189515. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 20-dihidro-20,23-didexi-tionolid (tilakton) és észterei előállítására

1

.189 515

2

3. példa

A 3,5-di-O-acetil-tilakton előállítása

A 2. példában megadottak szerint előállított tilakton 200 mg-ját 4 ml piridinben oldjuk. Az oldathoz 4 ml ecetsav-anhidridet adunk. 16 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet, majd csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk. 5 ml metanolt adunk a desztillációs maradékhoz, az oldatot 30 percen át 60 °C hőmérsékleten tartjuk, majd ezt követően csökkentett nyomáson desztilláljuk. Desztillációs maradékként 3,5-di-O- acetil-tilaktont kapunk. A vegyűlet Rf-értéke szilikagél vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatkor, a futtatást benzol és etil-acetát 4:1 arányú elegyével végezve: 0,59. A tilakton Rrértéke ebben a rendszerben 0,3.

4. példa

A tilozin előállítása a tilak tanból

Az 1. példa A) pontjában megadottak szerint eljárva, de a tenyésztést 28 °C-on végezve, fermentáljuk azt a Streptomyces fradiae törzset, amely előzőleg tilozint termelt, de a makrolid gyűrű zárásában gátoltuk. Az oltást követő 48. órában tilaktont adagolunk. Ezután addig folytatjuk a tenyésztést, míg jelentős mennyiségű tilozin halmozódik fel a tenyészetben, azaz további 3 napon át. A tilozin jelenlétét oly módon bizonyítjuk, hogy a mintákat 5 tilozinra érzékeny mikroorganizmusokkal szemben mérjük. Egy ilyen, használható mérőorganizmus a Staphylococcus aureus ATCC 9144. A biológiai érték-mérést automatizált turbidometrikus módszerrel, vékonyréteg-kromatográfiával vagy ultra- 10 ibolya-detektálással kapcsolt, nagyfelbontású folyadék-kromatográfiával végezzük.

Szabadalmi igénypont 15

Eljárás az (I) képletű 20-dihidro-20.23-dideoxitilonolid (tilakton) és 3,5-di-0-(l-4 szénatomos)alkanoil-származékainak előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces fradiae NRRL 12 188 20 törzset vagy ennek tilaklont termelő mutánsát felhasználható szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon tenyésztjük, süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között, majd a tilaktont elválasztjuk a fermentlé- 25 bői, és kívánt esetben valamely 1-4 szénatomos alkánsavval észterezzük.

2 oldal rajz

5