány értelmében úgy járunk el, hogy akrilamid 1,6-2,5 t%-os, előnyösen 1,9-2,2 t%-os és N,N'-metilén-bisz(akril-amid) 0,6-1,0 t%-os, előnyösen 0,8-1,0 t%-os vizes oldatához N,N,N’,N'-tetrametil-etilén-diamint (TEMED-et), majd másik katalizátort, célszerűen diammónium-peroxo-diszulfátot adagolunk 21-30 °C hőmérséklet-tartományban, majd a nyert poli(akril-amid)-gélt homogenizátorban homogenizáljuk. így folyékony, opálos oldatot nyerünk. Ebből vízzel elegyedő oldószer, célszerűen aceton adagolásával túrós csapadékot nyerünk, amelyet oldószermentesítés után az eredeti vízmennyiség adagolásával ismét pépesítünk, s ezt a műveletet tetszés szerint többször megismételjük. Az utolsó túrós csapadék vizes pépesítésekor előálló opálos-vizes oldat a ragasztóoldat. A következőkben a találmány szerinti eljárás előnyös kiviteli módjait ismertetjük. A találmány szerinti eljárás igen előnyös kiviteli módja, amikor akril-amid-ra nézve 2,0 t%-os és N,N’-metilén-bisz(akril-amid)-ra nézve 0,8 t%-os vizes oldatból indulunk ki. Katalizátornak alőnyösen N,N,N’,N’-tetrametiletilén-diamint (TEMED) diammónium-peroxo-diszulfáttal (NH4),S2Ok együtt használunk, de katalizátornak más vegyületpárokat is használhatunk, mint például (NH4)2S2Os-o.t és 3-(dimetil-amino)-propionitrilt vagy riboflavint és TEMED-t. A reakcióelegyhez a TEMED-t közvetlenül adagoljuk, míg a diammónium-peroxo-diszulfátot néhány ml vízben oldjuk, és az előzetesen erősen felkevert oldat közepére csurgatjuk. A keveredés magától leáll. A diammónium-peroxo-diszulfátot szilárd formában is adagolhatjuk a felkevert oldathoz. A keveredés itt is magától leáll. Az opálosodás 4-5 perc után megindul, s 30 perc után általában befejeződik. A gélesedés hőmérsékletét úgy célszerű megválasztani, hogy az 22-23 °C-nál kezdődjék és maximum 28-30 °C-ig emelkedhessen. A megszilárdult gélt alkalmas pépesítő berendezésben, például Waring-blendorban 5 sec-ig pépesítjük, s utána a folyékony opálos oldat alkalmas az oldószeres frakcionálásra. Az opálos, pépesített géloldatból vízzel elegyedő oldószerekkel, mint az aceton, metanol, etanol stb. csaphatjuk ki a számunkra értékes nagy molekulákat, a kis molekulák pedig az oldatban maradnak. A legcélszerűbb oldószer, az aceton esetében az opálos oldat - aceton legkedvezőbb aránya: 1:1 (térfogatarány). Az acetonnal kicsapott túrós csapadékot célszerűen 30 sec-ig pépesítjük vízzel minden esetben. Az aceton adagolására hő képződik, ezért az oldatot hűtéssel dekantáljuk. A ragasztó minősége annál jobb, minél többször csapjuk ki, de célszerű 3 kicsapást végezni. Az opálos ragasztóoldat poli(akril-amid)-tartalma 1,6-2,2 t% között változik. Ennek ismeretében számoljuk ki a szorbensre jutó százalékos ragasztó mennyiségét, amelyet célszerűen 0,5-5,0 t% között állapítunk meg szorbenstől, rétegvastagságtól függően. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük 4 1. példa A) Poli(akril-amid) ragasztó előállítása 20 g akril-amidot és 8 g N,N'-metilén-bisz(akrilamid)-ot 1000 ml desztillált vízben oldunk. Hozzáadunk 3 ml TEMED-t, s a 22,5 °C hőmérsékletre beállított vizes oldatot egy irányban alaposan felkeverjük, majd 3 ml vízben oldott 0,8 g (NH4)2S,Os-ot csurgatunk a felkevert oldat közepére. 4 perc után opálosodás indul meg, miközben a hőmérséklet 29 °C-ra emelkedik, majd 30 perc után a gélesedés befejeződik. A gélt Waring-blendorban 5 sec-ig pépesítjük, s az 1000 ml opálos oldathoz 1000 ml acetont adagolunk. Hűtéssel dekantáljuk az oldatot, s az összegyűjtött túrós csapadékot az edény falára csapódott csapadékkal együtt 1000 ml desztillált víz részleteivel összegyűjtjük és pépesítjük 30 sec-ig. Az így nyert opálos oldathoz újabb 1000 ml acetont adagolunk, s az előbbi műveleteket megismételjük, azaz még egy acetonos kicsapást végzünk. (A dekantáláskor nyert oldatokat mindig elöntjük.) A kicsapást etil-alkohollal vagy izopropil-alkohollal végezve, az acetonos kicsapáshoz hasonló eredményt kapunk. Az utolsó lépésben kapott 1000 ml opálos oldat poli(akril-amid)-tartalma 0,021 g/ml, sűrűsége 1,004 g/ml, relatív viszkozitása 4,65. B) A szorbensrétegek készítése Az A) pont szerint előállított ragasztó felhasználásával a következő réteget kentük: 44 g 6 ,«m átlagos szemcseméretű és 9-10° m belső átmérőjű szilikagélhez 87,5 ml vízzel hígított 57 ml ragasztót adunk (2,7 t% szilikagélre számítva). Az így nyert pépet óvatosan elkevertük, majd 60 sec-ig Waring-blendorban pépesítettük. A nyert tejfölös pépet 0,1 mm vastag alumínium-fóliára folyamatos kenéssel, 0,2 mm vastagságban vittük fel, így szárítás után 0,16 mm vastag réteget kaptunk. Szélezés után 7 db 20x20 ernes réteglapot nyertünk. C) Túlnyomásos egyréteg-kromatográfiás kifejlesztés A B) pont szerint készült réteglapokból egynél három oldalon 5 mm szélességben a szorbenst lekapartuk, s műanyag-diszperzió [poli(vinil-acetát)- és poli(akril-amid)-tartalmú] segítségével víz- és oldószerálló műanyag filmet alakítottunk ki. Az impregnált széltől 3,0 cm, egymástól 9-9 mm távolságra 15 azonos mennyiségű indofenol, vajsárga és metilvörös keverékéből álló színanyag tesztet vittünk fel. A mintafelviteli helyek megszáradása után a lapot teflonból készült, oldószerirányító csatornás betétlappal ellátott CHROMPRES fo túlnyomásos ultramikro kamrába helyeztük. A párnanyomás 1,2 MPa, az oldószer metilén-klorid, az oldószer áramlási sebessége 185 ml/h, kifejlesztési idő 4,6 perc volt. A kapott kromatogramot spektrofotométerrel értékelve, színanyagonként ±1,5% eltérést észleltünk. 1 D) Túlnyomásos sokréteg- (négyréteg)-kromatográfiás kifejlesztés A B) pont szerint előállított réteglapokból 4 réteglapot szélén 5-5 mm szélességben műanyagdiszperzió segítségével víz- és oldószerálló műanyagfilmmel impregnáltuk, 10 percig 100 °C-on való melegítéssel. A 4 impregnált szélű réteglapból a felső 3-at a páratlan lezárt szélhez 15 mm-re, 185 mm szélességben, 2 mm keresztmetszetű réssel perforáltuk. A 3 darab 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
