187090. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált dipeptidek előállítására
1 187 090 2 csepegtetjük 3,96 g (15,75 mmól) 4-benzil-2-fenil- 5(4H)-oxazolon 24 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához. Hozzáadunk 2,5 ml (17,1 mmól) trietilamint, és a reakcióelegyet éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyből kiszűrjük a trietil-amin-hidrokloridot, és a szűrt tetrahidrofurános oldatot bepároljuk, és 16 ml piridinben oldjuk a maradékot. Hozzáadunk 50 mg 4-(dimetilaminoj-piridint, és az oldatot szobahőmérsékleten 3 óra hosszáig keverjük. A reakcióelegyhez 16 ml ecetsavat adunk, és 45 percig 100 °C-on melegítjük. Utána a reakcióelegyet lehűtjük, vákuumban bepároljuk, etil-acetátban oldjuk, és vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal és híg sósavoldattal extraháljuk. Az etil-acetátos extraktumot bepárlás után 0,038 - 0,07 mm (230 — 400 mesh) szemcseméretü szilikagéllel töltött oszlopon etil-acetát/benzol (4 : 6) oldószereleggyel eluálva kromatografáljuk, így 4,9 g 1 - {N - (benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 3 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - L - prolin - benzil - észtert kapunk. Az elemanalízis eredményei a C40H4lN3O7 • 0,42 H20 összegképletre: számított: C % 70,31 ; H % 6,17; N % 6,15; mért: C% 70,31; H % 6,08; N%6,13. e) 1 - {N - [3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - L - prolin - monohidroklorid. 1,0 g 1 - {N - (benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - L - prolin - benzil - észtert oldunk 30 ml vízmentes etanol és 2,25 ml 1 n sósavoldat elegyében. Hozzáadunk 200 mg 10 %-os palládiumosszén katalizátort, és az oldatot hidrogénatmoszférában éjszakán keresztül keverjük. A katalizátort kiszűrjük, és az oldatot bepároljuk. A 700 mg nyersterméket egy előbbi kisebb kísérletből származó 300 mg nyerstermékkel egyesítjük, és metanolban oldva átengedjük egy 38,1 cm x 2,54 cm (15 inch x 1 inch) méretű LH-20 töltetű oszlopon. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, bepároljuk, vízben oldjuk, és szűrjük. A tiszta vizes oldatot liofilizálva 800 mg 1 - {N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - L - prolin - monohidrokloridot kapunk. Md ~ 59,6° (c — 1 >4; metanol). Olvadáspont: 98— 130 °C (bomlás). Vékonyrétegkromatográfia : szilikagél; Rf = 0,44; butanol : ecetsav : víz = 4 : 1 : 1. Az elemanalízis eredményei a C,5HmN305C1 • 0,75 H20 öszegképletre: számított: C % 59,88; H % 6,33; N % 8,38; Cl % 7,07; mért: C % 59,82; H % 6,30; N % 8,42; Cl % 6,85. 2. példa 1 - {N - [7-Amino - 3 - (benzoil - amino) - 2 - oxo- heptil] - L - alanil} - L - prolin - dihidroklorid. a) N - a - Benzoil - N - e - (benziloxi - karbonil)- L - lizin. 10,09 g (36 mmól) N-e-(benziloxi-karbonil)-L-lizin 26 ml 1 n vizes nátrium-hidroxid oldattal készített jéghideg oldatához 5 mi (43,2 mmól) benzilkloridot és 10,8 ml 4 n nátrium-hidroxid oldatot adunk egyidejűleg 30 perc alatt 5 adagban. A jeges fürdőt eltávolítjuk, és a keverést szobahőmérsékleten további 1,5 óra hosszáig folytatjuk. A reakcióelcgyct utána etil-acetáttal extraháljuk (eldobjuk), a vizes anyalúgot híg sósavoldattal megsavanyítjuk, é-. etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos extraktumot bepároljuk, és a maradékot etii-acetát és hexán elegyéböl kristályosítjuk, így 12,9 g N - a- benzoil - N - e - (benziloxi-karbonil) - L - lizint kapunk. Olvadáspont: 110-112° (109°). b) 4 - (4 - [(Benziloxi - karbonil) - amino] - butil}- 2 - fenil - 5(4H) - oxalozon. 11,53 g (30 mmól) N - a - benzoil - N - e - (benziloxi - karbonil) - L - lizint oldunk 55 ml tetrahidrofuránban, és jeges fürdőben keverjük. Ehhez a reakcióelegyhez 6,8 g (33 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk tetrahidrofuránban cseppenként 15 perc alatt. A jeges fürdőt egy óra múlva eltávolítjuk, és a keverést szobahőmérsékleten további 18 óra hosszáig folytatjuk. A diciklohexilkarbodiimidet kiszűrjük, és a tetrahidrofuránt vákuumban eldesztilláljuk. A maradékot etil-acetát/ hexán elegyből kristályosítva 9,4 g 4 - {4 - [(benziloxi - karbonil) - amino] - butil} - 2 - fenil - 5(4H) - oxazolont kapunk, amelynek olvadáspontja 72-73 °C (68 °C). c) 1 - [{N - (Benziloxi - karbonil) - N - 7 - [(benziloxi - karbonil) - amino] - 3 - (benzoil-amino) - 2 - oxo - heptil} - L - alanil] - L - prolin - benzil- észter. 2,82 g (6 mmól) 1 - [N - (benziloxi - karbonil) - N - (karboxi - metil) - L - alanil] - L - prolin - benzil - észtert (az 1. példa c) pontjából) oldunk 20 ml tetrahidrofuránban és az oldatot jeges fürdőben keverjük. Hozzáadunk 0,63 ml (7,2 mmól) oxalilkloridot, majd ezt követően négy csepp dimetilformamidot. A reakcióelegyet jeges fürdőben 20 percig keverjük, utána szobahőmérsékleten további egy óra hosszáig. Az oldószereket vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot 10 ml tetrahidrofuránban újra oldjuk, és jeges fürdőben lehűtjük. Ehhez a hideg oldathoz keverés közben hozzáadjuk 2,2 g (6 mmól) 4 - {4 - [(benziloxi - karbonil) - amino] - butil} - 2 - fenil - 5(4H) - oxazolon 14 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát, majd ezt követően 0,85 ml (6 mmól) trietil-amint. A jeges fürdőt eltávolítjuk, és a reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált trietil-amin-hidrokloridot kiszűrjük, és az anyalúgot vákuumban bepároljuk. A maradékot újból oldjuk 6 ml piridinben, hozzáadunk 30 mg4-(dimetil-amino)-piridint, és az oldatot szobahőmérsékleten 3 óra hosszáig keverjük. Hozzáadunk 6 ml ecetsavat, és a reakcióelegyet 45 percig 105 °C-on keverjük. Utána bepároljuk, etilacetáttal oldjuk, és vízzel, hig sósavoldattal és vizes nátrium-iiidrogén-karbonát oldattal mossuk. Az oldószer eidesztillálása után a 3,8 g nyersterméket 230 g sziltkagélen etil-acetát/hexán (4 : 3) eleggyel majd etil-acetát/hexán (2: 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk, így 1,8 g 1 - [N - (benziloxi - karbonil) - N - {7 - [(benziloxi - karbonil) - amino] - 3 -5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
