190430. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 17-hidroxi-7alfa-merkapto-3-oxo-17alfa-pregn-4-én-21-karbonsav-gammal lakton béta ciklodextrinnel alkotott zárványkomplexének előállítására
1 190 340 2 romíi- és sertéstenyésztésben használatos tipikus alaptakarmányokat ismertet a 4 115 552. számú amerikai szabadalmi leírás. A jelen találmány szerinti eljárás egy fontos kivitelezési változata szerint az A-4696 jelzésű antibiotikum pszeudo-aglikon-származékát, vagy ennek valamely alkalmas savaddiciós sóját a jobb takarmányhasznosítás és gyorsabb növekedés érdekében az állatoknak orálisan adagoljuk, mégpedig az össztakarmány minden tonnányi mennyiségébe körülbelül 2 g és körülbelül 200 g közötti mennyiséget keverünk. A jelen találmány szerinti aktív antibiotikumot előnyösen úgy adjuk hozzá az állatok takarmányához, hogy valamely alkalmas premixet készítünk (mint amilyet például a 4 115 552. számú amerikai szabadalmi leírás ismertet), amely a premix minden fontnyi mennyiségében körülbelül 1 g és körülbelül 100 g közötti mennyiségű A-4696 jelzésű pszeudo-aglikon-származékot tartalmaz. Az így elkészített premixet keverjük ezután a takarmányhoz. Egy másik módszer szerint a hatóanyagot valamely sűrítményhez vagy takarmányadalékhoz adva is bekeverhetjük az állatok takarmányába. Az A-4696 jelzésű antibiotikum pszeudo-aglikon-származékának többféle előnyös'hatása van, de különösen erős az antibiotikus hatása. Az ilyen jellegű anyagokra mindig nagy szükség van, nemcsak a fogromlás és íny-megbetegedések kezelésére, hanem általában más, mikroorganizmusok által kiváltott betegségek kezelésére is. ÀZ A^4696 jelzésű antibiotikum új pszeudo-aglikon-származékát legkényelmesebben úgy állíthatjuk elő, hogy az A-4696 jelzésű antibiotikumkomplexet enyhe savas hidrolízisnek vetjük alá. Az A-^1696 jelzésű antibiotikum-komplexet úgy állíthatjuk elő, hogy egy Actinoplanes fajhoz tartozó mikroorganizmust valamely alkalmas közegben, levegőztetett körülmények között mindaddig tenyésztünk, míg az antibiotikum a táptalajban a kívánt mértékben fel nem szaporodik. Az így termelt antibiotikumot különféle, önmagában ismert és alkalmazott módszerekkel különíthetjük el és tisztíthatjuk meg. Az A-4696 jelzésű antibiotikum pszeudo-aglikon-származéka előállítására kiindulási anyagként használt A-4696 jelzésű antibiotikum-kómplex termelésére használt mikroorganizmus az Actinoplanaceae családhoz tartozó Actinoplanes missouriensis egy törzse. Az Actinoplanaceae család az Actinomycetales rendhez tartozik, e rendet először John N. Couch írta le, Jour. Elisha Mitchell Sei. Soc., 65, 315-318 (1949) és 66, 87-92 (1950), Trans. New York Acad. Sei., 16, 315-318 (1954), Jour. Elisha Mitchell Sei. Soc., 71, 148-155 és 269 (1955), Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, 7. kiadás, 825-829 (1957) és Jour. Elisha Mitchell Sei. Soc., 79, 53-70 (1963). A kiindulási A-4696 jelzésű antibiotikumot termelő Actinoplanes missouriensis törzset letétbe helyeztük a Rockville-i (Maryland) törzsgyűjteményben, ahonnan bárki számára hozzáférhető, az ATCC 31 683 szám alatt. Az ATCC 31 683 jelű Actinoplanes missouriensis fizikai és tenyésztési tulajdonságait az alábbiakban adjuk meg. Ez a törzs a 4 115 552. számú amerikai szabadalmi leírásban ismertetett ATCC 23 342 jelzésű törzsből mutációk sorozatával állítható elő. A jelen törzs micéliuma hasonló az eredeti töTzséhez, és alaktanilag lényegében megkülönböztethetetlen attól. Nincs másodlagos, légmicéliuma, sem pedig sporangiuma (spóratartója), és nem képez sporangiumot még különleges módszerekkel, például virágporon való tenyésztés során sem. Az ATCC 31 683 jelű törzs taxonómiai (rendszertani) meghatározására használt módszerek a szakemberek előtt ismeretesek, és nagyrészük a Shirling és Gottlieb által leírt [Intem. J. of Systematic Bacteriol. 16(3), 313-340 (1966)], az International Streptomyces Project-ben (ISP) ajánlott módszer. Az enzimek meghatározását Blazevic és Ederer módszerével [Principles of Biochemical Tests in Diagnostic Microbiology, John Wiley and Sons, Inc., New York, 1975] végeztük, a színek elnevezése, a rövidítések és számjelzések megfelelnek Kelly és Judd (The ISCC-NBS Centroid Color C harts Standard Sample No. 2106, U. S. Dept, of C ommerce, National Bureau of Standards, Washington D. C., 1976) ISCC-NBS módszerének. A lizozim-rezisztenciát, valamint a kazein, eszkulin (6,7-dihidroxi-kumarin-6-0-glükozid), hipoxantin, tirozin és xantin bontását Berg [Appl. Microbiol. 25, 665-681 (1973)] módszerével határoztuk meg. A szénforrás-hasznosítási vizsgálatok során az alábbi pontrendszert alkalmaztuk: t- + = egyenlő vagy nagyobb, mint a glükózzal végzett kontroll; pozitív hasznosítás; + = kisebb mint a glükóz, de nagyobb, mint a szénforrás nélküli kontroll; pozitív hasznosítás ; ( + ) = kétséges növekedés; kétséges hasznosítás;- = nincs növekedés; negatív hasznosítás. A fentieknek megfelelően, az alábbi táblázatban megadjuk a jelen találmány szerinti Actinoplanes törzs taxonómiai leírását, beleértve a tenyésztési és élettani tulajdonságait is. Az ATCC 31 683 jelzésű Actinoplanes törzs általános tenyésztési és élettani tulajdonságai A megfigyelt tulajdonság Jellemzők Tenyésztési tulajdonságok az alább megadott táptalajokon: ISP 2. jó növekedés, hátoldal 90. gy. Y; iégmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 3. jó növekedés, hátoldal 93. y Gray; Iégmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 4. jó növekedés, hátoldal •79.1. gy. yBr; Iégmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 5. mérsékelt növekedés, hátoldal 90. gy. Y.; Iégmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 7. mérsékelt növekedés, hátoldal 80. gy.yBr; Iégmicélium 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
