189185. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új izopropil -amino-pirimidin származékok előállítására

1

189 185

2

ugyancsak intraperitonealisan 300 mg/kg referencia vegyületet, míg a harmadik csoport állataiba 100 mg/kg találmány szerinti eljárással előállított vegyületet juttattunk.

Az ideg-regenerálódás előrehaladását a követke- 5 ző napokon az ideg elektromos ingerlésével ellenőriztük. Az újrabeidegződés a második és harmadik csoportnál 16, a kontroll csoportnál 18 nap alatt következik be. A 18. napon a gyógyulást a bal belső ikraizom jobb oldali párjával történő össze- 10 hasonlításával értékeltük, a vizsgálatot az idegrost- . mozgató véglemezkék potenciáljának intracelluláris regisztrálásával végeztük.

A 18. napon leölt állatok kezelt ülőidegét vizsgálva a találmány szerinti eljárással előállított vegyü- 15 lettel kezelt állatok esetében 37%, a referencia vegyülettel kezelt állatok esetében 30%, a kontroll ; állatoknál 16% többszörös beidegzettséget észleltünk. Megjegyzendő, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyülettel kezelt állatoknál a 20 beidegzés szabályosabb, idegrost-mozgató véglemezkénként 2-3 axon, mint a referencia vegyülettel kezeiteknél, melyeknél csak 1-2 axon.

25

3. Farmakológiai példa Analgetikus aktivitás vizsgálata

Az analgetikus hatást rhesus majom fogbelének 30 ingerlése révén vizsgáltuk, összehasonlításul 30 és 60 mg/kg glafenint, és 30, 60 és 120 mg/kg 2-(izopropil-aminoj-pirimidint (IAPP) használtunk, a találmány szerinti eljárással előállított vegyületet , (BN 1041) 30, 60 és 120 mg/kg adagolásban alkal- 35 máztuk - valamennyit szájon át. Az analgetikus hatást felnőtt nőstény Macaca mulatta fajú rhesus majom fogbelének ingerlése által kiváltott fájdalom gátlása révén mértük.

A majmokat hozzászoktattuk ahhoz, hogy 40 egyenként egy lefogásukra alkalmas székben üljenek. A vizsgálat napján, az analgetikus hatású szer

adagolása előtt, az elektróda vezetékét Grass stimulátorhoz kapcsoltuk, és minden állat fájdalomküszöbét meghatároztuk a fogbélre ható szakaszos, de egyre növekvő nagyságú ingerlés alkalmazásával. Az ingerlés frekvenciája, a hullámszélesség és az ingerlés időtartama minden alkalommal állandó, 10 Hz, 5 ms illetve 10 s értékű volt, csak a feszültséget változtattuk. Fájdalomküszöbként azt a feszültségértéket tekintettük, melynél az állat egyéni reakciót mutatott, például ásított és nyalogatta a fogát. Ezután az állatoknak szájon át beadtuk az analgetikus hatású vegyületet, és az adagolást követően 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 240 és 300 perc múlva a feszültségküszöb értékét alkalmaztuk, feljegyeztük, hogy adnak-e az állatok egyéni reakciót vagy sem.

\z egyes vizsgálatok között legalább 7 nap szünetet tartottunk.

A vizsgálandó vegyületeket minden esetben szájon át szondán adagoltuk, 0,5%-os vizes karboximetil-cellulóz-oldat formájában 4 ml/kg mennyiségben. A kontroll állatok csak a hordozóanyagot kapták 4 ml/kg mennyiségben. A különböző szájon át adagolt vizsgálandó vegyületek fogbél elektromos inger által kiváltott fájdalmának csökkentésében való hatását, azaz az analgetikus hatást, a 2. táblázatban foglaljuk össze. A 2. táblázat eredményeiből származó közelítő EDS0 értékeket a 3. táblázatban adjuk meg.

A vizsgálat során mindhárom vizsgált vegyület aktívnak bizonyult. A 2. táblázat adatai mutatják, hogy a glafenio aktivitásának maximumát az adagolást követő 30. percben éri el, és még az adagolást követő 150. percben is van aktivitása. Az 1APP aktivitásának maximumát az adagolást követő 90. pereljen éri el, és az adagolást követő 300. percben is van némi aktivitása. Mind a glafeninnél, mind az IAPP-nél aktívabbnak bizonyult a BN 1041, mely vegyület aktivitásának maximumát az adagolást követő 120. percben éri el, és még a 300. percben is var aktivitása. A maximális aktivitás idején mért ED50 érték körülbelül 30 mg/kg.

2. Táblázat

Kezelés

Dózis (mg/kg) p. o.

Az adagolást követően az adott idő (perc) alatt analgetikus hatást jelző majmok száma

15

30

60

90

120

150

180

240

300

Hordozóanyag-0/4

0/4

0/4

0/4

0/4

0/4

0/4

0/4

0/4

Olafenin

30

0/4

1/4

0/4

1/4

1/4

1/4

1/4

1/4

1/4

60

1/4

2/4

2/4

2/4

2/4

1/4

0/4

0/4

0/4

30

0/4

0/4

0/4

1/4

0/4

1/4

0/4

0/4

0/4

IAPP

60

0/4

0/4

1/4

1/4

1/4

1/4

1/4- 1/4

1/4

120

1/4

1/4

1/4

2/4

2/4

2/4

2/4

1/4

1/4

30

1/4

1/4

1/4

1/4 -2/4

2/4

1/4'

1/4

1/4

BN 1041

60

1/4

2/4

2/4'

2/4

3/4

3/4

3/4

3/4

2/4

120

0/4

2/4

2/4

4/4

4/4

4/4

3/4

2/4

1/4

3. Táblázat-Kezelés

Megközelítő EDS0

érték (mg/kg) az adagolást követő adott időben (perc)

15

30

60

90

120

150

180

240

300

Glafenin

> 60-60-60-60-60-60

> 60

> 60

> 60

IAPP

> 120

> 120

> 120-120-120-120-120

> 120

> 120

BN 1041

> 120-85-85

53-30-30

42-42

?

3