190897. lajstromszámú szabadalom • Eljárás állatoknál növekedés vagy táplálékhasznosítás fokozására növekedési hormon fehérjeszint növelésével
5 190.897 6 alkalmazható mindkét típusú eljárás. Egyes esetekben, a növelt hatás és a fiziológiailag aktív fehérjék sejten belüli felhalmozása érdekében az anaerob fermentációs eljárást alkalmazzuk. A fermentációs folyamat befejeztével az összegyűjtött mikrobás sejtek - amelyeket egyedi sejt-fehérje forrásként alkalmazhatunk - növekedési hormon fejérjét tartalmaznak. E fehérjékből eljárásokkal tabletta-, paszta-, por-formájú vagy egyéb, állatok etetésére szolgáló készítményeket állíthatunk elő a találmány szerinti eljárásnál történő alkalmazáshoz. Előnyös, ha a növekedési hormon fehérjéket tartalmazó egyedi sejteket az adagolás vagy további feldolgozás előtt a mikrobás sejtek életképtelenné tétele érdekében kezeljük. Alkalmas kezelés, ha a sejteket 70 °C-on 10 percig vagy 85 °C-on 4 percig tartjuk, de alkalmazható eljárás, ha a mikrobás sejteket etilén-oxiddal kezeljük. A találmány szerinti eljárásnál eljárhatunk úgy is, hogy a növekedési hormon fehérjéket tartalmazó egyedi sejteket az állatok szokásosan alkalmazott tápanyagaihoz (például szójabab-liszt, lucerna-lliszt, gabona-liszt, gyapotmagolaj-liszt, ienmagolaj-liszt, nád-melasz, karbamid, kukoricacsutka-liszt stb.) keverve alkalmazzuk. A találmány szerinti eljárásnál alkalmazható készítmények előnyösen 0,1-50%-ban tartalmazzák a növekedési hormon fehérjéket tartalmazó egyedi sejteket, a többi állati táplálék. A mennyiségek ilyen széles tartománya azért előnyös, mert így a készítmények formázásában a tápanyag követelményeitől, valamint a kívánt fiziológiás hatástól függően nagyobb rugalmasság engedhető meg. A találmány szerinti eljárásnál a növekedési hormon fehérjét tartalmazó egyedi sejtfehérjét adagolhatjuk az állatoknak közvetlenül is, de kombinálhatjuk bármilyen állati táplálékkal is. Alkalmas állatok közé bármely olyan állat tartozik, amely egyedi sejtfehérjéből formázott fehérjetartalmú táplálékkal táplálható. Ilyenek például: tej- és hús-marhák, lovak, kecskék, ökrök, nyulak, juhok, sertések, csirkék, pulykák, libák, halak, rákok, homárok, kutyák, macskák és más hasonlók. Bár megállapítottuk, hogy a fehérjék nagy része a táplálék felvételekor elbomolhat, a bélrendszerben jelentős mennyiségű intakt fehérje megtalálható. A bélfalakon keresztül felszívódó fehérje mennyisége a fehérje természetétől és az állat fejlettségétől függ. így a találmány szerinti eljárással elegendő mennyiségű növekedési hormon fehérje biztosítható a kívánt fiziológiai hatás eléréséhez. A találmány szerinti eljárásnál a növekedési hormon fehérjét tartalmazó egyedi sejtfehérje anyagot az emésztési folyamat lassítása érdekében erre a célra alkalmas anyagokkal kezelhetjük. Ilyen kezeléssel csökkenthetjük a fehérjék érzékenységét a fehérjebontó hatással szemben. Ez azért is kívánatos, mivel ily módon elkerülhetjük, hogy a fehérje nagy része a gyomorban emésztődjön és elbomoljon, csökkentve ezáltal a bélfalon keresztül felszívódó fehérje mennyiségét. Erre a célra alkalmas anyagok: dimetil-karbamid, tripszin-inhibitorok, emészthetetlen poliszacharidok, így például gumi-agar, agaragar, Na-alginát stb. 4 Ki kell hangsúlyoznunk, hogy a találmány szerinti eljárással adagolt fehérje-készítmények a nyálkahártyán - például az orrjáraton - keresztül is felszívódhatnak. így a normális táplálkozási folyamatnál a fehérjeszerű anyagok egy részét az állatok belélegzik, ily módon is kiegészítve a növekedési hormon fehérjék felvételét. A következő számított példán keresztül bemutatjuk a növekedési hormon fehérjeszint növeléséhez szükséges egyedi sejt és fiziológiailag aktív fehérje arányát egy kiválasztott állat, fejlett sertés esetén. Számított példa Egy átlagos, fejlett sertés súlya 90 kg, napi táplálék mennyisége 8,1 kg, amelynek kb. 18% fehérjét kell tartalmaznia. Ez a mennyiség részben vagy egészben lehet egyedi sejt-fehérje anyag. Ily módon a teljes fehérje mennyiséget gombából származó egyedi sejtfehérje esetén (ez kb. 60% teljes fehérjét tartalmaz) 2,7 kg táplálékmennyiséggel, míg baktériumból származó egyedi sejtfehérje (SCP) anyag esetén (ez 75% teljes fehérjét tartalmaz) 2,3 kg táplálékmennyiséggel fedezhetjük. A genetikai úton átalakított egyedi sejtfehérje növekedési hormon tartalma 5-10% a teljes fehérjetartalomra számítva. Ily módon, ha a teljes fehérjemennyiséget egyedi sejtfehérje anyaggal biztosítjuk, a táplálék 1,8% növekedési hormont tartalmazhat, így a táplálékkal 146 g növekedési hormont adagolunk az állatnak. Attól függően, hogy a fehérje milyen mértékben emésztődik és szívódik fel, szükséges lehet a teljes fehérjeszükséglet egy részét más fehérjeforrásból, például szójababbal biztosítani. A táplálék útján adagolt 146 g növekedési hormon 1,6 g/kg. Feltételezve, hogy az emésztési folyamat során 99%-os fehérjelebomlás következik be, a fentmaradó 1% pedig a bélfalon keresztül felszívódik, ez a mennyiség esetünkben még mindig 0,16 mg/kg testsúly intakt növekedési hormon véráramba kerülését jelenti. Ismeretes, hogy sertéseknél injekcióval történő adagolással 0,03 mg/testsúlykilogramm mennyiségű növekedési hormon elegendő hatást eredményez. A fentiek alapján látható, hogy a találmány szerinti eljárással, a genetikusán módosított egyedi sejtfehérje anyagok táplálékba keverése útján jelentős mennyiségű növekedési hormon adagolható rutinszerűen az állatoknak. Megállapítható, hogy a bélfalon keresztül való felszívódás jellegzetesebb fejletlen állatoknál, így ezeknél a táplálékkészítést kisebb mennyiségű genetikailag átalakított SCP anyaggal végezhetjük, vagy olyan egyedi sejtfehérje anyagot alkalmazhatunk, amelyek növekedési hormontartalma kisebb. A találmány oltalmi körén belül sok a variációs és módosítási lehetőség. Orálisan adagolt GHRH hatása csirkék növekedési hormon (GH) szintjére. 1984. június 22-én kikelt brojler csirkéket elektromos fűtésű keltetőben 24 órán át világosban tartottuk, majd nyolcasával ketrecekben helyeztük el és etetésükről és itatásukról folyamatosan gondoskodtunk. A csirkéket kísérleteinkhez a kikelés utáni 17. illetve 18. napon alkalmaztuk. A kezeléshez GHRH 1-29 amid-oldatot készítet-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
