188099. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mágnesesen lokalizálható, biológiailag lebontható lipid mikrohólyagok előállítására
1 188 099 2 tű vízhez adjuk, és mikroemulziót képezünk szonizálással vagy nagyfordulatú keveréssel. A szonizálást vagy keverést folytatjuk, és a melegítést leállítjuk. A mikrohólyagocskák körülbelül 40 °C hőmérsékleten megszilárdulnak. A lipid mikrohólyagoknak a vizes fázistól történő elválasztására liofilizálást végezhetünk, vagy a mikrohólyagokat egyszerűen centrífugálással vagy szűréssel választjuk el. Az így előállított prednizolon lipid mikrohólyagok fizikai állandói a következők: olvadáspont: 38-41 °C. hatóanyag-tartalom: 9,5 mg prednizolon-aktivitás 100 mg lipid mikrohólyagban (95%). aktivitás-csökkenés a vizes fázishoz viszonyítva: 5% vagy 0,5 mg prednizolon-aktivitás a folyamatba bevitt 10 mg anyagból. vastartalom: 16,6% atomabszorpciós spektroszkópiával vizsgálva (99,52%). részecskeméret: 4 mikronnál nagyobb méretű lipid mikrohólyag nem található. 200-250 g súlyú nőstény Holtzman patkányok ventrális farok artériájába PE 10 Intramedic katétert építettünk be sebészi úton. Az adagolás során az állat farkát ALNICO permanens mágnes (patkó-alakú, állítható nyílással, 5500-600 Oerstad) pólusai közé helyeztük, és összesen 30 percig tartottuk a mágneses mezőben. Ezután az állatokat felboncoltuk, és a farok tájékát megvizsgáltuk, hogy megállapítsuk a gyógyszer aktivitását és annak térbeli elhelyezkedését. Az aktivitást 15 perccel, majd 24 órával az adagolás után határoztuk meg. Mindegyik állatnak 1 mg lipid mikrohólyagot adagoltunk, mely 100 meg prednizolon-aktivitásnak felelt meg. A lipid mikrohólyag dózist l ml izotóniás só-oldatban adagoltuk. A találmány szerinti lipid mikrohólyag-rendszer hatásának más adagolási rendszerekkel történő összehasonlítására a fentiek szerint eljárva hagyományos prednizolon-oldatot és a prednizolonmágneses albumin mikrohólyagot alkalmaztuk. A két összehasonlító rendszert a következőképpen állítottuk elő: Hagyományos prednizolon-oldat prednizolon [6,7~3H(N)], 100 pg etanol 1 ml. Az etanolt azért alkalmaztuk, mert a hatóanyagot megfelelően oldja és intravaszkuláris adagolásra megfelelő. Mágneses albumin mikrohólyagok prednizolon [6,7~3H(N)1 10,0 mg mágneses vasoxid (100 A) 16,7 mg humán szérum albumin 73,3 mg. Az alkotórészeket 1 ml vízben összekeverjük, majd 100 ml gyapotmag-olajhoz adjuk, és így albumin mikrohólyagokat állítunk elő (lásd 78300208.2. számú európai szabadalmi bejelentést). Az albumin mikrohólyagok analízise során azokban 1%-nál kisebb prednizolon-aktivitást találtunk (0,1 mg prednizolon található a végső mikrohólyagos termékben). Ez azt jelenti, hogy az előállítás során körülbelül 9,9 mg hatóanyag a gyapotmag-olaj fázisban maradt. A kísérletek eredményeit az alábbiakban adjuk meg. 100 pg prednizolon-aktivitás felel meg 100%nak. Adagolási forma %-os lokalizáció 15 perc 24 óra 1 mg lipid mikrohólyag 90 75 1 mg albumin mikrohólyag 0,1 0,0 1 ml hagyományos oldat 0,05 0,0 A fenti kísérletekből megállapítható, hogy vízben oldhatatlan hatóanyagok, például prednizolon alkalmazása esetén a lipid mágnesesen lokalizálható mikrohólyagok igen magas hatóanyag-szintet eredményeznek előre meghatározott szövetekben vagy szervekben. A lipid mikrohólyagok koncentrációja 900-1800-szorosa a hagyományos oldatokkal vagy mágneses albumin mikrohólyag-rendszerekkel elérhető koncentrációknak. Az albumin likrohólyag előállításának irodalma szerint különböző olajokat vagy szerves oldószereket használnak a hólyagok képzésére. A legtöbb hatóanyag ezekben a külső fázisokban oldódik. Az ilyen, vízjen oldhatatlan hatóanyagokat így az albumin mikrohólyagok nem zárják magukba, és azok az olajos fázissal elvesznek mosás vagy az albumin mikrohólyagok elválasztása során. így a vízben oldhatatlan hatóanyagok esetén csak a találmány szerinti lipid mikrohólyag-rendszerek alkalmazhatók. 3. példa Az alábbi példában lipid mágnesesen lokalizálható mikrohólyagokat állítunk elő, melyek 1. valamely zsíralkoholt, például cetilalkoholt, 2. anionos felületaktív szert, például nátrium-lauril-szulfátot, és 3. különböző zsírsav-kombinációt tartalmaznak; így többek között palmitinsav helyett mirisztinsaat. A készítményt a következő összetételben állítjuk elő: Alkotórész Súly% mirisztinsav 25,00 linolsav 30,00 cetilalkohol 13,00 nátrium-lauril-szulfát 15,32 mágneses vasoxid (100 Â) 16,68 16,68 mg mágneses vasoxidot 30 mg linolsavval megnedvesítünk. E két komponenst 25,00 mg mirisztinsavval, 13,00 mg cetil-alkohollal és 15,32 mg nátrium-lauríl-szulfáttal keverjük. Az elegyet ezután 90 °C hőmérsékleten homogén oldat illetve olvadék keletkezéséig melegítjük. Ezután 100 ml 90 °C hőmérsékletű vízhez adjuk, majd a következő lépéseket a 2. példában leírtak szerint végezzük. Az így előállított lipid mágneses mikrohólyagok fizikai állandói: olvadáspont: 40-43 °C vastartalom: 16,5% atomabszorpciós spektroszkópia alapján (az elméleti 98,9%-a) részecskeméret: a hólyagok átmérője minden esetben 4 p alatt van. 5 1u 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
