189394. lajstromszámú szabadalom • Eljárás megtermékenyítésre alkalmas ivartermékek előállítására ivarérett halakból
1 2 A találmány tárgya eljárás megtermékenyítésre alkalmas ivartermékek előállítására ivarérett halakból, a hal természetes ívási időpontjától független időpontban, álról az iVBiérett hal pillanatnyi biológiai érettségét az ívartermék (spermium vagy ikra) vizsgálata alapján megállapítjuk, az ovulációra nem érett halakat elkülönítjük az olvulációra érett halaktól, a haladba hormon hatású vegyilletet juttatunk, majd az ovuláció lezajlása után az iverterméket a halból vagy annak környezetéből kinyerjük. Ismeretes, hogy a halakban a szexuális aktivitást mindkét ivar esetében az adenohipofizls által kiválasztott gonadtrop hormonok szabályozzák. Ezek a hormonok biztosítják a nemi mirigyek (gonádok) morfológiai és funkcionális fejlődését, ill. érettségét, azok gametogenetikus (ovum-, ill. spermiumterinelő) tevékenységét és a nemi hormonok szekrécióját. Az adenohipofizis mindkét nemben ugyanazt a két gonadotrop hormon választja ki, ezek közül az egyiket FSH-nak (follikuluszt stimuláló hormon), a másikat. LH-nak (luteinizáló hormon) ül - a hím egyedekben gyakorolat hatása alapján 1CS11-nak (intersticiális cellulákat stimuláló hormon) nevezzük. Az is ismerete, hogy egyik gonadotrop hormon sem ivar-specifikus, mert ugyanaz az FSH fejti ki a gametogenetikus aktivitást a hím és a nőstény egycdekben, és ugyanaz az LU, ill. ICSH serkenti a hím egyedekben az androgén szekréciót és a nőstény egyedekben az ösztron-, ill. progeszteron-szekréciót. Mind az FSH, mind az LH glikoproteid, amely halakban nagymértékű fajspecifivitást mutat. Az agyalapi mirigy a halakban koordinálja az endokrin rendszer működését, de ezenkívül az endokrin rendszer és az idegrendszer között is végez bizonyos összehangoló működést, elsősorban a közti agy hipotalamusz részének vegetatív magjain keresztül. Emellett az agyalapi mirigy a szapoiodási folyamatot is szabályozza a fajspecifikus trophormonok segítségével. A halak ovulációja természetes körülmények között a fajra jellemző ívási környezetben zajlik le. Az ovulációra érett ikra nem ovulál spontán módon, hanem hosszabb-rövidebb ideig kényszernyugalmi helyzetben várja az ovulációra alkalmas környezet kialakulását. Ezt a halakra jellemző szaporodási-biológiai alkalmazkodást a hipofízis és a központi idegrendszer együttesen szabályozza. Nyugalmi állapotban a hal szervezete alacsony gonadotrop aktivitás mellett kerül egyensúlyba, nagyon kevés gonadotrop hormon ürül a vérbe (Gerbilszkij N., Szovremence nosztojánie voprosza o nyejrogormonalnüj reguljacii polovo ciki u rüb i biotyeknika gomionalnük vozgyesztvij v rübovodsztve. Leningrád, 1966, Gosz. Univ. 8. oldal). A halak ívási környezete nem pontosan meghatározható módon és időben alakul ki, hanem egy bizonyos időszakon belül többé-kevésbé véletlenszerben (pl. késő tavasszal vagy nyár elején). Ez annyit jelent, hogy a halak reproduktív szabályozási mechanizmusa lehetővé teszi a szaporodási folyamat alkalmazkodását a külső környezetben. Ezt a szabályozást a halakban a hipotalamusz hipofízis rendszer koordináltan végzi. Az uióbbi évek vizsgálatai tisztázták, hogy az adenolüpofi/is egyes trophormonjainak kiáramlását neuroliormonok szabályozzák. A neurohormonok a hipotaiamusz egyes magvaihoz futó idegvégződéseken szabadulnak fel, azonnal felszívódnak úgynevezett portális kapillásokba, és a vérrel közvetlenül az adenohipofizis szinuszaiba kerülnek. Valamennyi eddig ismert neurohormon Oligopeptid vagy polipeptid. A trophormon-szekréciót serkentő neurohormonokat realising factor-nak (RF), a hormon-szekréciót gátló neurohormonokat pedig inhibiting factor-nak (IF) nevezik. Az újabb nomenklatura a már tisztázott szerkezetű és funkciójú neurohormonokra a releasing hormon (RH), ill. release inhibiting hormon (RIH)jelölést használja. Valamennyi neurohormonra jellemző, hogy hipofizektomizált állatokban hatásuk megfelel az adott trophormon bevitele után mutatkozó hatásnak. A halad agyalapi mirigyének bazofd felületei szezonális különbségeket mutatnak, mennyiségük az Svás időszakában csökken. A környezethez történő alkalmazkodási folyamatban releasing hormonok (RH) termelődnek, amelyek a véráram útján a hipofízisba jutnak, és ott szabályozzák a trophormonok vérbe ürülését. A halak ilyen úton kapnak információt a szaporodásra legalkalmasabb ún. ívási környezet meglétéről, aminek hatására a hipotalamuszban a luteinizáló hormont szabályozó hormon (LH/RH) aktivizálja a hipofizistés a ganodotrop hormonok vérbe ürülését, ennek következtében megindul az ovulációs folyamata (Breton B. és Weil CL, C.R. Acad. Se. Párizs 277,2061-2064 (1973). A halak ívóhelye által kiváltott, érzékszervi közvetítést! idegi impulzusok így tevődnek át a belső elválasztási! mirigy-rendszer szintjére, és ilyen mechanizmus akuválja a korábban kényszer-nyugalmi állapotban levő reproduktív rendszert az utódok számára legkedvezőbb túlélést biztosító külső környezet észlelésekor (Gerbilszkij, loc. cit.) A neurohormonok nagymértékben interspecifikusak. A halak LH/RH-jának szekvenciája nem azonos az emlősök LH/RH-jával, és azok egymásban kölcsönösen hatástalanok. A halad indukált mesterséges szaporítására a hipofizálás módszerének felfedezése (Gerbilszkij,loc.cit.) és világszerte általánossá válása óta van lehetőség. A hormonális ovuláció-kiváltásra általában ivarérett vagy közel ivaréreü pontyból gyűjtött és megfelelő módon tartósított hipofíziseket használnak. Az eddig kipróbált más származású természetes vagy szintetikus hormonok nem adtak egyértelműen pozitív eredményt. A pontynak mint széles körben tenyésztett fajnak világszerte jelentős állományai élnek, amelyekből könnyűszerrel lehet üzemi célokra alkalmas mennyiségben agyalapi mirigyet gyűjteni. A ponty hipofízise sikeresen alkalmazható számos tenyésztett halfaj szaporításában. Kivételt képeznek a rendszertanilag távoleső halak (például a tokfélék), ahol a fajazonos hipofízisekből készített hormon szuszpenziót használnak. A hipofízis gyűjtése és preparálása a különböző halfajoknál azonos módon történik. A gyűjtés során törekedni kell arra, hogy minél idősebb, lehetőleg ivarérett halakból származzon a mirigy. Erre a legritkább esetben van csak lehetőség. A Hipofízis dozirozása súly szerint történik, és minthogy a kisebb halak hipofízise arányosan kisebb, ezért a fiatalabb halakból származó hipofízisekből lényegesen több szükséges. Az Ismert módszer szerint a hipofízist acetonnal 189.394 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ' 60 2
