187372. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a C-15003 P-O antibiotikum előállítására
A találmány tárgya eljárás az új (II) képletű yegyület előállítására. Különböző talaj- és egyéb mintákat összegyűjtve megvizsgáltuk az azokból izolálható mikroorganizmusokat. Azt találtuk, hogy bizonyos mikroorganizmusok egy új antibiotikum termelésére voltak alkalmasak, hogy ezek a mikroorganizmusok a Nocardia genus-hoz tartoztak, és, hogy e mikroorganizmusok bármelyikét megfelelő közegben tenyésztve lehetőség nyílott az említett új antibiotikum összegyűjtésére a táptalajban. Azt találtuk továbbá, hogy az említett antibiotikumból kiindulva annak bizonyos származékai is előállíthatók, A találmány tárgya eljárás a (II) képletű vegyület előállítására oly módon, hogy az (I) általános képletü, C-15003 jelű antibiotikumot - a képletben /CH3 R jelentése egy —CO—CH , ^CH3 — CO—CH2—CH2—CH3 vagy ^CH3 —CO—CH2—CH csoport - reduktív ^CH3 hidrolízisnek vetjük alá. A kiindulási anyagként használt (I) általános képletű antibiotikumot úgy állítjuk elő, hogy egy a Nocardia genushoz tartozó, a C-15003 antibiotikum termelésére alkalmas mikroorganizmust egy asszimilálható szénforrásokat és emészthető nitrogénforrásokat tartalmazó táptalajban tenyésztünk mindaddig, míg az antibiotikum jelentős mennyisége halmozódik fel, majd a C-15003 antibiotikumot elkülönítjük. A találmány leírásában a „C-15003 antibiotikum” kifejezést általános értelemben, akár a három (I) általános képletű vegyület általános megjelölésére, akár közülük kettő vagy három elegyének, akár, ritkán, az egyes vegyületeknek jelölésére használjuk. Közelebbről, azt az (I) általános képletű vegyületet, ahol , /CH3 R —CO—CH csoportot jelent, ^CH3 „C-15003 P-3 antibiodkum”-nak nevezzük, még rövidebben „C-15003 P-3”-nak; az R helyén —CO—CH2—CH2 —CH3 csoportot tartalmazó antibiotikum közelebbi megjelölése „C-15003 P-3' antibiotikum” vagy rövidebben „C-15003 P-3'”; míg azt az (I) általános képletű vegyületet, /CH3 ahol R a — CO—CH2—CH csoportot je... lenti, „C-15003 P-4 antibiotikum”-nak, vagy még rövidebben „C-15003 P-4”-nek hívjuk. A (II) képletű vegyület rövid megjelölése pedig „C-15003 P-0 antibiotikum” vagy rövidebben „C-15003 P-O”. Egy a C-15003 antibiotikum termelésére alkalmas mikroorganizmus törzs például a kísérleteink során a talaj- és egyéb mintákból izolált C-15003 számú Actinomyces törzs. A C-15003 számú törzs mikrobiológiai jellemzőit a Schírling és Gottlieb által javasolt módszerhez (International Journal of Systematic Bacteriology 15, 313-340 [1966]) hasonló eljárással vizsgáltuk. A 28 °C-on, 21 napon keresztül végzett megfigyeléstik a következő eredményekhez vezettek. 1. Morfológiai jellemzők A vegetatív micélium agar és folyékony táptalajon egyaránt jól szaporodik és elágazódik. Sok gombasejt 0,8-1,2 fim átmérőjű, és néhány esetben a pálcika alakú baktériumokra emlékeztető vagy elágazó, rövid sejtekre osztódhat. A törzs jó növekedést mutat különböző taxonómiai táptalajokon, ahol az aerób micélium ráépül a vegetatív micé- 1 umra, bár az gyakran coremium-szerű testeket (50—200 x 200-1000 ^m) alkot, amelyeken további aerób növekedés léphet fel. Sok aerób micélium rugalmas, és néhány esetben egyenes vagy laza spirálszerű konfigurációt lehetett megfigyelni. Az öregített tenyészetek mikroszkopikus vizsgálata azt mutatta, hogy conidium-szerű sejtek csak néhány esetben jelennek meg a láncokban, míg az ilyen tenyészetek tetejéből nyert sejtszuszpenziók, mikroszkópos megfigyelések szerint, sok elnyújtott ellipszoid (0,8-1,2 fim x 4,8-6,8 fim) és ellipszoid t,0,8-1,2 x 1,0-2,0 /im) alakú, az arthrospores-re emlékeztető testet tartalmaztak. Az elektromikroszkópos vizsgálatok azt mutat:ák, hogy ezek a testek sima felületűek. 2. A sejtek összetevői A törzset módosított ISP 1. számú táptalajon rázással tenyésztettük 28 °C-os hőmérsékleten, 66-90 órán át. A tenyésztés befejeztével a sejteket összegyűjtöttük és leöblítettük. B. Becker és mtsai (Applied Microbiology 12, 421 [1964]) és M. P. Lechevalier (Journal of Laboratory and Clinical Medicine 71, 934 [1968]) módszerével megvizsgáltuk a fenti sejtek diamino-pimelinsav és cukor tartalmát. Az első vegyületről azt találtuk, hogy mezőformájú, míg olyan helyeket is detektáltunk, amelyek galaktóznak és arabinóznak feleltek meg. 3. Taxonómiai táptalajokon mutatott jellemzők A törzs viszonylag jó növekedést mutatott különböző táptalajokon, ahol a vegetatív micélium színtelentől halvány sárgáig változott a tenyésztés kezdeti fázisaiban, és színe világos sárgásbarna és világosbarna között volt a későbbi fázisokban. Azt találtuk, hogy a törzs oldható pigmenteket termel, melyek színe sárgától sárgásbarnáig változhat, különböző taxonómiai táptalajokon. Az aerób micélium porszerű és általában mérsékelt növekedést mutat, színe pedig fehér és világos sárgásbarna között van. A törzs jellemzőit különböző taxonómiai táptalajokon a következő 1. táblázatban foglaljuk össze: 5 1Ö 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
