188110. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tripeptid-származékok előállítására
1 188 110 2 éterrel eldörzsölve 1,59 g Boc-(D)-mezoDAP-(D)NH2-(L)-GlyOH-t (2) kapunk. IR-spektrum (nujol): 3600-2200, 1690, (váll), 1670 cm1. NMR-spektrum (CD3OD, delta): 1,42 (9H, s), 1,2-2,0 (6H, m), 3,6-4,1 (4H, m). 3. példa (3. reakcióegyenlet) 5.38 g Z-(L)-Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NHNHBoc (1), 1,01 g N-metil-morfolinés 100 ml vízmentes diklór-metán elegyéhez —10—— 15 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,37 g klórhangyasav-izobutíl-észtert, és az elegyet félórán át ugyanezen a hőmérsékleten keverjük. Utána hozzáadjuk 0,61 g etanol-amin 6 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatát, és az elegyet 2 órán át ugyanezen a hőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 70 ml etilacetátban, és, az oldatot 2,5%-os sósavval, utána vízzel, ezután 2,5%-os nátrium-hidrogén-karbonátoldattal és végül megint vízzel mossuk. A mosott oldatot magnézium-szulfáton szárítjuk, majd az oldószert ledesztilláljuk. Az olajos maradékot diizopropil-éterrel eldörzsölve 5,76 g Z-(L)-Boc-(D)mezoDAP-(D)-NHNHBoc-(L)-NHCH2CH2OH-t (2) kapunk. IR-spektrum (nujol): 3280, 1710, 1690, 1675, 1745 cm“1. NMR-spektrum (CDC13, delta): 1,42 (18H, s), 1,4-2,0 (6H, m), 3,2-3,7 (5H, m), 4,0-4,4 (2H, m), 5,06 (2H, s), 5,72 (1H, d, J = 8Hz), 6,26 (1H, d, J = 8Hz), 7,30 (5H, s), 7,40 (1H, széles s), 9,08 (1H, széles s). 4. példa (4. reakcióegyenlet) 13,57 g nátrium-bórhidrid 140 ml vízzel készült, lehűtött oldatához félóra alatt hozzáadjuk 7,2 g Boc-(D)-mezoDAP-(D)-OMe-(L)-D-AlaOH (1) 100 ml vízzel készült oldatát, és az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána pH-ját 10%-os sósavval, jeges hűtés közben 3-ra állítjuk, majd az oldatot fel visszük egy 200 ml, HP-20 jelzésű, makropórusos, nem-ionos gyantával töltött oszlopra. Az oszlopot vízzel mossuk, 60%-os vizes metanollal eluáljuk; az elútumot betöményítjük és a maradékot dietil-éterrel kristályosítjuk. Ily módon 5,24 g Boc-(D)-(L-alfa-amino-D-epszilonamino-epszilon-hidroxi-metil)-hexanoil-(L)-DAlaOH-t (2) kapunk, op.: 82-85 °C (bomlik). IR-spektrum (nujol): 3250, 1670 cm-1. NMR-spektrum (DzO, delta): 1,48 (9H, s), 1,0-2,3 (9H, m), 3,4-4,1 (4H, m), 4,22 (1H, q, J = 7Hz). 5. példa (5. reakcióegyenlet) 2.39 g nátrium-bórhidrid 20 ml vízzel készült oldatához szobahőmérsékleten, 5 perc alatt hozzáadjuk 2,06 g D-Lac-(OAc)-L-Ala-gamma-D-Glu(alfa-OBzl)-(L)-mezoDAP-(L)-GlyOH (1) 200 ml, 1,5%-os, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-cldattaí készült oldatát, és a reakcióelegyet 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 2%-os sósavval pH = 3-ra savanyítjuk, majd körülbelül 40 m! térfogatra betöményítjük. A betöményített oldatot felvisszük egy 140 ml aktív-szénnel töltött oszlopra, az oszlopot vízzel mossuk, majd 50%-os, vizes metanollal eluáljuk. Az elútumot betöményítjük, a maradékot feloldjuk kevés vízben, és a vizes oldatot felvisszük egy 240 ml, HP-20 jelzésű, makropórusos, nem-ionos gyantával töltött oszlopra, és az oszlopot vízzel eluáljuk. Az elútumot betöményítjük és a maradék oldatot fagyasztva szárítjuk. Ily módon 1,07 g D-Lac-LAla-gamma-D-(alfa-amino-alfa-hídroxi-metiI)butiril-(L)-mezoDAP-(L)-GlyOH-t,(2) kapunk, [alfa)D = - 24,2° (c = 1,0 víz). IR-spektrum (nujol): 3230, 1710, 1630 cm“1. NMR-spektrum (D20, delta): 1,26 (3H, d, J = 7Hz), 1,20-2,16 (8H, m), 1,43 (3H, d, J = 7Hz), 2,34 (2H, t, J = 7Hz), 3,5-3,7 (2H, m), 3,79 (1H, t, J = 6Hz), 3,96 (2H, s), 4,1-4,5 (4H, m). 6. példa a) lépés (ója reakcióegyenlet) A D-Lac-L-Ala-gamma-D-Glu-(alfa-OH)-(L)Boc-(D)-(L-alfa-amino-D-epszilon-amino-epszilon-hidroxi-metil)-hexanoil-(L)-GlyOH-t (2) az 5. példában leírt módon állítjuk elő. NMR-spektrum (D20, delta): 1,42 (9H, s), 1,1-2,6 (16H, m), 3,2-3,7 (2H, m), 3,93 (2H, s), 4,04,4 (5H, m). b) lépés . (6jb reakcióegyenlet) 10 ml trifluor-ecetsavhoz hozzáadunk 0,74 g D-Lac-L-Ala-gamma-D-Glu-(alfa-OH)-(L)-Boc(D)-(L-alfa-amino-D-epszilon-amíno-epszilonhidroxi-metil)-hexanoil-(L)-GlyOH-t (2), és az oldatot negyedórán át szobahőmérsékleten keveijük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 20 ml vízben, és az oldat pH-ját 2,5 normál nátrium-hidroxid-oldattal 3-ra állítjuk. Az oldatot felvísszük egy 30 ml aktívszénnel töltött oszlopra, az oszlopot vízzel mossuk, majd 50%-os, vizes metanollal eluáljuk. Az elútumot betöményítjük és a maradékot kevés vízben feloldjuk. Ezt a vizes oldatot felvisszük egy 90 ml, HP-20 jelzésű, makropórusos, nem-ionos gyantával töltött oszlopra. Az oszlopot vízzel eluáljuk, az elútumról az oldószert ledesztilláljuk, majd a maradékot fagyasztva szárítjuk. Ily módon 0,46 g D-Lac-L-Alagamma-D-Glu-(alfa-OH)-(L)-(L-alfa-amino-D- epszilon-amino-epszilon-hidroxi-metil)-hexanoil(L)-GlyOH-t (3) kapunk. [aIfa]D = - 32,3° (c = 0,2 víz). IR-spektrum (KBr): 3360, 1650, 1530 cm-1. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
