189774. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-oxa-béta-laktám-származékok előállítására
1 adásával megszakítjuk a reakciót, A szerves fázist a vjzes fázistól elválasztjuk és háromszor 25 ml 7 pH értékű puffer-sóoldat 50:50 arányú ke,erekkel mossuk. A szerves fázist magnéziumszulfáton megszárítjuk, leszűrjük és szárazra pároljuk. 500 mg terméket kapunk fehér habként. 200 mg terméket szilikagélen, 3:2 térf/térf. arányú etilacetát: toluol eluens alkalmazásával kromatografáljuk. A jóddal és UV detektorral egyaránt kimutatható zónában található anyagot visszanyerjük és így 60 mg nyersterméket kapunk. A 60 mg nyersterméket Water, s Associates C,8 reverz fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiás berendezésen, 70%-osacetonitril—'víz eluens alkalmazásával tisztítjuk. A nagynyomású folyadékkromatográfia két jelet mutat. Az egyik anyag 11,4 mg 7a.[(benzilo>J karbonil)-amino]-I-oxa-3-metilén-cefam-4-karbonsav-(difenil-metil)-észter. IR: (3-1 aktám karbonil abszorpció 1780 cm"1, észter kar bonil abszorpció 1760 cm'1. Tér-deszorpciós tömegspektrum: 498; a másik anyag 12,0 mg 7a-t(benziloxi-karbouil)aminő]-l-oxa-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(di fenil-metil)-észter. Tér-deszorpciós tömegspektrum: 498. 2. példa 562 mg difenil-metil-7a-(btí,ziloxi-ka.6amido)3- -(ludio\í-metirj-3-cefem-4-karboxilát-l ,1-dmxidot 34: 2 térf/térf. aranyú acetonitril : ecetsav elegyben, körülbelül 0 °C iiigany katód alkalmazásává, -1,450 (standard kálóméi elektródra vonatkoztatott) n dukciós potenciál mellett körülbelül 3 óráig redukálunk. A hideg redukciós elegyhez 100 ml etilacetátot adunk, a hideg szerves fázist elválasztjuk és háromszor 80 ml 1 ; 1 térf/térf. arányú pri 7 foszfát puffer : : sóoldat eleggyel mossuk. Ezután az azetidin 2-on-4- -szulfinsavat tartalmazó szerves fázist magnéziumszulfáton megszárítjuk és leszűrjük. A szulfinsav etilacetátos oldatát szárazjég-aceton fürdőben lehűtjük és 400 mg olomtetraacetátot adunk hozzá. A re akcióele gyet körülbelül 2 óráig hidegen keverjük, miközben a hőmérsékletet körülbelül -5 °C - 0 °C értékre hagyjuk emelkedni. Keverés közben újabb 200 mg olomtetraacetátot adunk az elegyhez és a keverést további 45 percig folytatjuk. A reakcíóelegyből ezután az olomtetraacetátot kiszűrjük és a szűrletet háromszor 75 ml 0,3 mólos pH 7,0 foszfor puffer : sóoldat eleggyel mossuk, majd megnéziumszulfáton megszárítjuk. A száraz oldatot szárazra pároljuk és a maradékot kloroformban feloldjuk. A kloroformos oldatot a kristályosodás megndulásáig betöményítjúk. Körülbelül 20 mg melléktermék válik ki, ami az elektrolízis eljárásban használt 1,1-dioxid kiindulási anyagból képződött lakion. A kapott szűiletet preparatív vékony réteg kromatográfia segítségével szilikagél kromatográfiás lapokon, 3: 2 arányú térf/térf etilacetát: toluol eluens alkalmazásával kromatografáljuk. öt zónát különböztethetünk meg. Ezeket a szilikagélról extraháljuk. A 2. zóna 21,9 mg anyagot tartalmaz és reverz fázisú Ci g szilikagélen nagynyomású folyadékkromatográfia segítségével újra kromatograíáljuk. A nagynyomású folyadékkromatográfia legnagyobb mennyiségű frakcióját összegyűjtjük és bepároljuk, mely a 2 7a [(be n /üoxi-meúl) amino]- l-oxa-3-metil-3-cefem-4- -karbonsav-(difenil-metil)-észtert tartalmazza. Tömegspektrum: 498. NMR (360 Hz, DMSOd6): 1,93 (s, 3H, 3-CH3),4,4l (s, 2H, C2-H), 4,49 (d, M-9 Hz, lH, C7-H), 5,06 (s, 1H, C6-H), 5,10 (s, 2H, benzü CH2), 6,87 (s, 1H, benzhidrol CH), 8,39 (d, J=8-9 Hz, lH, amid H), és 7,2-7,6 (15 aromás H), ppm. A 2. zóna nagynyomású folyadékkromatográfiájának két kisebb mennyiségű frakciója a megfelelő 3- -(exo-metilén)-izomert tartalmazza. 3. Példa 1 g (difenil-!netil>7a-(fenoxi acetamido>3-(hidroxr-metil)-3-cefem-4-karboxilát-l,l-dioxid 36 ml metanolban készült oldatát higany gyűrű katódot, platina szál gyűrű anódot, standard kálóméi elektródot, 0,1 mólos nátriumperklorát katolitot és mólos 2 pH értékű foszfát anoütot tartalmazó elektrolizáló cellába helyezünk és körülbelül 0 °C-on, -1,45 V mellett elektrolitikusan redukáljuk. Az elektrolízis befejeződése után a hideg elektrolitot 250 ml-es elválasztó tölcsérbe helyezzük és 80 ml hideg etilacetátot adunk hozzá. A hideg elegyet 50 ml 1:1 arányú telített sóoldat: 0,3 m, pH 7 foszfát puffer eleggyel mossuk. Az etilacetátot elválasztjuk, és az oldatot újabb 80 ml etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos extraktumokat egyesítjük, és háromszor telített sóoldat-foszfát puffer eleggyel mossuk. Ezután magnéziumszulfáton megszárítjuk és szárazra pároljuk. 765 mg nyers l-[2-(hidroxi-metíl)-3-(/difenjl-metoxi/-karbonil>propén3-iÍ]-3a-(fenoxi-acetamido)-azetidin-2-on-4-szulfinsavat kapunk. Az azetidin-2-on4-szulfinsavat Dewar hűtővel (szárazjege s-acetont tartalmaz), dugóval és gázbevezetővel ellátott háromnyakú lombikba tesszük és 15 mg rézszulfátot adunk hozzá, majd addig vezetünk kéndioxidot a lombikba, amíg körülbelül 12 ml folyékony kéndioxid nem keletkezik. Amikor a szilárd anyagok feloldódnak, 600 mg ólomtetraacetátot adunk az oldathoz. A reakciót 10 percig hagyjuk végbemenni,-majd az elegyet 80 ml etilacetátot és 80 ml 1 : 1 térf/térf arányú telített sóoldat: pH 7 foszfátpuffer elegyet tartalmazó választótölcsérbe öntjük. Az etilacetátos fázist elválasztjuk, háromszor telített sóoldat-foszfát puffer eleggyel mossuk, magnéziumszulfáton megszárítjuk és szűrés után szárazra pároljuk. 443 mg nyersterméket kapunk. A nyerstermék keveréket reverz fázisú Cig szilikagélen nagynyomású folyadékkromatográfia segítségével 50%-os acetonitril-víz eluens alkalmazásával kromatografáljuk. A 7a-(fenoxi-acetamido)3-metil-A3-1 -oxa-/3-laktám-4 -karbonsav (difenil-metil)-észtert kapjuk termékként. Térdeszorpciós tömegspektrum : 498. NMR (90 Hz, DMSO-dg): 1,90 (s, 3H, C3 metil), 4,40 (s, 2H, C2-H), 4,59 (s, 2H, fenoxi-acetil CH2), 4,74 (dd, J4H=i,5 Hz, JNH= 9 4 Hz, lH, C, -H), 5,11 (d, J3H= i,5 Hz, 1H, C6-H), 6,90 (s, 1H, észter metin H), 7-7,8 (m, aromás H), 9,11 (d, J3H= 9,4 Hz, 1H, amid H) ppm. 4. példa 1,051 g (difenil-metil)-7a-(benziloxi-karbainido)-3-(hidroxi-metil)-3-cefem-4-karboxÍlát-1,1 -dioxid 189.774 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
