188191. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a természetben előforduló ergolén vázas alkaloidot , az ergotamint tartalmazó drog parazita módon történő előállítására
1 188 191 2 tével 5 literes üvegfermentorban az alábbi összetételű táptalajt oltottuk be: glükóz 8,0 s% tripkazin 1,5 s% ■ citrömsav 0,4 s% 5 A táptalaj pH-értéke: 5,8. Az inkubálást 24 °C-on 440 ford/perc keverés mellett Ö,5 1/perc levegőztetéssel 3 napig végeztük. A tenyészettel 10 liter alábbi összetételű táptalajt oltottuk be: mannit 5,0 s% citromsav 0,7 s% kukoricalekvár (50% száraz0,1 s% anyagra számolva) káíium-dihidrogén-foszfát 0,025 s% magnézium-szulfát 0,025 s% Az inkubálást 24 °C-on, 230 ford/perc keverés mellett, 1,0 1/perc levegőztetéssel, 4,5-5,0 pH értéken 6 napig végeztük. A pH értéket ammoniumhidroxid oldat adagolásával tartottuk a megadott tartományon belül. A fermentlé spóraszáma: 5,5-108 spóra/ml. A biomasszát elválasztottuk, majd malátakivonattal és glükózzal dúsítottuk, palackoztuk és 25 mély hütve tároltuk. Az oltóspóra készítmény spóráinak csírakészsége 97%. A készítménnyel 30 000 spóra/mm3 koncentrációra hígítva kalászos stádiumban levő rozsot fertőztünk 30 m2-es szabadföldi parcellán. A fertőzést kézi fertőzőlapokkal végeztük. A termést kézzel, veszteségmentesen gyűjtöttük be. Az új és a kiindulási anyag összehasonlításánál az alábbi eredményeket kaptuk: Törzs deponálási száma OKI OKI 00 222 00 215 Ezer szem súlya g 160 180 Ergotamin mg/g 3,5 9,5 Terméshozam kg/ha 150 . 280 Ergotamin g/ha 525 2660 Szabadalmi igénypont Eljárás a természetben előforduló ergolén-vázas alkaloidot, az ergotamint tartalmazó drog előállítására rozsra virulens Claviceps purpurea törzs spóratenyészetével, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmus törzsként az Országos Közegészségügyi Intézetnél 00215 szám alatt deponált Claviceps purpurea törzset alkalmazunk. Ábra nélkül 3