189550. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a humán szérum-prealbumin N-terminális részével analóg szerkezetű, az immunológiai ellenállóképességet növelő hatású deka-, undeka-, dodeka- és tridekapeptidek előállítására

1

189 550

2

fent leírt módon végezzük, 1 ekvivalens hidroxíbenzotriazolnak a reakcióeíegyhez való hozzáadásával. A kapcsolási reakciót 18 óra hosszat folytatjuk, majd ellenőrizzük a reakció teljes lefolyását. A szintézis további műveleteit a jelen példa A) szakaszában leírt módon végezzük.

2. példa

A fenti (I) általános képletnek megfelelő vegyületek előállíthatok az oldatban lefolytatott klasszikus peptid-szintézis szerint is. Vázlatosan az alábbi módon ábrázolható a szintézis menete :

(A) Boc-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-OMe

I I

(Bz) (Bz)

l

Boc-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-N3 ------------------I I

(Bz) (Bz)

Boc-D-Ala-Glu-Ser-------Lys--------Cys *“

I I I '

(Bz) (Cbz) (Bz)

(B) D-Ala-Glu-Ser— Lys Cys-----------1 f f

(Bz) (Cbz) (Bz)

4 1

Boc-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-D-Ala-Glu-Ser-------Lys--------Cys

II III

(Bz) (Bz) (Bz) (Cbz) (Bz)

V

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-D-Ala-GIu-Ser-Lys-Cysacetát, op.: 200 °C (boml.)

Az (A) és (B) vegyületet az egyes aminosavakból állítjuk elő lépésenként megvédés, kapcsolás és védőcsoport-eltávolítás útján, az E. Schroder és K. Lubke, The Peptides, 1. kötet, Acad. Press (New York), 1965 munkájában leírt módon. Azután az (A) és (B) vegyületet egymással kapcsoljuk a J. Honzel és munkatársai, Coll. Czech Chem. Conn., 26, 2333 (1971) által leírt acil-azid módszerrel, vagy DCC/HBT kapcsolási módszerrel vagy más szabad fragmens-kapcsolási módszerrel, majd az így kapott peptid védőcsoportjait hidrogenolízissel eltávolítjuk.

Hasonló módon kapcsolhatók a termék más fragmensei is egymással és ezt követő védőcsoporteltávolítással; így például egy 7 aminosavból álló N-terminális fragmenst egy 4 aminosavból álló C- terminális fragmenssel kapcsolhatunk a megfelelő 11-tagú peptid, például H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr- Gly-Glu-Ser-Lys-Ala-Pro—-OH undekapeptid előállítása céljából.

5. példa

Az 1. vagy 2. példában leírthoz hasonló módon állíthatók elő a fenti általános képleteknek megfelelő további peptidek is a találmány szerinti eljárással. így például az alábbi felsorolásban szereplő

peptideket állítottuk elő ilyen módon; megjegyezzük, hogy a felsorolásban szereplő peptidek tisztítása és kristályos alakban való izolálása acetát-só alakjában történt, ezért a megadott olvadáspontértékek a jól tisztítható, stabil acetát-sókra vonatkoznak. Az előállított peptidek optikai forgatóképességét ecetsavas oldatban mértük, ahol a peptidek iker-ionos jellegüknek megfelelően a szabad bázis és az acetát-só egyensúlyi elegyeként vannak jelen. Az egyes peptideknél megadott aminosavanalízisek mindenkor a szabad pepiidre vonatkoznak.

H-Gly-Pro-Thr-GIy-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys- Cys—OH

op.: 200 °C; [a]”= -41,3' (c = 0,9, ecetsav); aminosav-analízis : Thr + Ser 2,6 (3), Glu 1,1 (1), Pro 1,0(1), Cys + cisztin 1,0 (1), Gly 2,7 (3), Lys 1,1 (1).

H-Gly-Pro-Thr-D-Ala-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys- Ala—OH

op.: 205 °C (bomlik); [aj|f = - 51° (c= 1, ecetsav); aminosav-analízis : Thr + Ser 3,2 (3), Glu 1,0 (1), Pro 1,1 (1), Gly 2,0 (2), Alá 2,0 (2), Lys 1,1 (1).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-D-Ala-Glu-Ser-Lys- Ala—OH

op.: 225 'C (bomlik); [a]“= -49,5' (c= 1,0, esetsav); aminosav-analízis: Thr + Ser 2,6 (3), Glu 1,0 (1), Pro 1,0 (1), Gly 1,9 (92), Alá 1,9 (2), Lys 1,1 (!)•

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys-Cys- Prcr—OH

op.: 187 °C (bomlik); [a]"= -70,1° (c = 0,9, ecetsav);

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys-Cys(Me)

op.: 140 °C (bomlik); [u]p = -49,4°(c= 1, ecetsav); aminosav-analízis: Thr + Ser 2,5 (3), Glu 1,1 (1), Pro 1,5 (1), Gly 2,9 (3), Lys 1,0 (1), Cys(Me) 1,3 (1).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys- Ala—OH

op.: 184 °C; [a]p = -70,3° (c = 0,3 ecetsav); aminosav-analízis: Thr + Ser 2,5 (3), Gly 1,0 (1), Pro 1,0 (1), Gly 2,8 (3), Alá 1,1 (1), Lys 1,3 (1).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Gln-Ser-Lys- Ala—OH

op.: 187 'C (bomlik); [aß5= -50,1° (c = 0,9, ecetsav).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Gln-Ser-Lys-Ala-NH2

[a]o= -42,2° (p = 0,75, ecetsav).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys-Ala- Pro—OH

op. : 192 °C; [a]„ = -75,6° (c = 0,8, ecetsav).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys- Cys(Me)-Pro— OH

op.: 187 °C; [a]p= -70,9° (c = 0,9, ecetsav).

H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys- ABU-—OH

op.: 180 °C; [a]“ = -47,7° (c = 0,7, ecetsav). H-Gly-Pro-Thr-Gly-Thr-Gly-Glu-Ser-Lys(Me)Cys—OH

op.: 187 °C; [a]“= -42,4° (c= 1,0, ecetsav).

5

10

’•5

20

25

30

35

40

45

50

55

80

65

8