189174. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 8-fluor-5(fluor-fenil)-2-([4'-hidroxi- 4'-(p-fluor-fenil)-butil]-2,3,4,4a,5,9b-hexahidro- 1H-pirido[4,3-b-]-indol-származékok előállítására
1 2 189 174 homogenizátum és 0,10 ml a sugárzó izotóppal jelzett anyag oldatából (a jelzett anyag: ^-spiroperidol, New England Nuclear, 23,6 Ci(millimól), és a végső inkubációs elegy koncentrációját 0,5 manomólosra állítjuk be (általában 2,5 pl törzsoldatot 17 ml kétszer desztillált vízzel hígítunk). 3-3, az inkubációs közeget tartalmazó kémcsövet 10-10 percig 37 °C hőmérsékleten inkubálunk, majd az egyes csövek tartalmából 0,9 ml-t Whatman GF/B szűrőn, erősen csökkentett nyomást létrehozó szivattyú alkalmazásával leszűrünk. A szűrőket szcintillációs mérőedényekbe helyezzük, hozzáadunk 10 ml folyadék-szcintillátort és a mérőedényeket körülbelül 5 másodpercig erőteljesen forgatjuk. A mintákat éjszakán át állni hagyjuk, majd 1,0 percen át mérjük a radioaktivitásukat. A kötődés mértékét az 1 mg fehérje által megkötött 3H-spiroperidol fentamólokban (10"15 mól) mért mennyiségével jellemezzük. Hasonlóképpen 3-3 csővel végezzük el a kontroll vizsgálatot (vivőanyag vagy 7-butaclamol, 10"7 mól; 4,4 mg-ot feloldunk 20 pl ecetsavban, majd 2,0 ml kétszer desztillált vízzel hígítva 10"4 mólos törzsoldatot készítünk, amelyet hűtőszekrényben tárolunk, a vakpróbát (íf-butaclamol, 10 7 mól; a 10."4 mólos törzsoldat készítéséhez 2 ml-re 4,4 mg-ot használunk, és ugyanígy járunk el, mint az 7-butaclamol esetében), és az inhibitor-oldat vizsgálatánál. A vizsgált vegyületeknek a kötődése 50%-ban gátló koncentrációját (IC50) fél-logaritmikus papíron felvett koncentráció-gátlás görbékről olvassuk le. A vízben oldhatatlan vegyületeket 50%-os vizes etanolban oldjuk, és 1%-os oldatukat inkubáljuk. A /ranjz-8-fluor-5-(p-fluor-fenil)-2-[4’-hidroxi-4’-(p-fluor-fenil)-butil]-2,3,4,4a,5,9b-hexahidrolH-pirido[4,3-b]indol-hidroklorid különféle izomerjeire nyert eredményeket az 5. táblázat tartalmazza: 5. táblázat Vegyület A 3H-spiroperidol kötődésének gátlása, IC50 (millimól/liter) Diasztereomer-elegy (aß + yö) 21 aß-diasztereomer 23 jobbra forgató a-enantiomer 22 balra forgató ß-enantiomer 1800 yö-diasztereomer 23 jobbra forgató y-enantiomer 25 balra forgató ö-enantiomer 350 5. példa Tabletták készítése A tabletták alapanyagát a következő anyagok összekeverése útján állítjuk elő: 8 Szaccharóz 80,3 g Tápiókakeményítő 13,2 g Magnézium-sztearát 6,5 g Ehhez a tabletta alapanyaghoz a //wf.vr-S-fluor-5-(p-fluor-fenil)-2-[4’-hidroxi-4’-(p-fluor-fenil)butil]-2,3,4,4a,5,9b-hexahidro-1 H-pirido[4,3- bjindol-hidroklorid y-enantiomerjének olyan mennyiségét keverjük, hogy a tabletták, 1,0; 2,5; 5,0, illetve 10 mg hatóanyagot tartalmazzanak. A tabletták anyagát azután a szokásos módon 360 mg egyedi súlyú tablettákká préseljük. 6. példa Kapszulák készítése A kapszulákba töltött anyagot a következő anyagok összekeverése útján állítjuk elő: Kalcium-karbonát (U. S. gyógyszerkönyv szerint) 17,6 g Dikalcium-foszfát 18,8 g Magnézium-triszilikát (U. S. gyógyszerkönyv szerint) 5,2 g Tejcukor (U. S. gyógyszerkönyv szerint) 5,2 g Burgonyakeményítő 5,2 g Magnézium-sztearát 0,8 g Ehhez a keverékhez hozzáadunk további 0,35 g magnézium-sztearátot, és annyi /r«//.vr-5-fenil-2- (4’-hidroxi-4’-fenil-butil)-2,3,4,4a,5,9b-hexahidrolH-pirido[4,3-b]indol-hidrokloridot, hogy az egyes kapszulák 1,0; 2,6; 5,0, illetve 10 mg hatóanyagot tartalmazzanak. Ezután a keveréket a szokásos keményzselatin kapszulákba töltjük, egy-egy kapszula 350 mg keveréket tartalmaz. 7. példa Szuszpenziók k észítése A í7/-?ra«.vr-8-fluor-5-(p-fluor-fenil)-2-[4'-hidroxi-4'-(metoxi-fenil)-butil]-2,3,4,4a,5,9b-hexahidrolH-pirido[4,3-b]indol-acetát alábbi összetételű szuszpenzióját készítjük el: Hatóanyag 25,00 g 70%-os vizes szorbitoldat 741,29 g Glicerin (U. S. gyógyszerkönyv szerint) 185,35 g 10%-os gumiarábikumoldat 100,00 g Polivinil-pirrolidon 0,50 g Desztillált víz ad I liter A szuszpenzió ízének javítására különféle édesítő- és ízesítőszereket adunk hozzá. A szuszpenzió milliliterenként körülbelül 25 mg hatóanyagot tartalmaz. 8. példa Szezámolajat 2 órán át 120°C-on sterilizálunk. Ehhez az olajhoz hozzáadjuk a /rí/mz-8-fluor-5-(pfluor-fenil)-2-[4’-hidroxi-4’-(p-fluor-fenil)-butil]- 2,3,4,4a,5,9b-hexahidro-1 H-pirido[4,3-b]indol-hidroklorid elporított jobbra forgató a-enantiomerjének olyan mennyiségét, hogy 0,025 súly%-os szuszpenziót kapjuk. A szilárd hatóanyagot kolloid malom segítségével diszpergáljuk az olajban, utána a szuszpenziót 100-250 mesh lyukméretű szitán át-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
