189303. lajstromszámú szabadalom • Irányított áramterű poliakrilamid gélelektroforetikus készülék
1 189.303 2 A találmány értelmében a fenti felismerés alapján kitűzött célunkat olyan poliakrilamid gélelektroforelikus készülékkel érjük el, amelynek henger alakú alsó, ill. felső pufferlartályaiban alsó, ill. felső elektródák vannak elrendezve, és a puffertartályokba géltartó edények torkollnak. Mindegyik puffertartályban a tartály szimmetriatengelyével azonos tengelyű elektródatartó henger helyezkedik el, és mindegyik elektródatartó hengerben egy-egy központosított elektróda-cséveorsó van. Az elektródák platinahuzalból tekercselt spirálok, amelyek elektróda-cséveorsókon kialakított bemélyedésekben vannak rögzítve. Mindegyik elektródatartó henger palástján az elektródákhoz legközelebb eső szakaszon lyukak vannak, amelyek a géltartó edények irányába néznek, és amelyeken át a pufferoldat az elektródákhoz folyhat, és az elektródák a pufferoldat szintjétől függetlenül mindig azonos szintig merülnek az oldatba. A géltartó edényeket célszerű a felső puffertartály aiapkorongjába tömítve rögzíteni, hogy azok a korong szimmetriatengelyétől azonos távolságra legyenek, és azonos legyen egymástól való távolságuk is. A tömítés szilikongumiból kialakított tömítőgyűrűkkel biztosítható. Hogy a készülék az érintésvédelmi szigorú előírásoknak is maradéktalanul megfeleljen, célszerű, ha az elektródák árambevezető csatlakozóit úgy alakítjuk ki, hogy a fedőkorong zárásával, ill. nyitásával együtt az áramellátás is biztosítható, ill. megszüntethető legyen. Ez pedig úgy érhető el, hogy a felső elektródát olyan banándugóval kötjük össze elektromosan, amely a felső elektródatartó henger felső zárólapjához van rögzítve, az alsó elektródát pedig az alsó puffertartály külső falához rögzített banándugóval kötjük össze elektromosan, amikor is a felső banándugó banánhüvelye közvetlenül, az alsó banándugó banánhüvelye pedig banánhüvelytartó száron át közvetve a felső puffertartály fedőkorongjához van rögzítve. A találmányt részletesebben rajz alapján ismertetjük. A rajz a találmányunk szerinti poliakrilamid gélelektroforetikus készülék egy lehetséges példakénti kiviteli alakját mutatja, részben metszetben. Amint a rajzon látható, a készülék két kör keresztmetszetű, vertikális elrendezésű puffertartályból áll, melyek a felső puffertartály 13 alapkorongjába maratott vájatokkal illeszkednek egymáshoz. A felső puffertartály a 13 alapkorongból és az 5 tartálypalástból, az alsó puffertartály pedig a 15 alapkorongból és a 7 tartálypalástból áll. A 13 és 15 alapkorongok központjába 20 és 25 elektródacséveorsók vannak rögzítve, amelyeket a középponttól kb. egy cm-re lévő kör alakú bemarásokba rögzített 12 és 14 elektródatartó hengerek vesznek körül. A 20, ill. 25 elektróda-cséveorsókon kialakított bemarásokban platinahuzalból spirál alakúra tekercselt 17, ill. 22 elektródák vannak rögzítve. A 17 elektróda a 12 elektródatartó henger felső zárólapjához rögzített 16 banándugóval, a 22 elektróda pedig 23 elektródavezetékkel a 15 alapkoronghoz a puffertéren kívül rögzített 9 banándugóval elektromosan össze van kötve. A 23 elektródavezeték részére a 15 alapkorong 11 furattal van ellátva. A 13 alapkorongban kb. öt cm-es sugárral egymástól egyenlő távolságra átfúrások vannak, amelyekben szilikongumi-gyűrüből kialakított 6 tömítésekkel 8 géltartó edények vannak rögzítve. A 8 géltartó edények mindkét végükön nyitott üvegcsövek, amelyekben a gél helyezkedik el. A 12, ill. 14 elektródatartó hengerek palástján a 17, ill. 22 elektródák környezetében 21, ill. 26 lyukak vannak, amelyek a 8 géltartó edények felé néznek. A felső puffertartályt 1 fedélfogantyúval ellátott 3 fedőkorong zárja le, amelynek széléhez függőlegesen 4 banánhüvelytartó szár van rögzítve. A 4 banánhüvelytartó szár alsó vége a 9 banándugót befogadó 10 banánhüvellyel van ellátva, mely 24 áramellátó vezetékkel külső áramgenerátorra csatlakozik. A 16 banándugót befogadó 2 banánhüvely a 3 fedökorong szimmetriatengelyében van elhelyezve, és 19 áramellátó vezetékkel csatlakozik a külső áramgenerátorhoz. A találmány szerinti készüléket úgy működtetjük, hogy először a géltartó edényekben elkészítjük’ a poliakrilamid géleket, ezeket a 6 tömítéssel a 13 alapkorong furataiban rögzítjük, majd az alsó puffertartályba 200 ml pufferoldatot öntünk. Ezután a felső puffertartályt az alsóra helyezzük, majd abba is öntünk 150 ml pufferoldatot. A következő lépésben a 3 fedőkorongot úgy helyezzük a felső puffertartályra, hogy a 16 banándugó a 2 banánhüvelybe, a 9 banándugó pedig a 10 banánhüvelybe illeszkedjék, majd a 19 és 24 áramellátó vezetéket stabilizált áramgenerátorra kapcsoljuk. A szétválasztás során a 17 elektródából a 21 lyukon át áramot vezető pufferoldat közvetítésével mintegy fókuszált áram jut a poliakrilamid-gélbe, ahonnan az alsó tartály pufferoldatának közvetítésével jut az áram tovább az ugyancsak rácshatást kifejtő 26 lyukat érintve a 22 elektródára. A kísérlettel megállapítható, hogy készülékünk kb. egy milliméteres zónák szétválasztására is képes. A zónák határa éles, elmosódástól mentes, így készülékünk minden eddig ismert megoldáshoz képest megbízhatóbb eredményt ad. Készülékünk alkalmazása azt a nem várt, meglepő előnyt is biztosítja, hogy egy-egy gélelektroforetikus analízis pufferigénye legalább egy nagyságrenddel alacsonyabb, mint egyéb, kereskedelmi forgalomban lévő ismert készülékeké. Készülékünkkel a reprodukálható eredmények úgy érhetők el, hogy a felső 3 fedökorong zárásával feszültség alatti részhez érni nem lehet, így az áramütés veszélye teljes biztonsággal ki van zárva. Szabadalmi igénypontok 1. Irányított áramterű poliakrilamid gélelektroforetikus készülék, henger alakú alsó, ill. felső puf-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
