188073. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2,5-diketo-D-glükonsav előállítására
1 188 073 2 rint, 0,5% Bacto élesztőkivonatot, 0,3% Bacto peptont, 0,1% káliumdihidrogénfoszfátot, 0,02% magnézium-szulfát 7 H20-t és 1,5% agarport tartalmazó GYP agar lemezt használunk, és a pH-t 7,0-7,2- re állítjuk be.) A vizsgálandó mikroorganizmus 5 szuszpenziójának vékony vonalával beoltva, 28 *C- on, 48 óra hosszat inkubálunk, miután 45 ’C-on az inkubátorban 2 óra hosszat tartó kezeléssel áz oxigént eltávolítottuk. Általában gyenge növekedést figyeltünk meg. 10 A növekedés kisebb, mint a kontrollként használt Escherichia coli növekedése. 18. D-F próba (Hugh-Leifson féle módszer): Általában fermentál. Az 1% Bacto triptont, 0,1% Bacto élesztőkivonatot, 0,004% brómkrezolvöröst, 1% 15 glükózt (vagy laktózt), 0,2% agarport tartalmazó táptalaj pH-ját 7,0-7,2-re állítjuk be, és 18 mm átmérőjű kémcsövekbe 8 cm magasságig visszük be, majd 15 percig 121 *C-on sterilizáljuk. Miután a táptalaj hőmérséklete 30-40 °C-ra csökkent, a 20 felsorolt törzsek mindegyik mikroorganizmusával két-két kémcövet beoltottunk, és mindegyik kémcsőpár egyikét 5-7 ml steril folyékony paraffinnal 4 cm magasságban feltöltve, lezártuk. A kémcsöveket 28 'C-on inkubáltuk, és 7 napon át megfigyel- 25 tűk. Mind aerob, mind anaerob körülmények között D-glukózból (az SHS-2003 törzs esetében laktózból is) sav keletkezett, de gáz nem fejlődött. Mind a lezárt, mind a le nem zárt kémcsövek tetejétől az 30 aljáig húzódó szúrási vonal mentén határozott növekedést figyeltünk meg! Az anaerob savképződés nem annyira gyors, mint a kontrollként használt Escherichia coli esetében. 35 19. Sav- és gáztermelés szénhidrátokból: (Módosított Barsikov-féle módszer, 28 'C-on 7 napig tartó mozdulatlan tenyésztés.) O N .g g -2 é ! 3 -8 1 3 o -g Ç i M CQ. Törzs SHS N N 40 c M -g :2 g :s N -s I ■§ -g 13 '3 =; .2 AC î! K ^ E y M ^ 2003 + + + + + + + + + + + + + 2004 + + + + + +- + +- ++ 2005 + + + + + +- + +- + + + 2006 + + + + + +- + +- + +-2007 + + + + + +- + +- + +-2008 + + + + + +- + +- + + + 2009 + + + + +- + +- + + + 2010 + + + + + ±- + +- + +-2011 + + + + + “- + +- + +-50 55 o M *3) N ‘O u 3 N '2 15 c C x c "3 N N ‘O c £ 2 o N ■o c G *c o 'ü 2 'fi jj *o e £ 73 a-metil-| inozit Törzs SHS N cn E *o ca N ifi 73 *o 73 T3 e 73 2003 2004 + 2005 +±- -2006 + 2007 ++~ -60 ** Törzs SHS «II c *p T3 fi O :3 _ N c £ N N 0-0 ■- - R 'S - N = N S 2 ë e ë g s ç is C o fc ° ï ï rt N rt ^ .2 c h - fl ^3 C A B '§ 2008 + 2009 + 2010 + 2011 + Megjegyzés: (i) savat termel, de gázt nem ( + ) (ii) kevés savat termel, de gázt nem ( ± ) (in) sem savat, sem gázt nem termel (-) 20. Metilénkék (Húsleves folyékony táptalajon 18-24 óra hosszat tenyésztve): Általánosan redukálnak. 21. D-glukonsav: Általánosan hasznosítják. 22. 2-keto-D-glukonsav: Általában hasznosítják. 23. Szacharózból redukált vegyület termelése [Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, 8. kiadás (1974), 335. old., 8.19. táblázat, f. lábjegyzet]: az SHS-2003 törzs kivételével általában pozitív. 24. Különféle aminosavak karboxilmentesítése: [Shaw, C. és Clarke, P. H., J. Gen. Microbiol., 13, 155-161 (1955)]. (i) L-glutaminsav: SHS-2003,2008,2009,2010 és 2011 törzsekkel negatív. SHS-2004, 2005, 2006 és 2007 törzsekkel pozitív. (ii) L-lizin: Általánosan negatív. (iii) L-arginin: Általánosan negatív. (iv) L-omitin: Általánosan negatív. 25. Lipáz (Módosított Starr féle módszer [Starr, M. P., Science, 93, 333-334 (1941)]: Általánosan negatív. 26. D-glükóz oxidálása [Shaw, C. és Clarke, P. H„ J. Gen. Microbiol., 13,155-161 (1955)]: Általánosan pozitív. 27. Pektát lebontás [A. M. Paton, Nature, 183, 1812-1813 (1959)]: Általánosan negatív. 28. Kazein hidrolízis (D. W. Dye, N. Z. J. Sei., 11, 590-607 (1968)]: Általánosan negatív. 29. Szimplazmata [Graham, D. C. és Hodgkiss, W., J. Appl. Bacteriol. 30(1), 175-189 (1967)]: Az SHS-2003, 2004, 2005, 2007, 2008 és 2009 törzsekkel negatív; SHS-2006, 2010 és 2011 törzsekkel pozitív. 30. DNase (Bacto DNase-próba agar táptalaj): Általánosan negatív. 31. Fenilinanin-dezamináz (fenilalanin/malonsav táptalaj, beszerezhető a Nissui Pharmaceutical Co. Ltd.-től): Az SHS-2003, 2008, 2009, 2010 és 2011 törzsek negatívok vagy nagyon gyengén pozitívok. Az SHS-2004, 2005, 2006 és 2007 törzsek negatívok. 32. Káliumcianid gátlás: Általánosan pozitív. 33. 5% nátriumkloridot tartalmazó húslevesben a fejlődés: Általánosan pozitív. 34. Auxotrophia (Gray és Tatum féle táptalajon): Általánosan nikotinsavat vagy nikotinamidot igényelnek. 5
