187680. lajstromszámú szabadalom • Eljárás elsősorban baromfipestis elleni aeroszol előállítására
1 187 680 2 A cukor mennyiségét figyelembe véve annyi vizes oldatot készítünk, hogy annak koncentrációja célszerűen 10 tömeg%-os legyen. Ebből az anyagból az alábbiak szerint készítünk aeroszolt. 5 A nyílászárókat, ajtókat gondosan becsukjuk az istállóban. A szellőztetést kikapcsoljuk az aeroszol képzésének kezdetétől számított fél óráig. A teremben a megvilágítás erősségét annyira csökkentjük, hogy az még ne zavarja az aeroszol generátort mű- 10 ködtető személy közlekedését, munkáját. Az immunizálások időpontját egyébként az ismerteknek megfelelően tűztük ki. ■ A találmány szerinti megoldást az alábbi példák szemléltetik. 15 A példákból kitűnik, hogy a találmány szerinti oltóanyag- lényegesen * lecsökkenti a negatív HAG-titerű egyedek számát;- megemeli a HAG-titer értékeket; 20- a felülfertozési kísérletben az elhullási arányt lényegesen csökkenti;- az oltási reakciót a minimálisra csökkenti;- a virus levegőben való túlélését előnyösen befolyásolja. : 25 A gyári oltóanyag víruskoncentrációjától függően olyan találmány szerinti oldatot készítettünk, amelynek vírusanyag koncentrációja 108—10s* EIDS0 volt. 1. példa Fényhatás vizsgálata (fényben, vitamin nélkül) Az immunizálás előtt meghatároztuk a csirkék 35 baromfipestis elleni szikimmunitását [1 : 2,7 HAG- titer (HAG-titer = haemagglutináció-gátlási próba - nagysága egyenesen arányos az alkalmazott vírussal szemben kialakult ellenanyag mennyiségével) 69 db csirke átlagában]. 10 napos csirkéket 40 immunizáltunk a vírus aeroszoljával, az aeroszol képzés idején* mesterséges megvilágítást használtunk az ólban. Az istálló teljes légterére számítva kb. 200 ml A, D és E vitamin mentes találmány szerinti oltóanyagot alkalmaztunk (légköbméteren- 45 ként 10 tömeg%-os glükózt és 107 EID50 titerű La Sota vírust tartalmazó oltóanyagból 7 ml-t használtunk fel). Az aeroszol alkalmazását követően 2 héttel vizsgáljuk a HAG-titereket. Ebből kiderült, hogy a csoportátlag 1 :20,5 volt (negatív 22 db, 50 1 : 2 és 1 : 4 5 db, 1 : 8 és 1 : 16 19 db, 1: 32 és 1 : 64 22 db, 1 : 128 1 db). Tehát a csirkék mintegy 32%-a nem mutatott szerológiai áthangolódást. A vadvírussal történő felülfertőzés (az aeroszolt követő 17. napon) eredménye szerint 20 csirkéből 11 db elhullott. 2. példa Fényhatás vizsgálata (fény kizárásával, vitamin nélkül) Az 1. példa szerinti kísérletet sötét környezetben megismételtük. Az immunizálás idején a szikimmunitás 1 : 2,5 HÁG titert mutatott 59 csirke átlagában. Az aeroszol alkalmazását követő 2. héten ellenőrizzük a HÁG titereket, ami 60 állat átlagában 1 : 32,9 értéket mutatott (negatív 10 db, 1 : 2 és 1 : 4 7 db, 1 : 8 és 1 : 16 13 db, 1 : 32 és 1 :64 27 db, 1 : 128 vagy ennél nagyobb 3 db). A csirkék 16,6%-a nem adott immunválaszt. Az immunizálást követő 17. napon felülfertőzött csirkéből 3 db elpusztult. 3. példa Fényhatás vizsgálata (fényben, vitaminok jelenlétében ) Az 1. példa szerinti kísérletet világos ólban megismételtük, de az ott bemutatott aeroszolt még kiegészítettük A, D és E vitaminnal, összesen 0,012 g/m’ A, D és E vitamint alkalmaztunk, azaz a felhasznált kb. 200 ml találmány szerinti oltóanyag összesen 0,36 g A, D és E vitamint tartalmazott. Az immunizálás idején a csirkék 1 :2,9 átlag HAG- titert mutattak. Az aeroszol alkalmazása utáni 2. héten az átlag HAG-titer 1 :43,5 értékre emelkedett (negatív 1 db, 1 : 2 és 1:42 db, 1 :*8 és 1 : 16 17 db, 1 : 32 és 1 : 64 32 db, 1 : 128 vagy magasabb 6 db). Az aeroszol-immunizálást követő 17. napon felülfertőződött 20 csirkéből mindössze egy állat pusztult el 4. példa Baromfipestis-ellenanyag hatás vizsgálata 5 hetes, alapimmunitással rendelkező állatoknál Az 1., 2. és 3. példa szerinti csirkék aeroszolimmunizálása 35 napos korban igen magas szerológiai titereket eredményezett (1 : 169,1 - 1 : 256,2), és a felülfertőzést mindegyik állat túlélte. Az 1-4. példához tartozó adatok összefoglaló táblázata: (10 napos korban különböző megvilágítás mellett immunizált csirkék szerológiai és felülfertőzési vizsgálatának eredményei) Kezelés Vizsgált állatok száma A HAG-titerek alakulása a kezelés után 14 25 nappal Negatív titer Felülfertőzés eredménye sötét 59 db 1 : 32,9 1 :230,1 10 db 3/20 fény 69 db 1 : 20,3 1 :256,2 22 db 11/20 fény + pigm.védő 60 db 1 :43,5 1 : 169,1 1 db 1/20 A felülfertőzés hatására elhullott állatok számát a számlálóban tüntettük fel, a nevezőben a felülfertőzött összes állat szerepel. Az immunizálás 10 és 35 napos korban, a felülfertőzés 35 napos korban történt. 3
