187090. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált dipeptidek előállítására

1

187 090

2

mmól) (S) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanin - monohidroklorid, 0,73 ml (5,1 inmól) klór-hangyasav-bcnzil-észler, 7 ml viz és 7 ml dioxán elegyéhez 25 °C-on. A kapott elegyet 25 °C-on 3 óra hosszáig keverjük, utána 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldatba öntjük, és dietil-éterrel mossuk. A vizes réteget sósavval megsavanyítjuk, és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az extraktumot magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A kapott színtelen olajat dietil-éterrel eldörzsölve 150 mg fehér, szemcsés, szilárd anyagot kapunk, amelyet kiszűrünk, és kidobunk. Az anyalúgot vákuumban bepároljuk, így

1,75 g (S) - N - (benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - feni! - 2 - oxo - butil] - L - alanint kapunk üvegszerű fehér anyagként.

d) (4S) - 1 - {N - (Benziloxi - karbonil) - N - [(S)

- 3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil]- L - alanil} - 4 - fluor - fenoxi) - L - prolin - benzil- észter.

300 mg (0,62 mmól) (S) - N - (benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo- butil] - L - alanin, 300 mg (0,62 mmól) (4S) - 4 - (4 - fluor - fenoxi) - L - prolin - benzil - észter - p

- toluol - szulfonát - só, 0,09 ml (0,62 mmól) trietilamin, 130 mg (0,62 mmól) diciklohexil-karbodiimid és 90 mg (0,62 mmól) hidroxi-benztriazolhidrát 7 ml tetrahidrofuránnal készített elegyét 25 °C-on 20 óra hosszáig keverjük. Utána a reakcióelegyet megszűrjük, és etil-acetáttal hígítjuk. A kapott oldatot egymás után l n sósavoldattal és 10 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és bepároljuk. így 500 mg (4S) - 1 - {N - (benziloxi

- karbonil) - N - [(S) - 3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - butil] - L - alanil} - 4 - (4 - fluor - fenoxi)

- L - prolin - benzil - észtert kapunk halványsárga olajként.

e) (4S) - 1 - {N - [(S) - 3 - (Benzoil - amino) - 4- fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - 4 - (4 - fluor- fenoxi) - L - prolin - monohidroklorid.

500 mg (0,06 mmól) d) pontban kapott észtertermék, 100 mg 10 %-os pailádiumosszén katalizátor, 15 ml vízmentes etano! és 0,8 ml (0,8 mmól) 1 n vizes sósavoldat elegyét atmoszferikus nyomáson és 25 °C-on 17 óra hosszáig hidrogénezzük, utána szűrjük, és bepároljuk. A maradékot HP-20 töltetű oszlopon 0,01 n vizes sósavoldat : metanol ( : 1) —* (1 : 1) lineáris gradienssel eluálva kromatografáljuk. A kívánt terméket (vékonyrétegkromatogram alapján) tartalmazó frakciókat egyesítjük és bepároljuk. A maradékot minimális mennyiségű metanolban oldjuk. Dietil-étert adunk hozzá, mire fehér csapadék válik ki, amelyet kiszűrünk, és vákuumban megszárítunk. így 200 mg (4S) - 1 - {N

- [(S) - 3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil]

- L - alanil} - 4 - (4 - fluor - fenoxi) - L - prolin - monohidrokloridot kapunk, amelynek olvadáspontja 152- 153 °C (bomlás).

Md = ~ 50° (c = 0,5; metanol).

A vékonyrétegkromatográfia adatai ; szí!íkagél; klorofrom : metanol : ecetsav = 4:1:1;

Rf = 0,75.

Az elemanaiizis adatai a

C^H^FNjOe • HCÍ • 1,5 H20 összegképletre: számított: C% 59,57; H % 5,80;

N % 6,72; Cl % 5,67;

mért:C % 59,68; H % 5,56;

N % 6,67; Cl % 5,99.

22. példa

[1(S),4R] - 1 - (N - [3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil

- 2 - oxo - butii] - L - alanil} - 4 - fenil - L - prolin

- monohidroklorid.

a) (S) - N - (Benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanin - szukcinimido - észter.

800 mg (1,6 mmól) (S) - N - (benziloxi - karbonil) N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil]

- L - alanin (amelyet a 10. példa c) pontjában megadottak szerint állítunk elő), 340 mg (1,6 mmól) diciklohexil-karbodiimid és 190 mg (1,6 mmól) N-hidroxi - szukcinimid 5 ml tetrahidrofuritnnal készült oldatát 25 °C-on 18 óra hosszáig keverjük. Utána megszűrjük a reakcióelegyet, és bepárolva 950 mg (S) - N - (benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil]- L - alanin - szukcinimido - észtert kapunk.

b) [1(S),4R] - 1 - {N - (Benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - 4 - fenil - L - prolin.

950 mg (1,6 mmól) (S) - N - [3 - (benzoil - amino)- 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanin - szukcinimido- észter 5 ml dimetil-formamiddal készített oldatához 375 mg (1,7 mmól) (4R) - 4 - fenil - L - prolin- hidrokloridot és 0,04 ml (3,2 mmól) trietil-amint adunk. A kapott elegyet 25 °C-on 24 óra hosszáig keverjük, majd fölös mennyiségű 1 n sósavoldatba öntjük, és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az extraktumokat egyesítjük, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és bepárolva 1,1 g [1(S),4R] - 1

- {N - (benziloxi - karbonil) - N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - 4- fenil - L - prolint kapunk.

c) [1(S),4R] - 1 - {N - [3 - (Benzoil - amino) - 4- fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - 4 - fenil - L - prolin - monohidroklorid.

1,0 g (1,5 mmól) b) pontban előállított termék, 20 ml etanol, 5 ml víz, 1,5 ml (1,5 mmól) 1 n sósavoldat és 100 mg 10 %-os pailádiumosszén elegyét atmoszferikus nyomáson 25°C-on 18 óra hosszáig hidrogénezzük, utána megszűrjük, és bepároljuk. A maradékot HP-20 töltetű oszlopon 0,01 n vizes sósavoldat : metanol (40 : 60) -+ (10 : 90) lineáris gradienssel kromatografáljuk. A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat alapján a kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és bepároljuk. A maradékot minimális mennyiségű metanolban oldjuk. Dietil-étert adunk hozzá, és a kapott fehér csapadékot kiszűrjük, és megszáritva 300 mg [1(S),4R] - 1 - {N - [3 - (benzoil- amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - 4 - fenil - L - prolin - monohidrokloridot kapunk, amelynek olvadáspontja 160- 162 °C (bomlás).

[a]y = —57° (c = 1,5; metanol).

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

18