189590. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
1 . 189 590 2 verjük. A reakcióelegyet ezután intenzív keverés közben 1 liter vizbe öntjük. A vizes fázist ezután dekantáljuk, majd a szilárd részt 300 ml kloroformmal felvesszük. A kis mennyiségű vizet elkülönítjük, majd a kloroformos oldatot vákuumban bepároljuk, 12,6 g mennyiségben törékeny fehér habot kapva. A teljes vizes fázist ezután 100—100 ml kloroformmal háromszor extraháljuk, majd az egyesített extraktumot 50 ml vízzel, ezután pedig 50 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk. Ezután az oldat térfogatát 40 ml-re betöményítjük, majd a koncentrátumot intenzív keverés közben 300 ml vízhez adjuk. A csekély kloroformos fázist elválasztjuk, majd az oldószert vákuumban lehajtjuk, 6,17 g mennyiségben fehér habot kapva, amelyet hozzáadunk az először kapott habhoz. Az így kapott nyers termék protonmágneses rezonanciaspektroszkópiás (továbbiakban: PMR) elemzésének tanúsága szerint ilyen módon a dimetil-formamid nagy részét sikerült eltávolítani. 1,25 kg szilikagélen végzett kromatográfiás tisztítás (metanol és kloroform kombinációjával gradiens-eluálást végezve) eredményeképpen először egyrészt a cim szerinti vegyület tiszta a-anomeijéből 1,33 g-ot (1,89 millimól, 7,6%), másrészt ezután a cím szerinti vegyület tiszta ß-anomerjeböl 2,86 g-ot, illetve további 3,17 g olyan ß-anomert kapunk, amely közel 90%-os tisztaságú. Az a-anomer azonosítási adatai : IR-spektrum (CHC1,): 3550, 3400, 3070, 3980, 1745, 1686, 1675 (váll), 1484, 1449, 1364, 1333, 1235, 1167, 1026 és 669 cm"'. PMR (CDCI3): 8 7,40 (s, 10, aromás), 6,07 (s, 1, H„) 5,95 (d, J = 3 Hz, 1, H3), 5,20 (m, 7), 3,3-4,6 (m, 10), 3,12 és 3,08 (s's, 6, NCH3), 2,12 és 2,03 (s', 6 CH3). Tömegspektrum (tetra-TMS-származékra). 991 (M+), 689 és 673. CMR (D#-aceton): 8 170,1, 169,8, 157,8 156,5, 150.1, 138,1, 129,1, 128,8, 128,4, 91,7, 86,9, 79,1, 74.4, 69,1, 68,6, 68,3, 67,8, 67,3, 60,3, 57,7, 31,5, 31.4, 20,8 és 20,5. Olvadáspont: 130-140 *C (bomlik). Nagy feloldóképességű tömegspektrográffal a tetra-TMS-származékon mért molekulasúly a C45H7JN30I4Si4 képletre: számított: 991,4169, talált: 991,4190. A ß-anomer azonosítási adatai: IR-spektrum (CHC13): 3500, 3100, 2970, 1748, 1686, 1672 (váll), 1486, 1449, 1370, 1337, 1235, 1167, 1107, 1024 és 700 cm"'. PMR (CDClj): 8 7,40 (s, 10, aromás), 6,40 (s, 1, H„), 6,05 (d, J = 3 Hz, 1, H3), 5,0-5,5 (m, 6), 3,4-3,8 (m, 11), 3,07 és 3,04 (s's, 6, NCH3), 2,08, 2,05 (s's, 6, CH3). Tömegspektrum (a tetra-TMS-származékra): 991 (M+), 990, 976, 975, 689 és 673. CMR (D6-aceton): 8 170,7, 169,9, 157,7, 157,1, 149.1, 137,9, 129,1, 128,7, 128,3, 92,3, 85,3, 74,7, 70,8, 69,4, 67,3, 62,0, 60,2, 31,4, 20,8 és 20,5. Olvadáspont: 140-155 *C (bomlik). Nagy feloldóképességű tömegspektrográffal a 6 tetra-TMS-származékon mért molekulasúly a C45H73N30,4Si4 képletre: számított: 991, 4169, talált: 991,4229. 3. referenciapélda 5-0-(4',6'-di-0-Acetil-3'-0-metil-2'-dezoxi-2'oxiimino-$-D-glükopirazonil) -N,N'-bisz- ( benziloxi-karbonil) -aktinamin előállítása (G reakcióvázlat) 60,6 g (196 millimól) 4,6-di-0-acetil-3-0-metil-2- nitrozó-a-glükopiranozil-klorid 1,1 liter dimetilformamiddal készült oldatához 97,7 g (201 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamint adunk, majd az így kapott reakcióelegyet nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten 45 órán át keverjük és ezután 30 *C-on nagyvákuumban sűrű sziruppá betöményítjük. Ezt azután kis adagokban intenzív keverés közben 3 liter, jéggel hűtött vízhez adjuk. A kivált fehér csapadékot kiszűrjük, 2 liter kloroformban újraoldjuk, a kloroformos fázist a visszamaradt víztől elválasztjuk és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, végül pedig bepároljuk, így 143 g mennyiségben nyúlós fehér habot kapunk, amely magmágneses rezonanciaspektroszkópiai vizsgálatának (továbbiakban : NMR) tanúsága szerint közel 7% dimetil-formamidot tartalmaz. 3,5 kg szilikagélen metanollal és kloroformmal végzett gradiens-eluálással a termékek durván elválaszthatók egymástól. A ß-anomert tartalmazó frakciót acetonból kristályosítva 4,4 g mennyiségben a tiszta ß-anomert kapjuk. Az anyalúg kromatografálásával további 1,5 g ß-anomer különíthető el. IR-spektrum: 3500, 3310, 2920, 1750, 1690, 1459, 1240, 1175, 1105, 1403, 735 és 711 cm'1. PMR (CDC13) : 8 7,32 (s), 5,41 (s), 5,11 (s), 3,5-4,5 (m), 3,33 (s), 3,04 (s) és 2,02 (s). CMR (CDClj): 8 170,6, 169,6, 157,7, 156,5, 150.1, 136,5, 128,5, 127,8, 95,7, 92,7, 77,1, 73,2, 70.1, 67,54, 64,0, 56,8, 29,7, 20,8 és 20,5 p.p.m. Tömegspektrum a tetra-TMS-származékra: 1035 (M+). Olvadáspont: 214-216 °C. 3a. referenciapélda 5-0-(3‘ ,4' ,6'-tri-O-acetil-2'-oxiimino-2'-dezoxi-a- L-glükopiranozil ) -N,N'-bisz- ( benziloxi-karbonil) - aktinamin előállítása (H reakcióvázlat) 7,09 g (21 millimól) 3,4,5-tri-0-acetil-2-nitrozó- 2-dezoxi-a-L-glükopiranozil-klorid (2) 150 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 14,22 g (30 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamint (1) adunk, majd az igy kapott reakcióelegyet 19 órán át keverjük. Ekkor a 2 piranozil-klorid már nem mutatható ki a reakcióelegyben. Az így kapott oldatot ezután 45 *C-on bepároljuk, majd a maradékot 1,5% metanolt tartalmazó kloroformban oldjuk. Az oldatot ezután fel visszük 3 kg nedves szili kagéllel töltött oszlopra, majd az említett oldószerrel eluálást végzünk. Miután mintegy 10 liter 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
