188684. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A/16686 jelű antibiotikum A2 komponenesének valanint a vele egyszerre keletkező A1 és A2 komponensek előállítására
1 188 684 \ /. Táblázat (folytatás) 7. számú táptalaj (tirozin-agar) Zabliszt'-agar (Waksman szerint) gyenge növekedés, sima felület, barna szín, 6 D 11 bőséges növekedés, ráncos felü- 5 let, narancs színtől barna színig, 12C 10 Hickey és Tresner-agar bőséges növekedés, kérges felület Cza pek-glükóz-agar Glükóz-aszparagin-agar Táp-agar Burgonya-agar narancs szín, 11 G 8 közepes növekedés, kérges felület, narancs szín 11 G 8 gyenge növekedés, kérges felület, világos narancs szín, 11 F 6 közepes növekedés,, sima felület, narancs szín, 11 G 8 bőséges növekedés, ráncos felület, borostyán-barna szín, 12 E 10 10 15 Bennett-agar Kalcium-maláta-agar Sovány-tejes-agar Czapek-agar Tojás-agar bőséges növekedés, ráncos felület, narancs szín 11 G 8 20 közepes növekedés, sima felület, világos narancs szín, 10 C 6 bőséges növekedés, ráncos felület, narancs szín, 9 L 2 közepes növekedés, kérges felü- 25 let, narancs szín, 10 D 7 közepes növekedés, sima felület, átlátszótól világos narancsig változó szin Pepton-glükóz-agar Agár Loeffler-szérum Burgonya Zselatin Cellulóz bőséges növekedés, ráncos felii- 30 let, narancs szín, 11 G 11 nagyon gyenge növekedés, sima felület, átlátszó nagyon gyenge növekedés, sima felület, narancs szín 35 gyenge növekedés, kérges, világosbarna szín gyenge növekedés, világosnarancs szín nagyon gyenge növekedés, 40 vékony, átlátszó A számok és a betűk megfelelnek a Maerz és Paul: A szín szótára (McGraw Hill Inc,, New York, 1950) kiadványnak.. Szénhidrát-hasznosítás A II. táblázat a szénforrások hasznosításának vizsgálatát mutatja be Pridham és Gottlieb módszere szerint [J. Bact. 56, 107 (1948)] II. Táblázat 50 Szénforrás Hasznosítás Inozit _ Fruktóz + Ramnóz-b Mannit — Xilóz + Raffinóz _ Arabinóz + Cellulóz _ Szacharóz + Glükóz + Mannóz + 55 60 65 II. Táblázat folytatás) Laktóz — Szalicin + 2 + - pozitív hasznosítás. — ~ nincs növekedés. Fiziológiai jellemzők A III. táblázatban a törzs fiziológiai jellemzői találhatók. III. Táblázat Vizsgálat Keményítő hidrolízise H2 S képzés Tirozin reakció ká téin hidrolízis kalcium-malát oldása Zselatin-elfolyósítás koagulálás lakmusz-tej peptonizálás Cellulóz-lebontás Eredmények pozitív pozitív negatív pozitív negatív pozitív pozitív negatív negatív Mint más mikroorganizmusok esetében, az A/16686 A2 komponenst termelő .Actinoplanes spec. ATCC 33076 számú törzs jellemzői változók. Például az ATCC 33076 törzs mesterséges variánsait és mutánsait különböző ismert mutagén anyagokkal történő kezelés után nyerhetjük, mint például ultraibolya sugárzás, röntgensugárzás, mikrohullámok, radioaktív sugarak és kémiai mutagénck. A természetes és mesterséges variánsokat és mutánsokat, melyek ehhez az Actinoplanes fajhoz tartoznak, valamint az A/16686 antibiotikum A2 komponensét termelik, a találmány szerinti eljárás során használhatjuk. Az A/16686 jelű antibiotikumok előállítására az ATCC 33076 számú Actinoplanes fajhoz tartozó törzset tenyésztjük levegőztetett körülmények között, emészthető szénforrást, emészthető nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó vizes táptalajban. Az említett tenyésztő táptalaj a fermentációs szakmában használt táptalajok közül bármelyik lehet; azonban bizonyos táptalajok előnyösebben használhatók. így például az előnyösen használható szénforrások a glükóz, fruktóz, mannóz, szacharóz, és hasonlóak, különböző tisztasági fokú minőségben. Az előnyösen használható nitrogénfoi rások a szójaliszt, pepton, húskivonat, élesztőkivonat, tripton, aminosavak cs hasonlók. A táptalajba bevihető szervetlen sók közé tartoznak a szokásos, vízben oldódó sók, melyekből nátrium, kálium, vas, cink, kobalt, magnézium, kalcium, ammonium, klorid, karbonát, szulfát, nitrát és hasonló ionok keletkeznek. Az antibiotikum-termelő törzset rendszerint rázott lombikban előíenyészíik, majd az A/16686 antibiotikumok tekintélyes mennyiségének előállítására ezt a tenyészetet használják, hogy üvegfermentort oltsanak velük. Az előtenyésztéshez. használt táptalaj ugyanaz lehet, mint a nagyobb fermentációkhoz használt táptalaj, de más táptalaj is használható. Az. A/16686-termelő törzs nőhet 20 °C és körülbelül 37 °C között, és előnyösen 28 -30 °C hőmérsékleten. A fermentáció során az antibiotikum-termelést fermentléből, vagy a micélium-cxtraktokból vett minták antibiotikus aktivitásának vizsgálatával lehet követni. 3