189628. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászati hatású 3-amino(1)benzazepin-2-on-í-alkánkarbonsav-származékok és az ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 I által előidézett vérnyomásemelkedés gyengül, A megfelelő invivo kísérletet intravénásán beadott vegyületekkel hím normo tenziv patkány de on végezzük, amelyeket 5-etil-5-/l-metilpropil/-2-tiokarbitursav nátriumsóval narkotizálunk. Egy combi artériát és egy lábikravénát egy-egy üreges tűvel látunk el a vérnyomás közvetlen mérésére, valamint az angiotenzin l és a találmány szerinti hatóanyag intravénás beadására. Az alapvérnyomás stabilizálása után a vérnyomásváltozást három, 5 perces időközben, 333 mg/kg angiotenzin I-el (i. v. beadva), kiváltott ingerekkel meghatározzuk. Az ilyen nyomásváltozásokat ismét mérjük 5, 10, 15, 30 és 60 perccel a vizsgálandó vegyület intravénás beadása után. Az utóbb kapott nyomásváltozásokat a kezdeti értékekkel összehasonlítjuk. A vérnyomás-reakció minden megállapító tt csökkenése utalás az enzim gátlására, amely az angiotenzin I-etátalakítja. A találmány szemléltetésére az 1. példa szerinti „magasabb olvadásponté 1 -karb oxime Ü1-3-/1 -e toxikarbonil-3-fenilpropilamjno/-2,3,4,5-tetrahldro-lH- -benzazepin-2-onvegyületre és a 12. példa szerinti megfelelő S,S-enantioinerre utalunk. Ezek 30 perc alatt 1 mg/kg adag intravénás beadás után tökéletesen gátolják a vérnyomásemelkedést angiotenzin I inger után. Az angiotenzint átalakító enzimnek a találmány szerinti eljárással előállított hatóanyagokkal való in vitro gátlását a Biochim. Biophys. Acta 293, 451 (1973) irodalmi helyen ismertetett módszerhez hasonló módon bizonyíthatjuk. E módszer szerint az említett vegyületek körülbelül 1 mmólos koncentrációjú oldatait készítjük el foszfátpufferrel. A vizsgálandó vegyület foszfátpufferrel készített oldatainak, amelyeket a kívánt koncentrációra hígítunk, 100 mikroliternyi mennyiségéhez először 100 mikroliter foszfátpufferes 5 millimólos hippuríl-hisztidil-leucin-oldatot és utána 50jul angiotenzinátalakító enzimet adunk. Ezt az enzimet kifejlett hím kísérleti nyulak tüdejéből állítjuk elő triszpufferben, amely kálium- és magnéziumkloridot, továbbá nyerscukrot tartalmaz. Az említett oldatokat 30 percig 37°C-on inkubáljuk és a további reakciót 0,75 ml 0,6 n vizes nátriumhidroxid-oldat hozzáadásával megállítjuk. Ezután szobahőmérsékleten 100 mikroliter 0,2%-os metanoios o-ftáladelhidoldatot és 10 perc múlva 100 mikroliter 6 n hidrogénklorid-oldatot adunk hozzá. Ezeket a próbákat egy spektrofotométerben 360 nm-nél vízzel hasonlítjuk össze és meghatározzuk optikai sűrűségüket. Ezeket az értékeket egy konverziós tényező útján kalibrációs, görbéhez viszonyítjuk, így az említett 30 perces inkubációs idő alatt képződött hisztidil-Jeucinmennyiséget kapjuk manomólokban. Az eredményeket az lCS0-érték meghatározása érdekében, a hidrogénkoncentráció függvényében grafikusan ábrázoljuk. Az IC50-érték azt a hatóanyagkoncentrációt jelenti, amelynél az enzimaktritás olyan kontrolpróba enzimaktivitásának a fele, amely nem tartalmaz hatóanyagot. A találmány bemutatása érdekében a 9. példa szerinti „nagyobb olvadáspontú l-karboximetil-3-/ -1 -karboxi-3-fenilpropilamino/2,3,4,5-tetrahidro-1H-[1 }-benzazepin-2-on vegyületre és a 19. példa szerinti S,S-enanüomerre utalunk, amélyeknek az ICí0- értéke 5,2xl0'9 M, illetve l,7xl0'9 M. A 8(l példa szerinti megfelelő „alacsonyabb olvadáspontú 1-karboximetil-3 -/1 -karboxi-fenilpro pilamino/-2,3,4,5-tetrahidro- lH-[l]benzazepín-2-on vegyület ICj0-értéke 5,8xl0"8 M. Az az enzim, amely az angiotenzint átalakítja, nemcsak az angiotenzin I-nek angiotenzin H-vé való átalakításában vesz részt, hanem szerepe van a bradykinin-(lassú reagálás) és az aldoszteron-tükrök ellenőrzésénél is. Az (I) általános képletű vegyüieteknek ezekre a tényezőkre való hatása hozzájárulhat ezen vegyüieteknek a magas vérnyomás elleni és szívre hatásos tulajdonságok kialakulásához is. Az előzőekben felsorolt előnyös tulajdonságaik alapján az (I) általános képletű hatóanyagok nagyon értékes specifikus, terápiás gyógyszerek hatóanyagok emlősök és az ember számára. Ennek megfelelően, a találmány szerinti eljárással előállítható vegyületek különösen értékes vérnyomáscsökkentő gyógyszerek hatóanyagai (tekintet nélkül a kórokra) és/vagy szívbetegségek, így szívelégtelenség, és/vagy más Ödémával vagy ascites-szel járó állapotok kezelésére használhatók. Ezek a vegyületek közbenső termékekként is szolgálhatnak más értékes termékek, különösen gyógyászatilag hatásos készítmények előállításánál. Az (I) általános képletű új 3-amino[l jbenzazepin-2-on-l-alkánkarbonsavakat, valamint ezek sztereoizomerjeit és sóit önmagában Ismert módszerekkel, a következő eljárások szerint állítjuk elő: a) valamely (II) általános képletű vegyületbe, amelyben a karbociklusos gyűrű telített is lehet, és X, Ro, R3 és R4 jelentése az előzőekben megadott, egy (1IIA) általános képletű vegyülettel való alkilezéssel, amelyben Z valamely reakcióképes észterezett hidroxilcsoportot képvisel, és R. az előzőekben megadott jelentésű, vagy egy (IV7 általános képletű vegyülettel való alkilezéssel, amelyben R, és R_ jelentése a fent megadott, valamely redukálószer jelenlétében, és az X-csoportban adott esetben jelenlévő hídroxilcsoport átmeneti megvédése közben egy csoportot beviszünk, vagy b) valamely (V) általános képletű vegyületet, amelyben a karbociklusos gyűrű telített is lehet, és amelyben X, R3 és R4 jelentése az előzőekben megadott, míg R», hidrogénatom vagy R * előzőekben megadott jelentésű csoport, egy (Illő) általános képletű vegyülettel, amelyben Z reakcíóképes észterezett hídroxilcsoport és Rß jelentése az előzőekben megadott, alkilezünk, és az X-csoportban adott esetben jelenlévő hidroxiícsoportot átmenetileg megvédjük, vagy c) valamely (VI) általános képletű vegyületet, amelyben a karbociklusos gyűrű telített is lehet, és Y jelentése oxocsoport, vagy egy Z reakcíóképes észterezett hidroxilcsoportot jelent egy hidrogénatommal együtt, míg X, Rp, R3 és R4 az előzőekben megadott jelentésű, egy (VII) általános képletű aminnal, a képletben R^ jelentése a fenti, kondenzálunk, emellett, ha Y oxocsoportot jelent, akkor a kondenzációt valamely redukálószer jelenlétében hajtjuk végre, vagy d) valamely (VIII) általános képletű vegyületben, amelyben a karbociklusos gyűrű telített is lehet és X, valamint Rj, Ra, R3 és R4 jelentése az előzőekben megadott, rníg R ’ és RQ” szubsztituensek egyike cianocsoport és a másika cianocso port vagy az előzőekben megadott jelentésű R0 csoport, a cia-189 628 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
