187419. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 6béta,7béta-15,16-dimtilén-1,4- androsztadién-3-on származékok előállítására
1 2 .187 419 A találmány tárgya eljárás új 6ß,7ß;15ß,16ß-dimetilén-1,4-androsztadién-3-on-származékok, azaz 6ß,7ß; 15ß, 16ß-dimetil0n-1,4-androsztadi6n-[17(ßr)-spiro-5’]-perhidrofurán-2’,3-dion és 3-(17ß-hid- c roxi-6ß,7ß; 15ß, 16ß-dimetil0n-3-oxo-l,4-androszta- 5 dién-17u-il)-propionsav-káliumsó előállítására. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek értékes farmakológiai tulajdonságokkal rendelkeznek. Többek között aldoszteron-antagoni'sta típusú diuretikumok, vagyis a dezoxikortikoszte- 10- ron hatását a nátrium és kálium kiválásra váltják át. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek hatása a Hollman-féle teszt-modellben [G. Hollmann és munkatársai: „Tubuläre Wirkungen und renale Elimination von Spirolactonen”, Naunyn-Schmiedebergs Arch. Exp. Path. Pharmak., 247. köt., 419. old. (1964.); P. Marx: „Renale Wirkungen des d-Aldosterons und seines Antagonisten Spironolactons”, Diss. Med. Fak. FU Berlin (1966.)] meglepetésszerűen nagyobbnak mufatko- 20 zik, mint az ismert spironolaktoné így például a 6ß,7ß;15ß,16ß-dimetil0n-l,4-androsztadiön-[17(ßr)-spiro-5’]-perhidrofurán-2\3-dion aktivitása á spironolakton aktivitásához képest 10-15-szörös. A találmány szerinti eljárás abban áll, hogy a 25 megfelelő 6ß,7ß; 15ß,16ß-dimetiten-4-androsztön[17(ß-r)-spiro-5’]-perhidrofurän-2’,3-dionba a A1- kettőskötést bevezetjük, majd kívánt esetben a laktongyűrüt felhasítjuk. A A'-kettőskötés bevezetését önmagában ismert 30 módon, Bacillus lentus törzzsel, például Bacillus lentus ATCC 13 805 törzzsel végzett dehidrogénezéssel valósítjuk meg. A laktongyűrű kívánt esetben ezt követő felnyitását szintén önmagában ismert módon végezzük. 35 E célból a laktont híg kálium-hidroxiddal melegítjük, amikor is a 3-helyzetben szubsztituált propionsav képződik. A reakció befejezése után a reakcióelegyet a szokásos módszerekkel, így kicsapással, extrakcióval, 40 átkristályosítással és/vagy kromatografálással dol-t gozzuk fel. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként alkalmazott 6ß,7ß; 15ß, 16ß-dimetilön-4-androsztén-f 17-(ß-1 ’)-spiro-5’]-perhidrofurán-2’ ,3-45 diont a 1-74 983 számú magyar szabadalmi leírás ismerteti. A megfelelő, nem spiro-származékok ebből a vegyületből a laktongyűrű alkoholos káliumhidroxiddal végzett felhasításával állíthatók elő. Ezt a hasítást a 2. példa szemlélteti. 50 A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket a galenika önmagában ismert módszereivel orálisan vagy parenterálisan adagolható gyógyászati készítményekké dolgozzuk fel. A találmány szerinti eljárással előállított ,ható- 55' anyagok adagolási dózisa embereknél 10-200 mg/ nap. Az alábbi kiviteli példák a találmány szerinti eljárást szemléltetik. 1. példa 500 ml, 1,5% peptont, 1,2% kukoricalekvárt és 0,2% magnézium-szulfátot tartalmazó, autokláv- 65 ban 30 percen át 120 °C hőmérsékleten sterilezett, 2-literes Erlenmeyer-lombikban levő táptalaj pH- ját 6,5-re beállítjuk, az ATCC 13 805 számon deponált Bacillus lentus lioülizált kultúrájával beoltjuk, és 24 órán át 30 °C hőmérsékleten, rotációs rázókészüléken rázzuk. Az így előállított előkultúrával 14 liter, 121 "C-on és 107 kPa túlnyomáson sterilizált, 0,1% peptont, 0,2% kukoricalekvárt, 0,5% glükózt és 0,5% élesztőextraktumot tartalmazó, folyékony táptalajjal megtöltött 20-literes fermentort oltunk be, és a kultúrát szilikonolaj SH habzásgátló hozzáadása után 24 órán át 29 °C-on levegőztetés és keverés közben tenyésztjük. Ezután a növekedési fázis után adagoljuk be a szubsztrátumot, azaz 3 g 6ß,7ß; 15ß, 16|3-dimetilén-4-androsztén-[l 7(ß-1’)spiro-5’]-perhidrofurán-2’,3-dion 150 ml dimetilfórmamiddal készített oldatát. Végül beadagolunk 750 mg 2-metil-l,4-naftokinont 75 ml dimetilfomiamidban, és folytatjuk a levegőztetést és keverést. 31 óra múlva a fermentor tartalmát kétszer, 10-10 liter metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és az extraktumot vákuumban bepároljuk. A maradékot a szilikonolaj eltávolítása céljából hexánnal mossuk, végül aktív szénnel való kezelés után izopropil-éterrel kristályosítjuk, leszívatjuk és acetonból még egyszer átkristályosítjuk. 2,2 g 6ß,7ß; 15ß, 16ß-dimetilön-1,4-androsztadién-[l 7(ßr)-spiro-5’]-perhidrofurán-2’,3-diont kapunk, olvadáspontja 238-240 °C. UV-spektrum: e242 = 12 000, e285 = 9990. 2. példa 500 mg 6ß,7ß;15ß,16ß-dimetiten-l,4-antrosztadi0n-[17(ß-r)-spiro-5’]-perhidrofurän-2’,3-dionhoz 5ml izopropanolban 1,37 ml 1 n metanolos kálium-hidroxidot adunk és 1 órán át visszafolyató hűtő mellett melegítjük. Lehűtés után 30 ml abszolút étert adunk hozzá, és 1 órán át jégfürdőben keverjük. A kikristályosodott csapadékot leszűrjük, éterrel mossuk és megszárítjuk. 510 mg 3-(17ßhidroxi-6ß,7ß; 15ß, 16(3-dimetilén-3-oxo-1,4- androsztadién-17a-il)-propionsav-káliumsót kapunk, olvadáspontja 166-172 °C (bomlás). UV-spektrum: e245= 11 500, e286 = 9600. 3. példa 10.0 mg 6ß,7ß; 15ß, 16ß-dimetil0n-1,4-androsztadién*[l 7(ß-1 ’)-spiro-5’]-perhidTofurán-2’,3-diont mikronizálunk és homogénen elkeverjük. 80.0 mg laktózzal, ' 29,6 mg mikrokristályos cellulózzal és 0,4 mg magnézium-sztearáttal, majd előzetes granulálás nélkül tablettákká sajtoljuk. A tabletták súlya 120 mg, átmérője körülbelül 7 mm és vastagsága 2,7-2,9 mm. i
