190340. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aktaplanin pszeudo-aglikonh-származékának előállítására
1 190 340 2 rom fi- és sertéstenyésztésben használatos tipikus alaptakarmányokat ismertet a 4 115 552. számú amerikai szabadalmi leirás. A jelen találmány szerinti eljárás egy fontos kivitelezési változata szerint az A-4696 jelzésű antibiotikum pszeudo-aglikon-származékát, vagy ennek valamely alkalmas savaddiciós sóját a jobb takarmányhasznosítás és gyorsabb növekedés érdekében az állatoknak orálisan adagoljuk, mégpedig az össztakarmány minden tonnányi mennyiségébe körülbelül 2 g és körülbelül 200 g közötti mennyiséget keverünk. A jelen találmány szerinti aktív antibiotikumot előnyösen úgy adjuk hozzá az állatok takarmányához, hogy valamely alkalmas premixet készítünk (mint amilyet például a 4 115 552. számú amerikai szabadalmi leírás ismertet), amely a premix minden fontnyi mennyiségében körülbelül 1 g és körülbelül 100 g közötti mennyiségű A-4696 jelzésű pszeudo-aglikon-származékot tartalmaz. Az így elkészített premixet keverjük ezután a takarmányhoz. Egy másik módszer szerint a hatóanyagot valamely sűrítményhez vagy takarmányadalékhoz adva is bekeverhetjük az állatok takarmányába. Az A-4696 jelzésű antibiotikum pszeudo-aglikon-származékának többféle előnyös'hatása van, de különösen erős az antibiotikus hatása. Az ilyen jellegű anyagokra mindig nagy szükség van, nemcsak a fogromlás és íny-megbetegedések kezelésére, hanem általában más, mikroorganizmusok által kiváltott betegségek kezelésére is. AZ A-4696 jelzésű antibiotikum új pszeudo-aglikon-származékát legkényelmesebben úgy állíthatjuk elő, hogy az A-4696 jelzésű antibiotikumkomplexet enyhe savas hidrolízisnek vetjük alá. Az A-4696 jelzésű antibiotikum-komplexet úgy állíthatjuk elő, hogy egy Actinoplanes fajhoz tartozó mikroorganizmust valamely alkalmas közegben, levegőztetett körülmények között mindaddig tenyésztünk, míg az antibiotikum a táptalajban a kívánt mértékben fel nem szaporodik. Az így termelt antibiotikumot különféle, önmagában ismert és alkalmazott módszerekkel különíthetjük el és tisztíthatjuk meg. Az A-4696 jelzésű antibiotikum pszeudo-aglikon-származéka előállítására kiindulási anyagként használt A-4696 jelzésű antibiotikum-komplex' termelésére használt mikroorganizmus az Actinoplanaceae családhoz tartozó Actinoplanes missouriensis egy törzse. Az Actinoplanaceae család az Actinomycetales rendhez tartozik, e rendet először John N. Couch írta le, Jour. Elisha Mitchell Sei. Soc., 65, 315-318 (1949) és 66, 87-92 (1950), Trans. New York Acad. Sei., 16, 315-318 (1954), Jour. Elisha Mitchell Sei. Soc., 71. 148-155 és 269 (1955), Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, 7. kiadás, 825-829 (1957) és Jour. Elisha Mitchell Sei. Soc., 79, 53-70 (1963). A kiindulási A-4696 jelzésű antibiotikumot termelő Actinoplanes missouriensis törzset letétbe helyeztük a Rockville-i (Maryland) törzsgyűjteményben, ahonnan bárki számára hozzáférhető, az ATCC 31 683 szám alatt. Az ATCC 31 683 jelű Actinoplanes missouriensis fizikai és tenyésztési tulajdonságait az alábbiakban adjuk meg. Ez a törzs a 4 115 552. számú amerikai szabadalmi leírásban ismertetett ATCC 23 342 jelzésű törzsből mutációk sorozatával állítható elő. A jelen törzs micéliuma hasonló az eredeti törzséhez, és alaktanilag lényegében megkülönböztethetetlen attól. Nincs másodlagos, légmicéliuma, sem pedig sporangiuma (spóratartója), és nem képez sporangiumot még különleges módszerekkel, . például virágporon való tenyésztés során sem. Az ATCC 31 683 jelű törzs taxonómiai (rendszertani) meghatározására használt módszerek a szakemberek előtt ismeretesek, és nagyrészük a Shirling és Gottlieb által leírt [Intem. J. of Systematic Bacteriol. 16(3), 313-340 (1966)], az International Streptomyces Project-ben (ISP) ajánlott módszer. Az enzimek meghatározását Blazevic és Ederer módszerével [Principles of Biochemical Tests in Diagnostic Microbiology, John Wiley and Sons, Inc., New York, 1975] végeztük, a színek elnevezése, a rövidítések és számjelzések megfelelnek Kelly és Judd (The ISCC-NBS Centroid Color Charts Standard Sample No. 2106, U. S. Dept, of Commerce, National Bureau of Standards, Washington D. C., 1976) ISCC-NBS módszerének. A lizozim-rezisztenciát, valamint a kazein, eszkulin (6,7-dihidroxi-kumarin-6-0-glükozid), hipoxantin, tirozin és xantin bontását Berg [Appl. Microbiol. 25, 665-681 (1973)] módszerével határoztuk meg. A szénforrás-hasznosítási vizsgálatok során az alábbi pontrendszert alkalmaztuk: + + = egyenlő vagy nagyobb, mint a glükózzal végzett kontroll ; pozitív hasznosítás ; + = kisebb mint a glükóz, de nagyobb, mint a szénforrás nélküli kontroll; pozitív hasznosítás; ( + ) = kétséges növekedés; kétséges hasznosítás;- = nincs növekedés; negatív hasznosítás. A fentieknek megfelelően, az alábbi táblázatban megadjuk a jelen találmány szerinti Actinoplanes törzs taxonómiai leírását, beleértve a tenyésztési és élettani tulajdonságait is. Az ATCC 31 683 jelzésű Actinoplanes törzs általános tenyésztési és élettani tulajdonságai A megfigyelt tulajdonság Jellemzők Tenyésztési tulajdonságok az alább megadott táptalajokon: ISP 2. jó növekedés, hátoldal 90. gy. Y; légmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 3. jó növekedés, hátoldal 93. yGray; légmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 4. jó növekedés, hátoldal •79.1. gy. yBr; légmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 5. mérsékelt növekedés, hátoldal 90. gy. Y.; légmicélium nincs; oldható színanyag nincs; ISP 7. mérsékelt növekedés, hátoldal 80. gy.yBr; légmicélium 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
