189519. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2'''-O-demetil-makrocin-származékok előállítására
1 189 519 2 pH-ját 28%-os foszforsav-oldattal 4,1-re állítjuk be (a foszforsav-oldatot úgy állítjuk, elő, hogy 2 rész vizet és 1 rész koncentrált foszforsavat keverünk). Extrakciót követően elkülönítjük a vizes fázist. Az etil-acetátos extraktumot 3500 ml vízzel újra-extraháljuk. A két vizes extraktumot egyesítjük. Az egyesített, vizes extraktumok pH-ját nátriumhidroxrddal 8,5-re állítjuk be, és kétszer kloroformmal (3000 és 1200 ml) extraháljuk. Csökkentett nyomáson vízmentesítjük és desztilláljuk a kloroformos extraktumot, desztillációs maradékként 40 g nyers DOMM bázist kapunk. Ezt a bázist víz és aceton elegyéből kristályosítva tisztítjuk, ezután 30 g DOMM bázist kapunk. A DOMM fehér színű, szilárd halmazállapotú termék, amely aceton és víz elegyéből kristályosodik. A DOMM 135-140 °C hőmérsékleten lágyul, és 160 *C hőmérsékleten teljesen felolvad. A DOMM elemanalízise szerint a következő - közelítő - %-os összetételű: szén: 59,5%; hidrogén: 8%; nitrogén: 2%; oxigén: 30,5%. A DOMM tapasztalati képlete C44H73N017, molekulasúlya pedig 888 (a tömegspektrometriás mérés szerint : 887). A DOMM infravörös abszorpciós spektrumában (szabad bázist vizsgálunk, kloroformos oldatban) az alábbi és a mellékletben megadott elnyelési maximumokat találjuk (cm-1): 3679 (kicsi), 3604 (váll), 3486 (széles), 3012 (váll), 2979 (intenzív), 2938 (intenzív), 2880 (váll), 2821 (váll), 2794 (kicsi), 2735 (kicsi), 1723 (intenzív), 1678 (közepes), 1627 (kicsi), 1593 (intenzív), 1477 (váll), 1459 (közepes), 1409 (közepes), 1373 (közepes), 1333 (váll), 1316 (közepes), 1273 (kicsi), 1183 (váll), 1161 (intenzív), 1114 (közepes), 1080 (intenzív), 1048 (intenzív), 1013 (középes), 996 (közepes), 984 (váll), 960 (váll), 924 (kicsi), 902 (kicsi), 865 (kicsi) és 841 (kicsi). A DOMM semleges etanolos oldatban vizsgált ultraibolya abszorpciós spektrumában 283 nm hullámhosszon (epszilon 22,550) látszik elnyelési maximum. A DOMM szabad bázis alakjának specifikus forgatása: [a]“ : -39,69° (konc.: 1, metanol). A DOMM 66%-os, vizes dimetil-formamidban végzett elektrometrikus titrálása szerint a vegyület egy titrálható csoportot tartalmaz, ennek pKa-értéke: 7,14. 3. példa A DOML előállítása A 2. példában megadottak szerint előállított DOMM-t híg hidrogén-klorid-oldatban oldjuk (addig adunk vízhez hidrogén-kloridot, míg annak pH-ja 1,8 lesz). A kapott oldatot 8 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd pH-ját nátriumhidroxid-oldattal 9,0-ra állítjuk be. Ezt a bázikus oldatot etil-acetáttal, diklór-metánnal vagy kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot csökkentett nyomáson desztilláljuk, desztillációs maradékként DOML bázist kapunk. Ez a vegyület 115-120 °C hőmérsékleten lágyul, és 134-140 °C hőmérsékleten olvad. 4. példa A dihidro-DOMM előállítása A 2. példában megadottak szerint előállított DOMM 50 mg-ját vizes, izopropil-alkoholban (40%-os, 25 ml) oldjuk. 30%-os, vizes izopropilalkohol 10 ml-ében 20 mg nátrium-bór-hidridet oldunk. 1 ml ilyen nátrium-bór-hidrides oldatot adunk a DOMM-t tartalmazó oldathoz. 5 percen át keverjük a reakcióelegyet, pH-ját foszforsavval 7,5-re állítjuk be, majd csökkentett nyomáson desztilláljuk az izopropil-alkohol eltávolítására. A vizes sűrítményhez addig adunk vizet, míg térfogata 25 ml lesz. Ezután 50 ml kloroformot adagolunk. A vizes fázis pH-ját 7,5-re állítjuk be. Extrakciót követően elkülönítjük a kloroformot, csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk, desztillációs maradékként dihidro-DOMM-t kapunk. 5. példa A dihidro-DOML előállítása A 4. példában megadottak szerint előállított dihídro-DOMM-t a 3. példában megadottak szerint reagáltatjuk, ami után dihidro-DOML-t kapunk. 6. példa A DOML előállításának másik változata A DOMM-ből előállítjuk a DOML-t oly módon, hogy a DOMM-t a tenyészlében kezeljük, amelyben előállitottuk ; a kezelést a 3. példában megadottak szerint, enyhén savas körülmények között végezzük. A DOML izolálását a DOMM kapcsán a 2. példában megadottak szerint végezzük. 7. példa A dihidro-DOML előállításának következő változata A 3. példában megadottak szerint előállított DOML-t a 4. példában megadottak szerint redukáljuk, amiután dihidro-DOML-t kapunk. Szabadalmi igénypont Eljárás az (I) általános képletű makrolidok, ahol Q —CHO vagy —CH2OH csoport, és Y hidroxil- vagy mikarozil-oxi-csoport előállítására, azzal jellemezve, hogy Streptomyces fradiae ATCC 31 669 törzset vagy annak (I) általános képletű vegyületet termelő mutánsát vagy variánsát süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük, azzal a feltétellel, hogy olyan (I) általános képletü vegyület előállítására, ahol Y hidroxilcsoport, a tenyésztést enyhén savas körülmények között végezzük, majd a kapott ter5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
