189757. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiai tulajdonságú peptidek előállítására
1 189. ?57 2 csoport tioicsoportját ismert módon — adott esetben a tiolvédőcsoport eltávolítása utál - egy másik dszteinmolekula tiolcsoporttal kapcsoljuk. Az (I) általános képletű peptid N-terminális pGlu aminosavját vagy úgy visszük be a peptidbe, hogy a kondenzációs reakciót piroglutaminsawal folytatjuk ie, vagy előnyösen a paptidszintézisben piroglutaminsav helyett glutaminsavat használunk, és a kapott peptid glutaminilcsoportját a kondenzációs reakció lefolytatása utál ismert módon piroglutaminilcsoporttá alakítjuk, majd a használt védőcsoportokat eltávolítjuk. A védőcsoportok lehasítását különféle, a védőcsoport típusától függően megválasztott ismert eljárásokkal, például trifluor-ecetsav vagy nietánszulfonsav segítségével végezhetjük el. Az (1) általános képletű peptidek funkcionális származékai alatt a peptidek 1. sóit,különösen savaddíciós sóit és 2 amidjait értjük. A pepiidet a kívánt savat tartalmazó közegből izolálva közvetlenül savaddíciós sót kapunk, vagy a kapott peptide t savval - például hidrogén-kloriddal, hidrogén-bromiddal, foszforsavval, kénsavval, ecetsavval, malein savval, borkősawal, eitronisawal vagy poliglutaminsawal — reagáltatva alakítjuk savaddíciós sóvá. Az (1) általános képletű peptidek ainidjait a homogén fázisú kondenzációs reakcióban előnyösen úgy állítjuk elő, hogy a peptid-szintézisben olyan aminosavat használunk, amely eleve tartalmazza a kívánt amidcsoportot. A fenti származékokat azonban úgy is előállíthatjuk, hogy a kész peptidef utólag hagyományos módon áruiddá alakítjuk. A szilárd fázisú eljárásban az amidokat pedig ammóniás kezeléssel állíthatjuk elő. Az amidok közül előnyösek a s/uhsztituálatlan amidok A találmány szerinti eljárással előállított peptidek - mint azt már fentebb említettük - pszichofarmakoiógiai hatással rendelkeznek, közelebbről a memónafolyamatokra hatnak; ez a hatás meglepően nagyobb, mint az ismert neuropepfideké, például az oxitociné vagy a vazopressziné Azok az (I) általános képletű peptidek, amelyek képletében A jelentése Arg csoport, jelentősen elősegítik az emlékezőképesség erősödését, és általában olyan esetekben használhatók, amikor a szellemi teljesítmény fokozása kívánatos, például a depresszió kezelésében, de különösen a tanulási- és memóriafolyamatok zavara esetéi, amelyek például idősebb embereknél fordulnak elő (szenilitás). Azok a találmány szerinti eljárással előállított peptidek, amelyeknek képleteben A jelentése .Leu, gátolják azemlékezőképesség megerősödését és visszanyerését. í zek a peptidek általában olyan esetekben használhatók, amikor a központi idegrendszer gátlása a cél; például a rögeszmés neurózisok vagy egyéb viselkedési zavarok kezelésére alkalmazhatók A találmány szerinti eljárással előállított peptidek orálisan, rektálisan, párén te ralisa n, szublinguálisan vagy intranazálisan egyaránt alkalmazhatók. A parente rális és intranazális alkalmazás az előnyös. Az (1) általános képletű peptideket ezért előnyösen olyan gyógy ásza tiíag elfogadható segédanyagokkal kcveijiik össze, amelyek segítségével a peptid hatóanyagot oldatok, szusz.penziók adott esetben mikro-kapszulázás útján - emulziók vagy spray-k formájában párén te ráiisan vagy intranazálisan alkalmazhatóvá tesszük. A peptid hatóanyagot megfelelő segédanyagokkal összekeverve orálisan alkalmazható készítménnyé - például pirulává, tablettává vagy drazsévá - is kikészíthetjük. A találmány szerinti eljárással előállított peptidekből kúpot is készíthetünk. Parenterális vagy intranazális alkalmazás esetén a találmány szerinti eljárással előállított peptideket vagy peptidszármazékokat 1 ng - 5 pg/testsúly kgjnap dózisban adagoljuk. Humán alkalmazás esetén a dózis általában 10-100-szorosa a parenterális vagy intranazális dózisnak. A találmány szerinti eljárást - a korlátozás szándéka nélkül - az alábbi példákkal kívánjuk közelebbről ismertetni. Ha az optikai konfigurációt külön nem tüntetjük fel, minden esetben L-ízomerről van szó. A védő- és aktiválócsoportokat az alábbiak szerint rövidítjük: Sem: S-karbometoxi-szulfenil-csoport tBu: tercier-butil-csoport Me : metílesoport Mbs : 4 -metoxi -benzolszulfonil -csoport Z: benzol-oxi-karbonil-csoport Trt; tritilcsoport. Az aminosavesoportokat a nemzetközileg elfogadott rövidítésekkel jelöljük, Asn jelentése vagy asz paraginil cső port és pGlu jelentése piroglutamilcso port. I példa 1. Z Arg(Mbs)-OtBu előállítása 4225 g (59,01 mmól) Z-Arg(Mbs)-OH-diciklohcxil-amino-sót 500 ml etilacetát és 150 ml, 9,97 g (73,21 mmól) kálium-hidrogén-szulfátot tartalmazó víz elegyében szuszpendálunk. Az összes anyag feloldódása után a fázisokat elválasztjuk és a szerves fázist 10 ml 30%-os nátrium-klorid-oldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd bepároljuk. 135 ml izobutént —30 °C-on cseppfolyósítünk, majd hozzáadunk a Z-Arg(Msb)-OH 400 ml diklór-metán és 5 ml tömény kénsav elegyével készült oldatát. Az elegyet 4 napon át keverjük, majd az izobutént ledesztilláljuk A szerves fázist választótölcsérbe visszük, vizet adunk hozzá, és a pH-t nátriumkarbonáttal 7-re állítjuk. A fázisokat elválasztjuk és a szerves fázist 3-szor 100 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattaJ, 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és 30%-os nátrium-klorid-oldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Petroléter hozzáadására csapadás képződik, melyet leszűrünk és petroléterrel mosunk. 18,61 g (59,0%) cím szerinti vegyületet kapunk. Rf: 0,84 (kloroform-metanol 8:2 arányú futtatóelegy.szilikagél réteg). 2. H-Arg(Mbs)-OtBu előállítása 18,00 g Z-Arg(Mbs)-OtBu-t 180 ml metanolban 1,8 g 5% fémtartalmú szénhordozós palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. A katalizátort leszűrjük és az. oldatot bepároljuk. A maradékot (hab) ismételt'" bepároljuk, majd 200 ml etil-acetátban oldjuk,-.* a nem oldódó szilárd anyagot leszűrjük. Á szürletet bepároljuk, maradékként habot kapunk. 5 10 16 20 26 3C 36 40 45 50 55 60 3
