187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 . 187417 2 bekezdésben ismertetett paramétereket tartva nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel tisztítjuk. 10,47 perces retenciós időnél a 220 nm-en ibolyántúli abszorpciót mutató frakciókat összegyűjtjük, majd szárazra pároljuk, 28,6 mg mennyiségben fehér por alakjában a lépés címadó vegyületét kapva hidrokloridsóként. Fajlagos forgatóképessége [a]o = — 14,4° (c = 1, metanol). ’H—NMR (deuterometanol, delta): 1,3-2,0 (CH2 • 6), 2.42 (CHJ, 2,9-3,4 (NCH2 • 5), 3,37 (OCH3), 4,0 (CH), 5,03 (CH2), 5,08 (CH2), 5,34 (CH) és 7,29 (C6H5 • 2). c) lépés (-)-l l-(0-Metil)-spergualin előállítása 5 ml etanol, 5 ml víz és 0,36 ml 1 n sósavoldat elegyében feloldunk a b) lépésben említett, 47 : 50 arányú termékkeverékből 130mg-ot, majd az oldathoz 50 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk. Ezt követően az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngáz-áramban 4 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot ezután feloldjuk 3 ml vizben, majd az így kapott oldatot félvisszük 150 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) gyantából álló oszlopra. Az oszlopot 900 ml vízzel és 900 ml 1 nfplos vizes nátrium-klorid-oldattal gradiens-eluálásnak vetjük alá, 17 g-os frakciókat szedve. A 76-81. számú frakciókat összeöntjük, majd a 22. példában ismertetett módon Sephadex LH-20 márkanevű gyantát használva sómentesitjük. így 25,4 mg (51%) mennyiségben fehér por alakjában a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapjuk trihidrokloridsóként. Fajlagos forgatóképessége [a}2^= -21,\° (c=l, víz). A. 83-86. számú frakciókat hasonló módon sómentesítve 24,5 mg (52%-os kihozatal) mennyiségben fehér por alakjában (- )-spergualin-tríhidroklorid különíthető el. 28. példa (-)-11 -(O-Etil)-spergualin előállítására A 27. példa b) lépésében ismertetett módszerhez hasonló módon diazo-etán metilén-kloridos oldatát a 27. példa a) lépésében ismertetett módon előállított vegyületből 352 mg-mal (0,451 millimól) reagálfatva 217,0mg mennyiségben olyan keveréket kapunk, amely (- )-1 -[N,4-bisz(benziloxi-karbonil)]-l l-(0-etil)-spergualin-hidrokloridból és reagálatlan ( - )-1 -[N,4-bisz(benziloxi-karbonil)]-spergualin-hidroklorídból áll. Ezt a keveréket azután lényegében a 27. példa c) lépésében ismertetett módon szeparálásnak alávetve 41,7 mg (17,1%-os összhozamnak felel meg) mennyiségben fehér por alakjában a példa címadó vegyületét kapjuk trihidrokloridsóként. Fajlagos forgatóképessége [a]« =-24,8° (c=l, víz). 29. példa (- )-N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7- gUanidino-heptánamido)-2-metoxi-etánsavamid előállítása a) lépés (— )-N-[4-(3-benziloxi-karbonil-amino-propil)benziloxi-karbonil-amino-butil]-2-(7-guanidino-2- hepténsavamido)-2-metoxi-etánsavamid előállítása 1,2 ml N,N-dimetil-formamidban feloldunk a 27. példa b) lépésében isn ./teteit vegyületből 134,8 mg-ot (0,187 millimól), majd az így kapott oldathoz hoz/., adunk 192,9 mg (0,935 millimól) diciklóhexil-karbodiimidet és 5,6 mg réz(I)-kloridot. Az így kapqtt reakcióelegyet 70 °C-on 3 órán át melegítjük, majd lehűtjük, a kivált csapadékot kiszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot feloldjuk 5 ml, előzetesen pH 7-re beállított 30%-os vizes metanőlban, majd az így kapott oldatot átbocsátjuk 80 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából álló oszlopon. Az oszlopot először 300 ml vízzel , majd 300 ml 10%-os vizes metanollal mossuk. Az eluálást metanollal végezzük. A Sakaguchi-reakcióra pozitív frakciókat összegyűjtjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk, 114 mg mennyiségben a lépés nyers címadó vegyületét kapva hidrokloridsó formájában. E nyers termék 'H—NMR-spektrumát deuterometanolban felvéve delta = 6,02 értéknél az olefinprotonra jellemző csúcs észlelhető. b) lépés (- )-N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7- guanidino-heptánsavamido) -2-metoxi-etánsavamid előállítása . 5 ml metanol és 5 ml víz elegyében feloldunk az a) lépésben kapott nyers termékből 114 mg-ot, majd a kapott oldathoz 0,32 ml 1 n sósavoldatot és 50 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngáz-áramban 1,5 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot átbocsátjuk 100 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) márkanevű gyantából álló oszlopon, majd az oszlopot 500 ml vízzel és 500 ml 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldal tal gradiens-eluálásnak vetjük alá, 10 g-os frakciókat szedve. A 69-74. számú frakciókat összeöntjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot 5-5 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extraktumot 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk, metanollal eluálva és 5 g-os frakciókat szedve. A 16-21. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 17,4 mg mennyiségben (16,7%-os összhozamnak felel meg) fehér por alakjában a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapva. Fajlagos forgatóképesség [a]“ = -30,4" (c= 1, víz). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű N-[4-(3-aminopropiI)-amino-butil]-2-(omega-guanidino-zsírsav-
