190360. lajstromszámú szabadalom • Eljárás makrolid antibiotikumok előállítására
1 .190 360 2 célium-lepényt vízzel mossuk ; a szűrlet és a mosóoldat (30 liter) pH-ját 10%-os nátriumhidroxid oldattal 9,1-re állítjuk be. A kapott oldatot kétszer extraháljuk (15 liter és 5,5 liter) etilacetáttal. Az etilacetátos kivonatokat egyesítjük és 9 liter, majd 3 liter híg foszforsav oldattal extraháljuk (a vizes fázist pH 4,1-re állítjuk be 28%-os H3P04 hozzáadásával). Az egyesített vizes kivonatok (8,8 liter) pH-ját nátriumhidroxiddal pH 9,2-re állítjuk be és kétszer extraháljuk 2-2 liter kloroformmal. A kloroformos kivonatokat szárítjuk; így 32 g szilárd anyagot kapunk. Ebből az anyagból 5 g-t etilacetátban oldunk és egy hatfázisú ellenáramú megosztási eljárás alkalmazásával etilacetáttal és 0,5 M foszfátpufferrel kezeljük pH 6,1-n; így 2,5 g DH-DÖ-OMT-t kapunk. Egy második hatfázisú eljárás - pH 5,5-n - további 0,1 g DH-DO-OMT-t eredményez. A DHDO-OMT-t száraz acetonból kristályosítjuk. Ez az eljárás egyúttal 1,42 g szennyezett DH-DO-DMT-t is eredményez. A DH-DO-DMT tisztítására olyan ellenáramú rendszert alkalmazunk, amely egy 1:2 arányú etilacetát-heptán összetételű szerves fázisból és egy pH 6,2 értékű 0,5 M foszfát pufferből mint vizes fázisból áll. A hat fázis a DH-DO-DMT részleges elkülönítését eredményezi. A DH-DO-DMT-t vizes metanolból kristályosítjuk. 1 g nyers anyagból 400 mg tisztított DH-DO-DMT-X kapunk. 3. példa VA DH-DO-OMT előállítása DH-DO-DMT-ből A 2. példa szerint előállított DH-DO-DMT-t 35 híg sósav-oldatban oldjuk (a vizes qldathoz pH 1,8-ig HCI-t adunk). A kapott oldatot 24 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd pH-ját nátriumhidroxid hozzáadásával 9,0-ra állítjuk be. A lúgos oldatot etilacetáttal, diklórmetánnal vagy 4q kloroformmal extraháljuk. A kivonatot szárítjuk és vákuumban bepároljuk; így DH-DO-OMT-t kapunk. 4. példa Egy másik eljárás a DH-DO-DMT előállítására A DH-DO-OMT-t úgy állítjuk elő, hogy a DH-DO-DMT-t a fermentlében, amelyben keletkezett, a 3. példában leírt módon gyenge savval kezeljük. A DH-DO-OMT elkülönítését a 2. példában leírthoz hasonló módon végezzük. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás (I) általános képletű makrolidok előállítására - e képletben Q jelentése hidrogénatom vagy (A) képletű csoport -, azzal jellemezve, hogy (a) a Streptomyces fradiae ATCC 31 733 törzset, vagy ennek egy mutánsát vagy variánsát süllyesztett, aerob fermentációs körülmények között asszimilálható szén- és nitrogénforrásokat és szervetlen sókat tartalmazó táptalajban tenyésztjük, amíg lényeges mennyiségű antibiotikum képződik, vagy (b) egy (I) általános képletű makrolidról - ahol Q jelentése (A) képletű csoport - ezt a mikarozilcsoportot enyhe hidrolízissel lehasítjuk. 2 Eljárás állatgyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy aktív komponensként az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletü makrolidot - e képletben Q jelentése az 1. igénypont szerinti - egy vagy több nem-toxikus vivöanyaggal keverjük össze. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy aktív komponensként 20-dihidro-20-dezoxi-23-demicinozil-tilozint alkalmazunk. 4. \ 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy aktív komponensként 20-dihidro-20-dezoxi-5-0-mikaminozil-tilonolidot alkalmazunk. 5 10 15 20 25 30 3 oldal rajz Kiadja az Országos Találmányi Hivatal A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Szedte a Nyomdaipari Fényszedő Üzem (878124/09) 88-0980 — Dabasí Nyomda, Budapest — Dabas Felelős vezető: Bálint Csaba igazgató 7
