187152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklodextrin glikoziltranszferáz enzim immobilizálására
1 187 152 2 tottuk és háromszor 50 ml 0,05 mólos náriumacetát pufferrel (pH = 6,5), majd háromszor 100 ml 1 mól nátrium-kloridot tartalmazó 0,05 mólos nátrium-acetát pufferrel (pH = 6,5) mostuk. Végül a gélt háromszor 200 ml desztillált vízzel sómentesre mostuk és liofilizáltuk. Kitermelés : 0,69 g immobilizált CGTáz. Aktivitás: 320 Kitahata egyég/g xerogél. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás ciklodextrin glikoziltranszferáz enzim immobilizálására, azzal jellemezve, hogy . a) a ciklodextrin glikoziltranszferáz enzimet vízben oldható, vagy 0 °C alatti hőmérsékleten szerves oldószerekben oldható karbodiimid vegyülettel aktiváljuk, majd az így kezelt enzimet 4,5-8,5 pH- értékű oldatban poliszacharidok legalább 0,1 mekv/g NH2-csoporttal rendelkező származékaira visszük fel és a terméket mossuk, végül adott esetben szárítjuk, vagy b) a ciklodextrin glikoziltranszferáz enzimet 4,5-8,5 pH-jú oldatban olyan hordozóra visszük fel, melyet akrilsav és/vagy metakrilsav, akrilamid és/vagy metakrilamid monomerből akril- vagy alliltípusú térhálósítószerrel alakítottunk ki, majd a legalább 0,1 mekv/g —COOH funkciós csoportot tartalmazó polimert vízben, vagy 0 °C alatti hőmérsékleten szerves oldószerben oldható karbodiimid ( vegyülettel aktiválunk, a kapott terméket mossuk és adott esetben szárítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy hordozóként cellulóz 5 vagy dextránok aminofunkciós csoportot hordozó éterszármazékait használjuk fel. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a glikoziltranszferáz enzimet akril-amid-N,N'-metilén-bisz-akrilamid-10 akrilsav kopolimerre visszük fel. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az aktiválást N-ciklohexil-N'-[2-(4-morfolinil)-etil]karbodiimid-metil-p-toluol-szulfonsawal vagy 15 N-etil-N'-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimidhidrokloriddal végezzük. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az immobilizálási reakciót előnyösen 0,05-0,1 mólos 20 6,5 pH-jú nátrium-acetát pufferoldatban hajtjuk végre. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az immobilizálási reakciót 0-4 °C hőmérsékleten, 25 45-55, célszerűen 48 óra alatt folytatjuk le. 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a nyers immobilizált terméket nátrium-acetát pufferrel, nátrium-kloridot tartalmazó pufferrel és desz-30 tillált vízzel mossuk. Ábra nélkül Kiadja az Országos Taiálmányi Hivatal A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Szedte a Nyomdaipari Fényszedő Üzem (877675/091 88-0645 — Dabasi Nyomda, Budapest — Dabas Felelős vezető: Bálint Csaba igazgató
