187294. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teofillin-piperazin származékok előállítására
1 18 7.294 2 Span 80 * 50% Hajtóanyag (C): 30% Freon 11 70% Freon W 99,0% Aeroszolos készítmény IV Hatóanyag 3,0% Span 85 (szorbitán-trioleát) 1,0% Freon 11 (triklór-monofluor-metán) 30,0% Freon 114 (diklór-tetrafluor-etán) 41,0% Freon 12 (diklór-difluor-metán) 25,0% 37. példa Antianafilaktikus hatás vizsgálata A vizsgálatot him Sprague Dawley törzsbe tartozó (IFFA CREDO), 250 g súlyú patkányokkal végezzük. Egy meghatározott 0 időpontban az állatokat tojás-albumin (1 mg, s.c.) és alumíniumhidroxid (200 mg, s.c.,) valamint ezzel egyidejűleg Haemophilus pertussis vakcina (Vaxicoq(R) PASTEUR, 1,5 * 1010 organizmus /0,5 ml, 1,5 ml/ /i.p./ patkány) injektálásával érzékennyé tesszük. 14 nap elteltével az állatokat éterrel elaltatjuk és a lemenő aortából vérmintát veszünk. Centrifugálás és hígítás után másik hím Sprague Dawley patkányokba (180-200 g) antiszérumot injektálunk intradermálisan (0,1 ml/i.d.) a hát 3 különböző helyein 24 óra elteltével adagoljuk orálisan a vizsgálandó anyagot, majd 30 perc elteltével a hát másik három helyén intradermálisan hisztamint (30 pg/kg/i.d.) és ezzel egyidejűleg intravénásán 5 mg tojásalbumint és 2,5 mg Evans-Blue-t injektálunk (1 ml/patkány) és 30 perc elteltével az állatokat éter túladagolásával megöljük, bőrüket a hátukon felvágjuk, kifordítjuk és szétterítjük. Az antigén (tojásalbumin) hatására az a három hely, amely megfelel az antiszérumnak (anti-tojásalbumin) kék elszíneződést mutat, amely az Evans Blue (a szubkután mastocytes által szabadon bocsátott hisztamin) helyi diffúziójának következménye. A fyárom másik hely, amdy a hisztamin helyi hatásának felel meg a kontroll jó reakcióképességét mutatja, valamint jelzi a vizsgálandó anya*? specifikus antihisztamin hatását. A felületeket a következő képlet szerint számítjuk: L * 1 * /4, ahol L és 1 az ellipszis hosszú és rövid tengelye. A referencia antiszérum legmegfelelőbb hígítása 100 mm2 felületnek felel meg. A színerősségeket a következők szerint értékeljük ki: 0 - nulla 0,5 - nagyon halvány kék 1 - halvány kék 1,5 mély kék 2 nagyon mély kék A termékek antianafilaktikus hatását a felületeken kapott százalékos gátlásból és a felületek színerősségéből határozzuk meg. Az (I) általános képletü vegyületek és különösen az I., 2., 7., 8., 14., 15., 16., 19. és 20. példa szerinti vegyületek 10-50 mg egyedi adagban gátlást indukálnak. 38. példa Bronchodilatórikus hatás vizsgálata A vizsgálatban! háromszínű hím, 250-300 g súlyú tengerimalacokat (C.E.R.J. Janvier) használunk. Az állatokat etil-karbamáttal (1-2 g/kg/i.p.) altatjuk. Légcső-kanült helyezünk el kis állatokba* (ideális a Palmer-típus) és lélegeztető szivattyúval kötjük össze. Az állatokat kényszerlélegeztetjük és meghatározzuk a sebességet és a frekvenciát. A lélegeztető körbe elektromágneses cellát építünk be, az érzékelő által kibocsátott jelet nyomás előerősítővel, majd erősítővel erősítjük mielőtt a jelet potenciométer útján regisztráljuk. A légcső összehúzódását okozó szereket intravénásán (jugular vein) adagoljuk, miután az állatokat bizonyos ideig pihenni hagytuk, majd gallamint injektálunk (1 mg x kg"'/i.v.), hogy kurarizációvai megakadályozzuk a specifikusan akaratellenes izom reakciókat. Miután állandó légcsőgörcsöt hoztunk létre, a vizsgálandó anyagot ismételten adagoljuk intravénásán (vagy intragasztrikusan), míg a referencia légcsőgörcs ismét jelentkezik. A görcsöt indukáló szerek hisztamin (5 pgx kg-1/ i.v.), szerotonin (10 pgx kg '/* v ) és acetil-klorid (20 pg x kg '/i.v.). A referencia légcsőgörcs százalékos gátlása a vizsgálandó anyag hatásosságának a mértéke. Az (I) általános képletü vegyületek és különösen az l., 2„ 6., 7., 8., 11., 14., 15., 16., 17. és 18. példa szerinti vegyületek 0,002-2 mg egyedi adagban védelmet nyújtanak a légcső összehúzódását okozó szerekkel, mint hisztaminnal acetil-kolinnal és szerotoninnal szemben. 39. példa Muszkulotropikus hatás vizsgálata A vizsgálatokat patkányok izolált nyombelén végezzük a bárium-klorid által indukált összehúzódások vonatkozásában. Vizsgálati állatokként 24 órán át koplaltatott hím, Sprague Dawley törzsbe tartozó, 300-400 g súlyú patkányokat használunk. Az állatoknak levágjuk a fejét és a nyombél egy részét (3-4 cm hosszú) Tyrode-folyadékot tartalmazó, az izolált szervet magábafoglaló vizsgálati csőbe helyezzük és termosztatikus körülmények között levegő-atmoszférában 36,5 *C hőmérsékleten tartjuk. A nyombél másik végét izometrikus szorítócsővel érintkeztetjük és kiinduláskor a szervet 500 mg-ra megnyújtjuk. A bárium-kloridot úgy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
