187461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló hatású N-nitrozo-N-(béta-klóretil)-karbamoil-peptidek előállítására
1 187.461 2 N-Nitrozo-N- (fi-k lórctil) -karbamoil-triptofilnorleucil-aszparagil-fenilalaninamid 921 mg (1,5 mmól) triptofil-norleucil-aszparagilfenil-alanimid-hidrokloridot [Nature, 207, 1356. (1956)] 8 ml vízmentes dimetilformamidban oldunk, és keverés közben 0,21 ml (1,5 mmól) trietilamint, 420 mg (1,5 mmól) N-nitrozo-ß-kloretilkarbamoil-p-nitrofenolt, majd 200 mg (1,5 mmól) 1- hidroxi-benztriazolt adunk hozzá. Két órás keverés után a dimetilformamidot vákuumban ledesztilláljuk. A desztillálási maradékot vízzel eldörzsöljük, a vizet dekantáljuk, és a visszamaradt olajat exszikkátorban foszforpentoxid felett szárítjuk. Száradás után az anyagot vízmentes éterrel elporitjuk, szűrjük. A termék súlya: 800 mg (75%). Rf: 0,80 (n-butanol-jégecet-víz 4:1:1, Kieselgel, Merck). Analízis a C33H41N808CI (713,20) képlet alapján: számított: Cl = 4,97%; N = 15,871%; NO = 4,20% talált: Cl = 4,58%; N = 15,32%; NO = 3,92%. Nitrozo-csoport meghatározás: J. Pharm. Sei., 54, 809. (1965). 8. példa N-Nitrozo-N- ( ß-klöretil) -karbamoil-glutamil-hisztidil-fenilalanil-arginil-triptofil-glicin 332 mg (0,4 mmól) glutamil-hisztidil-fenilalanilarginil-triptofil-glicint [Helv. Chim. Acta 44, 1991 (1961)] 6 ml vízmentes dimetilformamidban oldunk és keverés közben 0,056 ml trietilamint, 120 mg (0,44 mmól) N-nitrozo-ß-kloretilkarbamoil-pnitrofenolt majd 56 mg (0,4 mmól) 1-hidroxi-benztriazolt adunk hozzá. Kétórás reakcióidő után a dimetilformamidot vákuumban ledesztilláljuk és a desztillálási maradékot szilikagéllel töltött oszlopon metanol-aceton-víz 70:5:25 arányú oldószereleggyel kromatografáljuk. A főterméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és oldószermentesítjük. A bepárlási maradékot vízmentes éterrel elporitjuk. A termék súlya: 133 mg. Rf: 0,55 (metanol-aceton-víz 70:5:25, Kieselgel G, Merck). Analízis a C^Hj-jN^OuCl (965,43) képlet alapján: számított: Cl = 3,67%; N = 20,31%; NO = 3,10% talált: Cl = 3,32%; N = 19,98%; NO = 2,81% A nitrozo-csoport meghatározás: J. Pharm. Sei., 54, 809. (1965). 9. példa N-Nitrozo-N-($~klóretil)-karbamoil-triptofil-leucil-a-aszparagil-Jinilalaninamid a) 633 mg (1 mmól) triptofil-leucil-a-aszparagil(ß-terc-butil6szter)-fenilalaninamidot [Z. Physiol- Chem., 353, 1246. (1972)] 6 ml 2 n sósavas etilacetátban fél órán át szobahőmérsékleten állni hagyunk, majd 30 ml vízmentes étert adunk hozzá, a kivált kristályokat kiszűrjük és éterrel mossuk. 590 mg (93%) triptofil-leucil-a-aszparagil-fenilalaninamid-hidrokloridot kapunk. Rf: 0,74 (butanol-piridin-jégecet-víz = 30:20:6:24, Kieselgel G, Merck). b) A 9a) példa termékének 921 mg-ját (1,5 mmól) feloldjuk 10 ml vízmentes dimetilformamidban, majd 373 mg (1,5 mmól) N-nitrozo-ß-kloretilkarbamoil-N-hidroxiszukcinimidet és 0,42 ml (3 mmól) trietilamint adunk hozzá. A reakcióelegyet 15 percig keverjük, majd vákuumban oldószermentesítjük. A maradékot vízzel eldörzsöljük, szűrjük, a szilárd anyagot vízzel mossuk. Szárítás után 980 mg (92%) cím szerinti vegyületet kapunk. Rr: 0,69 (etilacetát-piridin-jégecet— víz = 30:20:6:11, Kieselgel G, Merck). Analízis a C33H41N808C1 (713,20) képlet alapján: számított: Cl = 4,97%; N = 15,71%; NO = 4,20% talált: Cl = 4,58%; N = 15,32%; NO = 3,95%. 10. példa a-[ N-Nitrozo-N-($~klóretil) ~karbamoiIJ-E-terc-butiloxi-karbonil-glicil-lizil-prolil-valinamid 1,30 g (2,6 mmól) e-terc-butiloxi-karbonil-glicil- Hzil-prolil-valinamidot feloldunk 13 ml vízmentes dirt-et’lformamidban, majd 650 mg (2,6 mmól) N- mtrozu-N-(ß-kl0retil)-karbamoil-N-hidroxiszukcinímidet és 0,36 ml (2,6 mmól) trietilamint adunk hozzá. 15 percig tartó keverés után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk és vízzel kirázzuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. 1,29 g (80%) cím szerinti vegyületet kapunk. Rf: 0,82 (kloroform-metanol = 8:2, Kieselgel G. Merck). 11. példa a-[ N-Nitrozo-N- ( ß-kloretil) -karbamoil]-glicil-lizil-propii-valinamid-bidroklorid A 10. példa termékének 633 mg-ját (1 mmól) 10 ml 0,14 n sósavas hangyasavban 5 percig állni hagyjuk, ezután az oldatot vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot vízben oldjuk, az oldatot etilacetáttal kirázzuk. A vizes fázist liofilizáljuk. így 540 mg (95%) cím szerinti sót kapunk. Rf: 0,65 (etilacetát-piridin-hangyasavvíz = 60:20:6:5,5, Kieselgel G, Merck). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
