188257. lajstromszámú szabadalom • Eljárás piridin-származékok előállítására
1 188 257 2 D vegyület: 2-Metil-3-[4-(3-piridil-oxi)-fenil]propénsav-hidroklorid (a bejelentés 5. példája) E vegyület: N-Ciklohexil-2-metil-3-[4-(3-piridiloxi)-fenil]-propénamid-hidroklorid (a bejelentés 6. példája) F vegyület: 2-Metil-3-[4-(4-piridil-tio)-fenil]propénsav-hidroklorid (a bejelentés 4. példája) G vegyület: 2-Metil-3-[4-(3-piridil-oxi)-fenil]propénamid-hidroklorid (a bejelentés 8. példája). Silver és munkatársai eljárása szerint [Science 183, 1085 (1974)] 20 mg/kg vizsgálandó vegyületet adunk be intraperitoneálisan 2,2-2,8 kg-os hím nyulaknak (8 vagy 10 nyúl csoportonként), majd 2 óra múlva 1,4 mg/kg magnézium-arachidonátot fecskendezünk be a nyulak egyik fül-vénájába. A nátrium-arachidonát beadása után 30 perccel meghatározzuk a nyulak mortalitását. A következő eredményeket kapjuk: 1. táblázat Vizsgálandó vegyület Mortalitás/össz állatszám aránya Védelem °/ /o A 5/10 50 D 0/10 100 E 2/8 75 Amint az 1. táblázatból látható, a találmány szerinti I általános képletű vegyületek (D és E vegyület) erős védőhatást fejt ki nyúlnál az arachidonsavval kiváltott hirtelen halállal szemben. Tromboxán A2-szintetáz gátlása Vérlemezke-dús nyúlpiazmát (6 • 10® vérlemezke per ml) a vizsgálandó vegyülettel 37 *C-on 5 percig előinkubálunk, majd 13 pg/ml koncentrációban kollagént adva a keverékhez az inkubálást 37 °C-on 5 percig folytatjuk. Ezután a reakciót sósavval való semlegesítés útján leálítjuk és a képződött tromboxán A2-t radioimmun eljárás segítségével mennyiségileg meghatározzuk. Az 50%-os gátlást előidéző koncentrációt (IC50) a 2. táblázat tartalmazza. Vérlemezke-összetapadás gátlása Vérlemezke-dús nyúlpiazmát a vizsgálandó vegyülettel 37 °C-on 1 percig előinkubálunk, majd arachidonsavat vagy kollagént adunk a keverékhez 100 pg/ml illetve 10 pg/ml koncentrációban. A vérlemezkék aggregálódását aggregométerrel határozzuk meg, és a 2. táblázatban ICJ0 értékek formájában adjuk meg. 2. táblázat Vizsgált vegyület IC so hatása a tromboxán A2 szintézisre (pM) Vérlemezke-aggregáció gátlása Arachidonsav Kollagén B 5,7 1000 400 C 0,22 1000 420 D 1,0-36 E 5,9 31 47 F 0,31-22 G 0,56 335 56 Amint a 2. táblázat eredményeiből látható, a találmány szerinti I általános képletű vegyületek erősen gátolják a tromboxán A2 szintézisét. A találmány szerinti I általános képletű vegyületek erősen gátolják az arachidonsawal és kollagénnel kiváltott vérlemezke-aggregációt is. Másrészről az összehasonlításképpen használt B és C vegyület a vérlemezke-összetapadásra csak nagyon gyenge gátlást fejt ki. Heveny mérgezőhatás A vizsgálandó vegyületet intraperitoneálisan 22-24 g súlyú him ddY egereiknek adjuk be és az LDS0 értéket Behrens-Kärber módszerével [Arch, exp. Path. Pharmak. 177, 379 (1935)] határozzuk meg az 1 hét múlva tapasztalható elhullás alapján. A kapott eredmények a 3. táblázatban láthatók. 3. táblázat Vizsgálandó vegyület LDjo (egér, ip.) mg per kg A 59 C 220 D 350 E 210 G 310 Készítmény-példák Kapszulák Alábbi összetételű készítményt tartalmazó kapszulákat állítunk elő szokásos módon: E vegyület 100 mg Karboxi-metil-cellulóz-kalcium 20 mg Kalcium-sztearát 5 mg Kristályos cellulóz 50 mg Talkum 10 mg 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6
