186983. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 2-amino-5-pregnén származékok és sóik előállítására
8 186988 9 4. példa 2-amino-N-(20-oxo-5-pregnén-3a-il)-acetamid hidrogén-klorid-sója A kívánt terméket a 2. példában ismertetett eljárás szerint állítjuk elő; Z-glicin vagy N-(benziloxi-karbonil) glicin és holamin reakciójával. A kapott terméket etilacetátból átkristályosítjuk. Op.: 295 °C. C23H35NA, HCl (M = 409,019) képletre az analízis eredményei : C% H % Cl% N% számított: 67,54 9,12 8,67 6,85 mért: 67,8 9,1 8,5 6,7 5. példa (2S)-2-amino-X-(20-oxo-5-pregnén-3a-il)-3-(lH-indol-3-il)-propionamid furmarátja A kívánt terméket a 3. példában ismertetett eljárás szerint állítjuk elő. BOC L-triptofán és holamin reakciójával. A kapott terméket metanolból átkristályosítjuk. Op.: 180 °C. C3íHí3X302) HOOC-CH = CH-COOH, CH3OH (M= 617,76) képletre az analízis eredményei: C% H % N % számított: 68,39 7,91 6,47 mért : 68,1 8,0 6,5 6. példa 2-amino-N-[(20S)-20-hidroxi-5-pregnén-3oc-il]-acetamid hidrogén-klorid-sója A kívánt terméket a 2. példában ismertetett eljárással állítjuk elő; Z-glicin és (20S) 3a-amino-5-pregnén- 20-ol reakciójával. Etil-acetátból átkristályosítjuk. Op.: 264 °C (bomlik). C23H3S, X202, HC1 (M= 447,495) képletre az analízis eredményei C % H % Cl % X % számított: 67,20 9,56 8,63 6,82 mért: 67,3 9,6 8,7 6,8 A (20S)-3a-amino-5-pregnén-20-ol kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 1 1. lépés: 3a-amino-5-pregnén-20-ol 100 cm3 reflux alatt tartott propanolhoz 20 perc alatt párhuzamosan hozzáadunk 5 g nátriumot és 5 g holamin 5 cm3 propanolos oldatát és a keveréket továbbra is reflux alatt tartjuk, 1 óra 25 perc múlva hagyjuk lehűlni szobahőmérsékletre, majd jéggel hűtjük. Ecetsavval megsavanyítva az oldat pH-ját 6-ra beállítjuk, majd kálium-karbonát hozzáadásával a pH-t8 -ra állítjuk be, felhígítjuk 500 cm3 víz hozzáadásával, majd az oldószer egy részét elpárologtatjuk, a maradékot feltöltjük 300 cm3 vízzel és 24 órára jégszekrénybe helyezzük kikristályosítani. Ezután leszűrjük, a kristályokat vízzel átöblítjük, azután feloldjuk 10 cm3 etilén-klorid, 50 cm3 etil-acetát és 30 cm3 izopropil-éter keverékében, majd a metilén-kloridot elpárologtatjuk és az oldatot 16 óra időtartamra jégszekrénybe helyezzük kikristályosítani. Ilyen módon 3 g kívánt terméket kapunk, Op.: 160 °C. 2. lépés: (20S) [3a-(trifluor-acetil-amino)-5-pregnén-20-il ]-trifluor-aeetát 5,5 g 1. lépésben előállított terméket feloldunk 55 cm3 metilén-kloridban és hozzáadunk 5,5 cm3 piridint. Az oldatot lehűtjük 0 °C hőmérsékletre és 5 perc alatt hozzáadunk 5,5 cm3 trifluor-ecetsavanhidridet és szobahőmérsékleten 15 percig keverjük, szárazra pároljuk, majd feltöltjük ciklohexánnal, szűréssel megszárítjuk. Ezután a terméket szilieium-dioxid-oszlopon kromatografáljuk (eluálószer: ciklóhexán: etil-acetát = 9:1), ily módon három frakciót nyerünk. Az első (20R) izomer, a második 3,36 g (20R—20S) izomerkeverék és a harmadik 1,5 g (20S) izomer. Op.: 140 °C. 3. lépés: (20S)-3«-amino-5-pregnén-20-ol 2,4 g, 2. lépésben előállított terméket szuszpendálunk 24 cm3 metanolban és jégfürdőbe helyezzük, majd 12 cm3 2 n vizes nátrium-hidroxidot adunk a keverékhez. 2 óra 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, vízzel felhígítjuk, a szerves fázist metilén-kloriddal extraháljuk és telített nátrium-klorid-oldattal átmossuk, majd szárítjuk és bepároljuk. Ilyen módon 1,42 g kívánt terméket kapunk. Op.: 190 "C. 7. példa Következő összetételű tablettákat állítjuk elő: 2-amino-N-(20-oxo-5-pregrén-3a-il)-acetamid hidrogénklorid sója 20 mg segédanyag 1 tablettához 100 mg-ra kiegészítve (segédanyag-összetétel: laktóz, keményítő, talkum, magnézium-sztearát) Farmakológia i vizsgálat 1. Anafílaxiás sokk-adjuváns Elv: Az állatoknak olyan terméket adagolunk, amely az immunrendszer aktivitását képes stimulálni és ezt a hatást annak az antigén adagolására előidézett reakcióra fellépő sokk fokozódásával fejezzük ki, melyre az állatot szenzitizáltuk. 30—35 g súlyú hímegereket marhaszérum albuminnal szenzitizáltunk intra-plantáris úton. 8 nap múlva az állatok intravénás úton kapják ugyanezt az antigént. Minimális szcnzitizálási feltételek mellett a kontroli-állatok az utolsó adagolás idejekor nem szenvednek halálos sokkot. A tesztelendő terméket intra-plantárisan injektáltuk, antigénnel kevertük, ha ez a termék adjuváns, akkor a szenzitizálást növeli és az intravénás adagolással történő adagoláskor ennek eredménye halálos sokk lesz. Aktív dózisnak tekintjük azt a dózist, amely 50 %ban vagy ennél nagyobb százalékban okoz mortalitást az állatoknál. Eredmények : Példa száma Dózis/állat mg-ban 4 1 6 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
