190360. lajstromszámú szabadalom • Eljárás makrolid antibiotikumok előállítására
1 .190 360 2 mény részévé vált és onnan ATCC 31 733 számon a köz számára hozzáférhető. Mint ez más mikroorganizmusok esetében is fennáll, a Str. fradiae ATCC 31 733 jelű törzs jellemzői változásokon mennek keresztül. Az ATCC 31 733 törzs mesterséges variációi és mutánsai előállíthatok különböző ismert fizikai és kémiai mutagénnel, pl. UV besugárzással, X-sugarakkal, gamma-sugarakkal és N-metil-N’-nitro-N-nitrozoguanidinnel végzett kezeléssel. A találmány szerinti eljárás keretében a Str. fradiae ATCC 31 733-nak minden olyan természetes és mesterséges változata és mutánsa felhasználható, amely megtartja a DH-DO-DMT és/vagy a DH-DO-OMT termelését eredményező tulajdonságot. A DH-DO-DMT és a DH-DO-OMT gátolja patogén baktériumok, különösen Gram-pozitív baktériumok és Mycoplasma-félék növekedését. A 3. táblázatban foglaljuk össze a standard agarhígításos módszerrel mért minimális gátló koncentrációkat (MIC), amelyek mellett a DH-DO-DMT és a DH-DO-OMT (szabad bázisként) gátol egyes baktériumokat 3. táblázat A DH-DO-DMT és a DH-DO-OMT in vitro aktivitása Organizmus MIC (pg/ml) DH-DO-DMT DH-DO-OMT Staph, aureus NRRL B313 128 4 Staph, aureus V41 128 4 Staph, aureus X400 128 f.+ 8 Staph aureus S13E 64 4 Staph, epidermidis EPI 1 128 8 Staph, epidermidis EPI2 64 8 Streptoc. pyogenes C203 128 f. 8 Streptoc. pneumoniae Park 1 128 f. 8 Streptoc. faecium ATCC 9790 128 f. 16 Streptoc. sp. D csop. 9960 128 f. 16 Haemophilus influenzae C.L. 128 f. 16 Shigella sonnei N9 128 f. 128 f. Escherichia coli N10 128. f 128 f. Esherichia coli EC 14 128 f. 128 f. Escherichia coli TEM 128 f. 64 Klebsiella pneumoniae X26 128 f. 4 Klebsiella pneumoniae KAE 128 f. 128 f. + f.: a megadott értéknél nagyobb A DH-DO-OMT ugyancsak gátolja egyes anaerob baktériumok növekedését. A 4. táblázatban foglaljuk össze azokat az MIC értékeket, amelyek mellett a DH-DO-OMT gátolja ezeket a baktériumokat. Az MIC értékeket standard agar-hígításos módszerrel határoztuk meg és a végpontot 24 óra elteltével olvastuk le. 4. táblázat 5 A DH-DO-OMT in vitro aktivitása anaerob baktériumokkal szemben Mikroorganizitius MIC (Pg/ml) Clostridium difficile 2994 2 Clostridium perfringens 81 2 Clostridium septicum 1128 2 Eubacterium aerofaciens 1235 2 Peptoc. saccharolyticus 1302 8 fC Peptoc. prevoti 1281 8 f. Peptostreptoc. anaerobicus 1428 8 f. Peptostreptoc. intermedius 1264 8 f. Propionibacterium acnes 79 2 Bacteroides fragilis 111 8 f. Bacteroides fragilis 1877 8 f. Bacteroides fragilis 1936B 8 f. Bacteroides thetaitaomicron 1438 8 f. Bacteroides melaninogenicus 1856/28 8 f. Bacteroides melaninogenicus 2736 8 f. Bacteroides vulgaris 1211 8 f. Bacteroides corrodens 1874 8 f. Fusobacterium symbiosum 1470 8 f. Fusobacterium necrophorum 6054A 8 + A megadott értéknél nagyobb A DH-DO-OMT ugyancsak gátolja a Chlamydia trachomatis növekedését sejttenyészetben; 35 MIC 0.5 |ig/ml. A DH-DO-OMT ezenkívül gátolja a Mycoplasma speciest. M. gallisepticum és M. synoviae esetében pl. egyaránt 12,5 pg/ml a DH-DO-OMT MIC értéke. A DH-DO-OMT in vivo antibakteriális aktivi-40 tást mutat kísérleti baktériumos fertőzések esetében. A kísérleti vegyületböl két dózist vittünk be egereknek, kísérleti fertőzés esetében és a megfigyelt aktivitást ED50 értékként mértük (ez a kísérleti állatok 50%-ának megvédését biztosító dózis, mg/kg-ban; W. Wick et al., J. Bacteriol. 81., ö 233-235, 1961). A DH-DO-OMT (szabad bázis) esetében megfigyelt ED50 értékeket az 5. táblázat ban mutatjuk be. 5.-táblázat 50 A DH-DO-OMT in vivo aktivitása egerek kísérleti fertőzésével szemben 55 60 65 Organizmus Beviteli mód Bakteriális hatás, LDjo EDS0, mg/kg x 2 Staph, aureus 3055 orális 100 44 Staph, aureus 3055 s. c. 221 37,3 Streptoc. pyogenes C203 Streptoc. orális 64 75,3 pneumoniae Park I. orális 20,4 223,6 5
