190439. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként 2-(trifluor-metil)-4,6-dinitro-fenolt vagy sóit vagy észtereit tartalmazó herbicid,akaricid és növényi növekedést szabályozó kompozíciók és eljárás a hatóanyagok előállítására
1 190 439 2 9. példa A Hill-reakciógátlás meghatározása A mon és munkatársai módszerével (Arnon D. I., Allen M. B., Whatley F. R.: Biochem. Biophys. Acta 20, 449, 1956.) spenót kloroplasztiszokat izoláltunk. 1 gramm, erektől megtisztított levélhez 6 ml 0,35 mólos NaCl oldatot és 0,6 ml 0,2 mólos trisz(hidroxi-metil)-amino-metán (TRIS)-puffert adtunk, megőröltük, a homogenizátumot több rétegű gézen szűrtük, majd 2000-es fordulattal 5 percig centrifugáltuk. A kloroplasztisz csapadékot 0,035 mólos NaCl oldatban szuszpendáltuk, Potter-csőben homogenizáltuk, és az így nyert kloroplasztisz-szuszpenziót felhasználásig 0 °C-on tartottuk. 1 ml kloroplasztisz-szuszpenzióból, 1 ml 0,2 mól/dm3 koncentrációjú kálium-ferri-cianid, 0,5 ml 5 mikromól/dm3 koncentrációjú dikáliumhidrogén-foszfát és 0,3 ml 30 mikromól/dm3 koncentrációjú magnézium-klorid oldatból reagenst készítettünk. Vizsgálatainkhoz hatóanyagként a I-X. jelű vegyületeket, standardként pedig N-(3,4- diklór-fenil)-N',N'-dimetil-karbamidot (DCMU) és dinitro-orto-krezolt (DNOC) használtunk. A hatóanyagból és a standardokból vizes törzsoldatokat készítettünk és azokból különböző menynyiségeket adagoltunk a fentiek szerint elkészített reagensoldathoz úgy, hogy a keletkező reakcióelegyekben a hatóanyag és standard-koncentráció értéke átfogja a 10~lo-10“3 mól/dm3 koncentrációtartományt. A kapott reakcióelegyeket 20 percig 5000 lux fényerősségű megvilágításnak tettük ki, majd a reakciót 25 t%-os triklór-ecetsav (TCA)oldattal leállítottuk. A csapadékot centrifugálással eltávolítottuk, és az oldat extinkcióját 420 nm-en, Spektromom 204 típusú fotométerrel mértük. A méréssorozatot sötétben tartott reakcióelegyekkel is elvégeztük. A Hill-reakciógátlást a világos és sötét reakcióknál mért extinkciókülönbségek alapján nyertük, mikrogramm/cm3 kálium-ferri-cianid koncentrációra átszámolva, kalibrációs görbe alapján. A gátlás %-os értékeit a koncentráció függvényében ábrázoltuk és erről olvastuk le az 50%-os gátláshoz tartozó koncentrációkat (IJ0). Az eredményeket a 2. táblázatban tüntettük fel. 2. táblázat A hatóanyag jele I50 (mikromól/dm3) I. 0,21 II. 0,20 III. 0,31 IV. 0,25 V. 0,52 VI. 0,48 VII. 0,57 VIII. 0,49 IX. 0,60 X. 0,65 DNOC—Na (standard) 0,86 DCMU (standard) 0,071 2o Megállapítható tehát, hogy a 2-(trifluor-meti!)-4,6-dinitro-fenol és sói - a N-(3,4-diklór-fenil)N',N'-dimetil-karbamidhoz hasonlóan - a 2. fotokémiai rendszer inhibitorai és hatékonyságuk a N(3,4-diklór-fenil)-N',N-dimetil-karbamidé és a di- 25 nitro-orto-krezolé között helyezkedik el. A 2-(trifluor-metil)-4,6-dinitro-fenol-származékok közül az aminokkal képzett sók kisebb hatékonyságúak, mint az alkáli- és ammóniumsók. J 10. példa Herbicid hatásvizsgálat szabadföldön, kukoricában A vizsgálatot az 5. példa szerint formált 20 t% nátrium-[-2-(trifluor-metil)4,6-dinitro-fenolát]-ot tartalmazó vízoldható koncéntrátummal és a 3. példa szerint formált 60 t% 2-(trifluor-meti!)-4,6- dinitro-fenolt tartalmazó emulgeálható koncentrátummal végeztük, 1,8 t % szervesanyag-tartalmú barna erdőtalajon. Kísérleteinkhez Pioneer 3950 fajtájú kukoricát használtunk. Április 25-én és 26- án hektáronként 73 000 kukoricaszemet vetettünk. A magokat 8-10 cm mélységig juttattuk a talajba. Május 30-án permeteztük Tee-Jet 11 002 típusú szórófejjel ellátott parcella-permetezőgéppel. 45 A permetezést 1,5 bar nyomáson végeztük, hektáronként 300 liter víz felhasználásával. Hektáron-3. táblázat EWRC ÉRTÉKSKÁLA Értékskála Gyomokra gyakorolt hatás herbicid hatás Pusztulás, % Hatás a kultúrnövényekre károsodás pusztulás, % 1. kitűnő 100 semmi 0 2. kitűnő 99 igen enyhe 1 3. jó 98 enyhe 2 4. megnyugtató 95 enyhe mérsékelt 5 5. elégséges 90 mérsékelt 10 6. nem kielégítő 75 közepes 25 7. rossz 50 erős 50 8. nagyon rossz 25 igen erős 75 9. használhatatlan 0 teljes pusztulás 100 6
