188565. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás új peptidek előállítására és ezek alkalmazási módja
81 188 565 82 módon a (4) képletű vegyületet (190 mg) nyerjük, fehér színű, por-szerű anyag formájában. IR-spektrum (nujol): 3250, 1720, 1660—1620 (széles). NMR-spektrum (deutérium-oxid, <5 ppm): 1,36 (3H, d, J = 7Hz), 1,20—2,60 (10H, m), 3,80 (1H, t, J = 6Hz), 4,10—4,60 (3H, m), 5,20 (IH, s), 7,42 (5H, s). 55. példa 1. lépés: 55/1 reakcióegyenlet. Z-y-D-Glu(ce-OH)-(L-Boc-D-mezoDAP-D-NHNHBoc-L)-D-AlaOH (2). Az (7) képletű vegyületet (1,51 g) feloldjuk 15 ml metanol és 10 ml víz elegyében. Az oldathoz hozzáadunk 4,0 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldatot, és az oldatot 2 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután pH-ját 7,0-ra állítjuk, majd betöményítjük. A maradék vizes oldatot vízzel hígítjuk, dietil-éterrel kirázzuk, ezután a vizes részt 1 n sósavval megsavanyítjuk, és a kivált, olajos anyagot etil-acetáttal kirázzuk. A szerves részt vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A fehér színű, habos maradékot diizo-propil-éterrel eldörzsölve fehér színű, porszerű anyag formájában a (2) képletű vegyületet (1,16 g) nyerjük. IR-spektrum (nujol): 3250, 1740—1620 (széles). NMR-spektrum (hexadeutero-dimetil-szulfoxid, S ppm): 1,36 (18H, s), 1,00-2,40 (13H, m), 3,66—4,50 (4H, m), 5,03 (2H, s), 7,36 (5H, s). 2. lépés: 55/2 reakcióegyenlet. Z-y-D-Glu(a-OH)-(L-mezoDAP-L)-D-AlaOH (2) A (2) képletű vegyületet (1,03 g) feloldjuk 10 ml trifluor-ecetsavban, és az oldatot fél órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután az elegyet lényegében a 2. példa 2. lépésében leírt módon kezeljük, ily módon fehér színű, por-szerű anyag formájában a (3) képletű vegyületet (0,6 g) nyerjük. IR-spektrum (nujol): 3300, 1700, 1660—1620 (széles). NMR-spektrum (deutérium-oxid, ö ppm): 1,36 (3H, d, J = 7Hz), 1,20—2,60 (10H, m), 3,76 (1H, t, J = 7Hz), 3,96—4,50 (3H, m), 5,08 (2H, s), 7,40 (5H, s). 3. lépés: 55/3 reakcióegyenlet. y-D-Glu(a-OH)-(L-mezoDAP-L)-D-AlaOH (4) A (3) képletű vegyületet (374 mg) feloldjuk 30 ml ecetsavban, és 100 mg csoptszenes palládium jelenlétében hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A kenőcs-szerű maradékhoz toluolt adunk, és a toluolt is ledesztilláljuk. A fehér színű, por-szerű maradékot feloldjuk vízben, és a vizes oldatot felvisszük egy 100 ml HP—20 jelzésű gyantával töltött oszlopra. Az oszlopot vízzel eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert ledesztilláljuk, a kenőcs-szerű maradékot feloldjuk vízben, és a vizes oldatot fagyasztva szárítjuk. Ily módon fehér színű, por-szerű anyag formájában a (4) képletű vegyületet (200 mg) nyerjük. IR-spektrum (nujol): 3250—2500 (széles), 1680— 42 1500 (széles). NMR-spektrum (deutérium-oxid, ô ppm): 1,36 (3H, d, J = 7Hz), 1,20—2,60 (10H, m), 3,75 (1H, t, J = 7Hz), 3,80 (1H, t, J = 7Hz), 4,00— 4,50 (2H, m). 56. példa 1. lépés: 56/1 reakcióegyenlet. N-(N-benzíloxi-karboníl-L-5-oxo-2-pirrolidin-karbomil)-y-D-Glu(a-OBzl)-(L-Boc-D-mezoDAP-D-NHNHBoc-L)-GlyOH (3) Az (7) képletű vegyületet feloldjuk 20 ml diklórmetánban, és hozzáadunk 308 mg N-metil-morfolint Az oldathoz száraz jég-aceton hűtőfürdőben, —17------19 °C hőmérsékleten, keverés közben hozzáadunk 417 mg klórhangyasav-izo-butil-észtert. A leakcióelegyet 20 percen át ugyanezen a hőmérsékleten tartjuk, majd hozzáadjuk a (2) képletű vegyület (1,41 g) 40 ml diklór-metán és 4 ml dimetil-formamid elegyével készült oldatát, amely 3 ml bisz-(trimetiI-szilil)-acetamidot is tartalmaz. A reakcióelegyet 2 órán át —18 — —10 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Az olajos maradékot feloldjuk 100 ml etilacetátban és 0,5 n sósavval mossuk. Ezután a szerves részt telített só-oldattal mossuk, és vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert ledesztilláljuk, és a fehér-színű, habos maradékot dietil-éterrel alaposan kimossuk. Ily módon a (3) képletű vegyületet (2,42 g) nyerjük, fehér színű, por-szerű anyag formájában. Op.: 145—149 °C (bomlik). IR-spektrum (nujol): 3280, 1780, 1720, 1650. NMR-spektrum (deutero-metanol, ô ppm): 3,93 (2H, s), 5,18 (4H, s), 7,38 (10H, s). 2. lépés: 56/2 reakcióegyenlet. N-N-benziloxi-karbonil-L-5-oxo-2-pirrolidin-karbonil)-y-D-Glu(a-OH)-(L-Boc-D-mezoDAP-D-NHNHBoc-L)-GlyOH (4) A (3) képletű vegyület (2,36 g) 25 ml metanollal készült oldatához hozzáadunk 5,6 ml 1 n nátriumhidroxid-oldatot, és az elegyet 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az elegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, és a maradék oldathoz 6 ml 1 n sósavat adunk. Ezután az oldatot etilacetáttal kirázzuk, a szerves részt 0,5 n sósavval (30 ml) mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Az olajos maradékot dietil-éterrel kezelve fehér színű, por-szerű anyag formájában a (4) képletű vegyületet (1,86 g) nyerjük. IR-spektrum (nujol): 3300, 1680 (széles), 1625. NMR-spektrum (deutero-metanol, <5 ppm): 1,46 (18H, s), 3,95 (2H, s), 4,00-^1,50 (4H, m), 5,13 (2H, s), 7,45 (5H, s). 3. lépés: 56/3 reakcióegyenlet. N-(N-benziloxi-karbonil-L-5-oxo-2-pirrolidin-karbonil)-}’-D-Glu(a-OH)-(L-mezoDAP-L)-Gly- OH (5) 10 ml Trifluor-ecetsavhoz hozzáadjuk a (4) képletű vegyületet (1,8 g), és az elegyet 100 percig szobahőmérsékleten tartjuk. Utána a trifluor-ecetsavat ledesztilláljuk, és a maradékot dietil-éterrel eldör-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
