187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 187 417 2 1528 g (82%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsó formájában. A 11 -(O-metil)-spergualin-trihidroklorid epimerekké történő szeparálása céljából nagynyomású folyadékkromatográfiás elválasztást alkalmazunk, e célra 2 cm átmérőjű és 25 cm hosszú, az M. Nagel Co. által gyártott Nucleosil 30C18 márkanevű gyantával (fordított fázisú töltőanyag) töltött oszlopot használva a következő paraméterek betartásával: Átfolyási sebesség: 10 ml/perc nyomás: 30 kg/cm3 oldószer: acetonitril, továbbá 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 9 : 91 térfogatarányú elegye bevitt kiindulási anyag mennyisége: 6 mg detektálás: 205 nm hullámhosszú ibolyántúli fény. A nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat során először a (- )-l l-(0-metil)-spergualinnak megfelelő abszorpciós csúcs (a retenciós idő 48,3 perc), majd a ( + )-ll-(0-metil)-spérgualinnak megfelelő abszorpciós csúcs (a retenciós idő 56,5 perc) jelent meg az ibolyántúli spektrumban. Az ilyen módon történő frakcionálást tizenkétszer megismételjük. Minden egyes csúcsnak megfelelő frakciót elkülönítünk, majd az így nyert frakciókat összeöntjük és az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM -Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 32,9 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-l l-(0-metil)-spergualin-trihidrokloridot és 24,5 mg mennyiségben fehér por alakjában (+ )-11 -(O-metil)-spergualin-trihidrokloridot kapunk. 23. példa ll-(0-Etil)-spergualin (23. vegyület) előállítása 484 mg (0,94 millimól) spergualin-dihidrokloridhoz [(-)-spergualin : (+ )-spergualin = 1:1], hozzáadunk 20 ml vízmentes etanolt és 2 ml etanolos 2 n sósavoldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 10 ml vízben feloldjuk. Az így kapott vizes oldat pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxidoldattal 4-re beállítjuk, majd az oldatot a 22. példában ismertetett módszerrel lényegében egyező módon tisztítjuk, CM Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva, így 355,6 mg (70%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. Ezt a terméket ezután epimerjeire szeparáljuk a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel lényegében egyező módon, mindössze azzal a különbséggel, hogy oldószerként acetonitrilt, valamint 0,01 mólos nátriumpentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátriumhidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 10,5 : 89,5 térfogatarányú elegyét használjuk. Összesen hatszor ismételt frakcionálás után 11 mg mennyiségben fehér por alakjában ( - )-l l-(0-etil)-spergualin-trihidrokloridot és 14,5 mg mennyiségben fehér por alakjában ( + )-l l-(0-etil)-spergualin-trihidrokloridot kapunk. 24. példa ll-(0-n-Butil)-spergualin (24. vegyület) előállítása 493 mg (0,96 millimól) ( - )-spergualin-trihidrokloridhoz hozzáadunk 30 ml n-butanolt és 3 ml, hidrogén-kloriddal telített n-butanolt, majd az igy kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük. Ezt követően a reakcióelegynek a n-butalonban oldható részét szárazra pároljuk, majd a kapott maradékot 10 ml vízben oldjuk. Az így kapott vizes oldat pH-értékét 1 :tt vizes nátrium-hidroxi j-oldattal 4-re beállítjuk, majd az oldatot a 22. példában ismertetett módszerrel lényegében egyező módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 114,7 mg (21%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. Ezt a terméket epimerjeire szeparálhatjuk a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel lényegében egyező módon, oldószerként azonban acetonitrilt, illetve 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfcnát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 14,5 : 85,5 térfogatarányú elegyét használva. Öszsz;sen hatszoros ismételt frakcionálás után 15 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-ll-(O-nbutilj-spergualin-trihidrokloridot és 16 mg fehér por alakjában (+ )-I [-(O-n-b util)-spergualin-trihidrc kloridot kapunk. 25. példa 1 l-[0-(2-hidroxi-etil)]-spergualin (25. vegyület) előállítása 2,88 g (5,61 millimól) (- )-spergualin-trihidroklorid 100 ml etilén-glikollal készült oldatához hozzáadunk 10 ml, hidrogén-kloriddal telített etilénglikolt, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük. 200 ml viz adagolását követően a reakcióelegy pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal 4-re beállítjuk, majd a reakcióelegyet a 22. példában ismertetett módszerrel lényegében azonos módon tisztítjuk, CM Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 gyantákat használva. így 2,7 g (73%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. Ezt a terméket azután epimerjeire szeparálhatjuk a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel, a következő különbségeket figyelembe véve: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
