189548. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-4696 antibiotikum-komplex és egyes komponenseinek előállítására
1 189 548 2 Megfigyelt tulajdonság ISP 7. sz. táptalaj Bennett-f. agar Kalciummalát Czapek-f. agar Paradicsompépzabliszt Anio-Hensen-f. agar 53H táptalaj Czapek-f. pepton Kazein-bontás Kataláz-reakeió Eszkulin-bontás Zselatin-folyósítás H2S-termeiés ISP 6. sz. táptalajon Hipoxantin-bontás Lizozim-rezisztencia Jellemzők Jó növekedés, fonák 80.gy.yBr; nincs légmicélium; világosbarna oldható pigment Bőséges növekedés, fonák 93.yGray; nincs légmicélium; nincs oldható pigment Jó növekedés, fényes, fonák 93.yGray; nincs légmicélium; nincs oldható pigment Jó növekedés, fonák 93.yGray; nincs légmicélium ; nincs oldható pigment Jó növekedés, fonák 91.d.gy.Y; nincs légmicélium; nincs oldható pigment Jó növekedés, fonák 91.d.gy.Y; nincs légmicélium; nincs oldható pigment Jó növekedés, fonák 91.d.gy.Y ; nincs légmicélium; nincs oldható pigment Bőséges növekedés, fonák 90.gy.Y ; nincs légmicélium; nincs oldható pigment pozitív pozitív pozitív pozitív (100%) nyomokban negatív negatív Melanoid-pigment termelés a következő táptalajokon: negatív negatív negatív negatív ISP 1. sz. ISP 6. sz. ISP 7. sz. ISP 7. sz., tirozin nélkül NaCl-tolerancia ISP 2. sz. táptalajon Nitrát-redukció 2% alatt negatív A növekedés pH-tartománya ISP 2. sz. táptalajon 6-8,4 Foszfatáz-termelés pozitív Lefölözött tej reakció negatív Keményítő-hidrolízis 4. sz. ISP-táptalajon negatív Szacharóz-tolerancia 2. sz. ISP-táptalajon 20% A növekedés hőmérséklet-tartománya ISP 2. sz. táptalajon 5^40 °C Tirozin-bontás pozitív Ureáz-termelés negatív Antibiotikum-érzékenység : cefalotin (Na), 30 pg érzékeny eritromicin (esztolát), érzékeny 15 pg kloromicetin, 30 pg érzékeny novobiocin, 30 pg érzékeny 5 10 15 Megfigyelt tulajdonság G-penicillin, 10 egység érzékeny rifampin, 5 pg érzékeny streptomicin, 10 pg érzékeny tetraciklin, 30 pg érzékeny vankomicin-HCl, 30 pg érzékeny Xantin-termelés negatív Jellemzők Szénforrás-hasznosítás ISP 9+sz. táptalajon, a következő komponensekkel: szén nélkül — glukóz + + L-arabinóz + + cellobióz + + D-fruktóz + + D-galaktóz + + i-inozit — D-mannit + + 2Q melibióz + rafFinóz + D-ramnóz + D-ribóz -T szalicin + szacharóz + ö D-xilóz + + + A sterilizált szénforrásokat olyan mennyiségben adagoltuk, hogy a vég-koncentráció 1,0% legyen. A-4696 antibiotikum- A, B,, B2 és B3 komponens 30 termelés Mint az előzőkben megjegyeztük, az ATCC 31680, ATCC 31682 és ATCC 31683 Actinoplanes missouriensis törzs táptalajban tenyészthető az A-4696 antibiotikum előállítására, amelyet az A- 35 4696 antibiotikum komponensek elkülönítésére használhatunk fel a továbbiakban. A táptalajt számos különböző táptalaj közül választhatjuk meg. A termelés gazdaságossága, a maximális kitermelés és az antibiotikum elkülönítésének egyszerűsége 40 alapján azonban előnyben kell részesíteni bizonyos táptalajokat. így például a keményítő egyike a kitüntetett szénhidrát-forrásoknak, az élesztő pedig az egyik kitüntetett nitrogén-forrás. Más felhasználható szénhidrát-források: a melasz, glukóz, dextrin, glicerin és hasonlók. Nitrogén-forrásként alkalmazhatunk aminosav-keverékeket, peptonokat és hasonló anyagokat. A táptalajba tápanyagként beviendő szervetlen sók a szokásos sókkal azonosak, amelyek nátrium, kálium, ammonium, kalcium, foszfát, klorid, szul- 0 fát stb. ion leadására képesek. Ezenkívül adagolhatunk növekedési faktor forrásokat - például desztillációs maradékot és élesztőkivonatot -, amelyek kedvező hatást fejtenek ki az A-4696 antibiotikum komponensek előállítására. Mint más mikroorganizmusok növekedése és fejlődése esetében, a találmány szerinti eljárásban alkalmazott Actinoplanes törzsek növesztésére használt táptalajba be kell vinnünk a növekedéshez és fejlődéshez szükséges elengedhetetlen nyomeleme- 60 két. Ezek a nyomelemek rendszerint a táptalaj egyéb komponensei adagolásával együttjáró szenynyeződésként biztosíthatók. Az A-4696 antibiotikum abból a célból végzett tenyésztéséhez, hogy abból a továbbiakban a B,, 65 B2, B3, Cla, C3 és E, antibiotikum komponenseket 10
