187068. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szultamicillin kritályos benzol-szulfonát-sói előállítására
1 187 068 2 általános képletű kristályos dihidrát só, melyet kívánt esetben pl. átkristályosítással tovább tisztítunk. Az (I) általános képletű sók előállításának másik módja, ha a szultamicillin amino-védett prekurzo- 5 rát reagáltatjuk benzol-szulfonsav vagy 4-klórbenzolszulfonsav jelenlétében olyan körülmények között, melyek során eltávolítjuk az amino-védőcsoportot is és lehetővé tesszük a sóképzést. Egy előnyös ilyen reakció lehet a szultamicillin enamín- 10 védett prekurzorának pl. a 6 - [D - (2 - [1 - metil - 2 - metoxi - karbonil - vinil - amino] - 2 - fenil - acetamido)] - penám - 3 - karbonsav - 1,1 - dioxo - penicillanoiloxi - metil - észterének reakciója ekvimoláris mennyiségű benzol-szulfonsawal vagy 4- 15 klór-benzolszulfonsavval, poláros szerves oldószer, pl. etil-acetát és víz jelenlétében. Ilyen körülmények között és szobahőmérsékleten az enamin-védőcsoportot eltávolítjuk, a kívánt sót képezzük, amely az oldatból rendszerint kristályos dihidrát formájá- 20 ban válik ki. Ha a sóképzést vízmentes körülmények között végezzük, a keletkezett termék vízmentes (I) általános képletű vegyület. Ha a használt vízmennyiség kevesebb, mint amennyi a dihidrát képzéséhez 25 szükséges, akkor vízmentes, monohidrát- és dihidrát-formák elegye keletkezik. Az (I) általános képletű vízmentes sók és monohidrátok hasznos intermedierek, amelyek a stabilabb dihidrátokhoz vezetnek nedvesség hatására. A találmány szerint előállított kristályos dihidrát-sók előnyös tulajdonságokkal rendelkeznek, melyek következtében a vegyületek különösen hasznos orálisan adagolható antibakteriális szerek. A gyomor bélrendszerből könnyen felszívódnak 35 A felszívódás alatt vagy azt követően in vivo észterhidrolízis következik be ampicillin és a ß-laktamäz inhibitor penám-3-karbonsav-í,l-dioxid (sulbactam) felszabadulása mellett. Ezeknek a sóknak vizes rendszerben igen alacsony, de megfelelő az ol- 40 dékonysága, így a vizes orális dózis-formák, pl. a gyermekgyógyászatban kedvelt orális szuszpenziók stabilitása megnő. Farmakokineíikai vizsgálatok Ha a találmány szerint előállított kristályos vegyileteket és a hidroklorid-sót laboratóriumi állatoknak orálisan adagoljuk, akkor mindkét esetben kiváló farmakokinetikai tulajdonságokat tapasztalunk. A patkányokon végzett eredményeket az I. táblázatban összegeztük. Az adatok azt mutatják, hogy mindhárom só könnyen felszívódik és hidrolizálódik orális adagolás hatására és így az ampicillin és a ß-laktamäz inhibitor, sulbactam szérum-szintje is igen magas lesz. A három só közötti különbséget az í. táblázat mutatja, ezek a különbségek statisztikusan nem szignifikánsak. A fenti adatokat 80- 100 g-os Sprague-Dawley patkányokkal kaptuk. A vegyületeket orálisan adagoltuk (vegyületenként 5 patkánynak) vizes szuszpenzió formájában 0,5 ml, 20 mg/kg hatóanyagot tartalmazó mennyiségben. A vérmintákat a megadott időkben vettük és differenciális biokísérletnek vetettük alá a mintákat, hogy meghatározzuk az ampicillin és a sulbactam szinteket. Az ampicillin biológiai kísérlet Sarcina íutea (ATCCC 9341) törzs segítségével történik, me y utóbbi az ampicillinre érzékeny, de nem érzékeny a sulbactamra 100 pg/ml koncentrációknál, mivel nem tartalmaz ß-laktamäzt. így az organizmus nem mutatja a szinergizmust az ampicillin és sulbactam kombinációkkal. Standard görbét készí- 30 tettünk a normál szérumban 4, 2, 1, 0,5, 0,25 és 0,125 pg/ml ampicillin szinteknél. A steril szűrőpapírlemezeket 25 lambda térfogattal töltjük. A kísérleti lemezeket oltott agar segítségével (Difco) készítettük el. Egy éjszaka tenyésztett Sarcina lutea tenyészetet 1 : 100 arányban hígítunk és 1 ml oldatot hozzáadunk 100 ml agárhoz 30/30 cm-es műanya gtányérok ban. A tányérokat ezután 37 °C-on inkubáljuk 18 óra hosszat, majd a zónákat lemérjük A sulbactam meghatározás azon alapszik, hogy a Pasteurella histolytica (59B010) nem érzékeny ampicillin vagy sulbactam magas koncentrációjára egyedül. Azonban, mivel az ellenállóképességet a I. táblázat 20 mg/kg szultamicillin-só patkányoknak történő orális adagolása után kapott farmakokinetikai adatok Szérum-koncentráció (pg/ml) Hidroklorid-só C6H5S03H.2H20 só 4-ClC6H4S03H.2H20 só óra ampicillin sulbactam ampicillin sulbactam ampicillin sulbactam 0,25 1,74 ±0,15 1,51 ±0,27 1,77 ±0,17 1,15 ± 0,13 2,65 ± 0,26 2,21 ±0,32 0,5 1,99 ±0,17 2,15±0,30 2,25±0,16 1,47 ±0,20 2,88 ±0,03 2,29 ±0,24 1 1,39±0,12 1,46 ±0,12 1,31 ±0.07 1,00±0,11 1,47 ±0,18 1,13 ±0,12 1,5 0,87 ±0,11 1,00 ±0,16 0,80 ±0.01 0,67 ±0,11 0,81 ±0,07 0,73 ±0,05 2 0,5 ±0,07 0,71 ±0,13 0,55 ±0,03 0,49 ±0,07 0,39 ±0,06 0,39 ±0,03 3 0,25 ±0,04 0,42 ±0,08 0,26 ±0,02 0,34 ±0,05 0,15 ±0,03 0,16±0,03 4 A szérum görbe alatti 0,13 ±0,02 0,17 ±0,04 0,15±0,0i 0,22 ±0,02 0,06 ±0,007 0,08 ±0,01 terület pg/ml, óra 3,19 3,96 . 3,28 2,91 3,42 2,92 T 1/2, ß-fäzis, óra 0,87 1,18 0,91 1,26 0,63 0,73 3
