189692. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a vér hemoglobinjának hem és globin részre való szétválasztására
1 2 189.692 o xl-me til-cell ul óz 0,3 9^ os vizes oldatából, amikor is a CMC-nek a globin fehérjére vonatkoztatott súlyaránya 1,9 ;10. A keveréket állni hagyjuk 15 percig és a 5 kicsapódott hem-CMC komplexet elválasztjuk a globin fehérje oldattól 8000 g-vel 0,5 óra hosszat végzett centrífugálással. A fehérje-frakció az eredeti globin fehérjéknek körülbelül a 60 súly%-át tartalmazza és a szárazanyagának kevesebb, mint a 0,06 súly%-a a vas. i _ 4. példa 1 ” A plazmától elválasztott vérsejteket vízzel 14 súlyarányban felhígítjuk. Az oldat pH-ját 1 mólos vizes sósav oldattal 1,5 értékre állítjuk be és a CMC 0^35%-os vizes oldatát adjuk hozzá háromszoros térfogatmennyiségben, amikor is a CMC-nek a vizes ol- -j g datban lévő globinra vonatkoztatott súlyaránya 1,7 ;10. A keveréket állni hagyjuk 15 percig és a kicsapódott hem-CMC komplexet elválasztjuk a fehérje oldattól 8000 g-vel végzett 0,5 órás centrifugálás révén. A globin fehéijefrakciót az eredeti fehérjéknek körülbelül a 80%-át tartalmazza és a szárazanyag- 20 tartalmának csak mintegy a 0,07 súly%-a a vas. 5. példa A plazmától elválasztott vérsejteket vízzel 1:4 súlyarányban hígítjuk fel. Az oldat pH-ját 1 mólos vizes sósav oldattal 1,4 értékre állítjuk be és egy J) ,06%-os vizes CMC oldatnak a háromszoros térfogat- 25 mennyiségét adjuk hozzá, amikor is a helyettesítési fok legalább 1,1 és a CMC:fehérje arány 1;75. A keveréket állni hagyjuk 15 percig és a kicsapódott hem-CMC komplexet centrífugálással választjuk el a fehérje oldattól. A globin fehérjefrakció az eredeti fehérjéknek körülbelül a 90%-át és az eredeti hemfrakciónak mintegy 10%-át tartalmazza. 6. példa A plazmától elválasztott vérsejteket 1:4 súlyarányban hígítjuk fel vízzel. Az oldat pH-ját sósav 1 mólos vizes oldatával 1,5 értékre állítjuk be és 30 per- 35 dg tartó keverés közben száraz CMC port adunk hozzá olyan mennyiségben, hogy a CMC végső koncentrádója körülbelül 0,3 súly /térfogat % legyen. A keverék pH-ját nátiium-hidroxid 1 mólos vizes oldatával 2,4 értékre állítjuk be és állni hagyjuk 30 percig. A kicsapódott hem-CMC komplexet a fehérje oldattól centrífugálással választjuk el. A glohin fehéjjefrakció körülbelül az ereded fehérjéknek a 70%-át és az ereded hemfrakdónak a 7%-át tartalmazza. Szabadalmi Igénypontok 1. Eljárás a vér hemoglobinjának hem és globin részre való szétválasztására a vérplazmától elkülönített vérsejteknek savas vizes oldatban hem és globin részre való disszociáltatása után, azzal jellemezve, hogy a savas rendszerhez karboxi-metil-cellulózt adva lecsapjuk a hem-karboxi-metil-cellulóz komplexet és ezt à csapadékot a globin-tartalmú vizes oldattól elválasztjuk. 2. Az 1. igénypont szerintí eljárás, azzal jellemezve, hogy a karboxi-metil-cellulózt olyan mennyiségben adjuk a hemet és globint tartalmazó vizes rendszerhez, hogy a karboxi-medl-cellulóznak a globinra vonatkoztatott súlyaránya 1:1000 — 2:10 határok között legyen. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a karboxi-medl-cellulózt olyan njennyiségben adjuk a hemet és globint tartalmazó vizes rendszerhez, hogy a karboxi-metil-cellulóznak a globinra vonatkoztatott súlyaránya 1:10 — 2:10 határok között legyen. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve , hogy a hemet és globint tartalmazó rendszerhez a karboxi-metil-cellulózt vizes oldata formájában adjuk. 5. Az 1,3,4. igénypontok bánnelyike szerinti eljárás,azzal jellemezve, hogy a hem lecsapása folyamán a vizes rendszer pH-ját maximálisan 3 pH értéken tartjuk. ábra nélkül Kiadja: Országos Találmányi Hivatal Felelős kiadó: Himer Zoltán KÓDEX 3
