188586. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új cefem-származékok előállítására
1 188 586 2 [ 1 ] Vizsgálandó vegyidet: 7 - [2 - Karboxi - nietoxi - imino - 2 - (4 - tiazolil) - acetamido]-3-cefem-4-karbonsav (a továbbiakban A vegyület. [2] Próba: (A) Legkisebb gátló koncentrációk 1. Vizsgálati módszer Az in vitro baktériumellenes aktivitást agarlcmezcn végzett felező lűgítási módszerrel határozzuk meg az alábbiak szerint. Minden vizsgálandó baktériumtörzset éjszakán át triptikáz-szója táptalajon tenyésztünk (108 élő sejt per ml) és a tenyészetből egy kacsnyit a vizsgálandó vegyület csökkenő koncentrációit tartalmazó, szívfőzetből készült agar táptalaj („Heart infusion agar”, HI-agar) felületén elszélesztünk. A legkisebb gátló koncentrációkat (MIC) 37 °C-on történő 20 órai inkubálás után határozzuk meg és Aig/inl formájában fejezzük ki. 2. Vizsgálati eredmények MIC (/ig per ml) Vizsgált törzsek Vegyület A vegyület Klebsiella pneumoniae 7 0,05 Proteus mirabilis 18 0,05 (B) Vizelettel való kiválasztás 1. Vizsgálati módszer 100 mg/kg vizsgálandó antibiotikum orális alkalmazása után 0-6 óra és 6-24 óra múlva patkányok vizeletét vizeletgyűjtő berendezés segítségével összegyűjtjük. A vizeletminták antibiotikum-szintjét biológiai értékmérés útján határozzuk meg M/15 foszfátpufferrel (pH = = 7,0) készült standard oldatot használva és megállapítjuk a vizelettel 24 óra alatt kiválasztott mennyiséget. 2. Vizsgálati eredmény Visszanyerés a vizeiéiben 24 óra alatt (%) A vegyület 43,5 (C) Epével való kiválasztás 1. Vizsgálati módszer Pentobarbitállal elaltatott patkányokat hanyatt fekve kikötünk cs az cpcvczetékbc polietilén kanült ültetünk be. 100 mg/kg vizsgálandó antibiotikum orális alkalmazása után 0-3, 3-6 és 6-24 óra múlva epemintákat gyűjtünk. Az epeminták antibiotikum-szintjét biológiai próbával határozzuk meg M/15 foszfátpufferrel (pH = = 7,0) készült standard oldatot használva és megállapítjuk az epével 24 óra alatt kiválasztott mennyiséget. 2. Vizsgálati eredmény Visszanyerés az epében 24 óra alatt (%) A vegyület 7,9 A következő Preparálások és Példák a találmány bemutatására szolgálnak. 1. Preparálás 2 - tere - Butoxi - karbonil - metoxi - imino - 2 - (2 - formamido-tiazol-4-il)-ecetsav (szin-izomer) (15,0 g) és tömény sósavoldat (9,5 g) keverékét metanolban (75 ml) környezeti hőmérsékleten 2,5 óráig keverjük. A reakcióelegyhez vizet (100 ml) adunk és az oldat pH-ját 10 %-os vizes nátrium-hidroxid-oldattal keverés közben 3,0-ra állítjuk be. A csapadékot szűréssel összegyűjtjük, vízzel és izopropanollal mossuk és szárítjuk. 2-íerc-Butoxikarbonil • metoxi - imino - 2 - (2 - amino - tiazol - 4 - il) - ecetsavat kapunk (szin-izomer) (12,7 g). ÍR (infravörös spektrum) (nujol): 3340, 1740, 1630 cm'1 NMR (mágneses magrezonancia spektrum) (DMSO-d6): S 1,43 (9H, s), 4,51 (2H, s), 6,77 (3H, s). 2. Preparálás 2 ■ tere - Butoxi - karbonil - metoxi - imino - 2 - (2 - amino-tiazol-4-il)-ecetsav (szin-izomer) (11,5 g) és tetrahidrofurán (80.5 ml) szuszpenziójához cseppenként, 50-57 °C-on, keverés közben tetrahidrofuránban (32,5 ml) oldott ím-butil-nitritct (6,5 g) adunk és a keveréket 50 55 'C-on 20 percig keverjük. A reakcióelegyet etil-acctát és víz keverékébe öntjük és az oldatot 10 %-os sósavoldattal pH = 1,0-ig megsavanyítjuk. Az elválasztott szerves fázishoz vizet (6,0 ml) adunk és a keveréket 40 %,-os vizes kálium-karbonát-oldattal pH = 6,0-ra állítjuk be. Az elválasztott vizes oldatot etil-acetáttal mossuk és az oldatot 10 %-os sósavoldattal pH = 2,8-ig megsavanyítjuk. A savas oldatot etil-acetáttal extrahál5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
